人民卫生微生物学第8版第八章 空气微生物.ppt

卫生微生物学,仲国维南京医科大学公共卫生学院,第八章空气微生物,目录,第一节：空气生境特征,第二节：空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,第三节：空气微生物的检测和卫生标准,第四节：空气微生物污染预防与控制,第五节:空气微生物应用及研究前景,01,02,03,04,05,重点难点,了解空气生境特征。了解空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义。掌握空气微生物的检测与卫生标准。掌握空气微生物污染、传播方式，微生物气溶胶的定义与意义。掌握空气微生物污染及其预防。了解空气微生物研究的前景。,空气微生物研究的重要性,空气的重要性空气中存在微生物空气微生物与人类健康密切相关空气微生物学,第一节空气生境特征,第一节空气生境特征,电离层和平流层微生物难以生存对流层是大气微生物生存和扩散的主要场所,大气圈分层及各层自然现象与人类活动,1.空气中缺乏微生物生长繁殖所需的营养物质和充足的水分。2.空气微生物的生长繁殖与空气pH有关。3.日光辐射对微生物有杀灭作用，在清洁的空气环境中微生物难以繁殖。4.一般情况下，空气中污染物越多，污染越严重，空气微生物的种类和浓度也会越高。5.空气中无固有微生物丛，空气中的微生物是暂时的、可变的。,第一节空气生境特征,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,空气微生物来源于其他外环境和人、动植物的活动等，是自然因素和人为因素污染的结果。1.室外空气微生物来源（1）土壤（2）水面（3）工农业产生,（一）空气微生物的来源,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,2.室内空气微生物来源（1）人和动物呼吸道排出微生物（2）机械性移动（3）微生物实验室操作不当（4）呼吸道感染患者,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,1.细菌,（二）空气微生物的种类,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,2.真菌,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,流感病毒（上：结构模式图；下：）,腺病毒（上：结构模式图；下：）,3.病毒,1.一般不繁殖微生物在空气中为过路客。2.生存能力强经空气传播的微生物具有耐干燥、抵抗力强。3.时空分布不均（1）室外空气分布：主要是非致病性腐生菌，以及对干燥和辐射有抵抗力的真菌孢子。（2）室内空气分布：室内空气中微生物可来自室外空气，但主要来自人体或人类活动。,（三）空气微生物的分布,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,（3）高度分布：离地面越高，微生物含量越少，粒子也越小，抵抗力越强，致病性越小。（4）水平分布：与室内外分布关系密切。城市上空和人群密集场所的微生物、尤其是病原微生物数量明显增高。（5）时间分布：一天内不同时间微生物分布不一样，也有季节性变化。4.易受气象和大气污染影响气象、气候(湿度、温度、风力等)对空气微生物的种类和数量影响较大。,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,1.动物疫病的传播和感染。2.引起变态或过敏反应。3.食品的腐败变质或引起食物中毒。4.植物疫病的传播。5.对制药、发酵、电子元件生产造成影响。6.生物战剂及危害。,（四）空气微生物的卫生学意义,第二节空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义,第三节空气微生物的检测和卫生标准,第三节空气微生物的检测和卫生标准,空气微生物样品的特点1.一般情况下，空气微生物浓度较低。2.能够存活的微生物都有较强的耐受力。3.与各种颗粒物结合形成微生物气溶胶。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,1.自然沉降法2.惯性撞击式采样法3.过滤阻留式采样法4.静电沉着采样法5.温差迫降采样法6.其他采样方法,（一）空气微生物采集,第三节空气微生物的检测和卫生标准,1.自然沉降法（沉降平板法）,（1）原理：根据空气中携带有微生物气溶胶粒子在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上，经24小时、37温箱培养后计算出菌落数。应以菌落形成单位CFU/皿或CFU/m3表示。（2）特点：简单方便，缺点是采集效率低、稳定性差。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,（3）采样步骤：选择有代表性的采样点，一般在室内四角及室中央，放置含营养琼脂的平皿。打开皿盖（将皿盖置于平皿底下，不可仰放，以防污染），将有培养基的平皿，暴露于空气5分钟（视空气清洁程度而定），采样毕合上皿盖，记录采样时间。将已采集的培养基在6小时内送实验室，置于37温箱培养48小时。记录5个平皿的菌落总数。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,（4）结果计算:,N-培养后平皿上菌落数A-平皿面积（cm2）t-暴露时间（min）,50000N每立方米菌落数（CFU/m3）=At,第三节空气微生物的检测和卫生标准,2.惯性撞击式采样法,（1）原理：利用抽气装置在单位时间将一定容量的含有微生物粒子的空气，通过某些装置形成直线或曲线运动的高速气流，使气流中微生物粒子也随之高速运动，当气流改变方向时，运动着的粒子因惯性继续照直前进撞击并黏集于培养基上。（2）分类：直线气流惯性撞击法-全玻璃液体撞击式采样器-固体撞击式采样器曲线气流惯性撞击法,第三节空气微生物的检测和卫生标准,全玻璃液体撞击式采样器的优点,适于高浓度的空气微生物采样。样品可接种不同的培养基培养计数。能测出空气中活微生物数量。采样液有保护作用，对抵抗力弱的微生物（如病毒、立克次体）也能采样。捕获率高，尤其是对于小颗粒。采样器一般由玻璃制成，利于消毒灭菌处理，使用方便、价格低廉、可反复使用。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,固体撞击式采样器,单级撞击式采样器将空气中不同大小的含菌粒子撞击于一个采集面上，只能测定空气中微生物的浓度。多级撞击式采样器将空气中不同大小的含菌粒子采集于不同的采集面上，可测定空气中微生物的浓度，也可了解粒子大小分布情况，但结构比较复杂，采样耗费较大。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,Anderson多级筛孔空气撞击式采样器,第三节空气微生物的检测和卫生标准,Anderson采样器使用注意事项,采样器流量为28.3L/min。可用转子流量计进行校对。注意各节的密封度。撞击距离对采样有影响。平皿中培养基厚度影响采样距离，以加27ml培养基较为合适，此时撞击距离为2.5mm左右。采样器的消毒可用酒精擦拭，也可用高压蒸气灭菌或环氧乙烷熏蒸。微生物浓度过高时，颗粒重叠，会产生误差。最多的一节菌落数以50250CFU为宜,第三节空气微生物的检测和卫生标准,结果计算,六级采样平板上总菌数（CFU）1000空气含菌量（CFU/m3）=28.3L/min采样时间（min）,各级菌落数（CFU）100%空气微生物大小分布（%）=所有采集幅度皿菌落总数（CFU）,第三节空气微生物的检测和卫生标准,惯性撞击式采样法检测空气中微生物数量,培养后,培养前,第三节空气微生物的检测和卫生标准,3.过滤阻留式采样法,4.静电沉着采样法,原理：利用高压电场，使空气中的微生物粒子带上一定量的电荷后，而被带相反电荷的采集面所吸着。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,5.温差迫降采样法,6.其他采样方法,温差迫降采样器是基于粒子的热泳原理，使空气中的微生物粒子沉着于采集面上。,生物类采样检测法。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,如何选用采样方法?,采样器的灵敏度采样效率重复性微生物的存活率使用方便易于分析可区分粒子的大小价格,第三节空气微生物的检测和卫生标准,1.定性检测形态学、免疫学、核酸检测等方法。2.定量检测干重法、活菌计数法、浊度法等。3.公共场所空气微生物检验项目包括细菌总数、真菌总数、-溶血性链球菌和嗜肺军团菌。,（二）空气微生物的检测,第三节空气微生物的检测和卫生标准,（三）空气微生物卫生标准(菌落总数),室内空气质量标准GB/T188832002菌落总数撞击法2500CFU/m3撞击法：采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经3748小时培养后，计算出每立方米空气中所含的菌落总数的采样测定方法。一般情况下采样量为30150L，应根据所用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。样品采完后，将带菌营养琼脂平板（361）恒温箱中，培养48小时，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数。以CFU/m3报告结果。,第三节空气微生物的检测和卫生标准,我国公共场所空气卫生细菌学标准,第三节空气微生物的检测和卫生标准,WHO推荐的医院各部门空气细菌标准,第三节空气微生物的检测和卫生标准,居室内空气卫生细菌学评价的参考指标,可代表空气中一般致病菌抵抗力和空气受微生物污染程度与细菌总数呈正相关,第四节空气微生物污染预防与控制,1.传播方式（1）经尘埃传播（2）经飞沫传播（3）经飞沫核传播：组成，传播性最强,（一）空气微生物污染,第四节空气微生物污染预防与控制,第四节空气微生物污染预防与控制,2.微生物气溶胶,（1）气溶胶（aerosol）：以固体或液体微小颗粒分散于空气中的分散体系，它是由分散相（固体或液体微粒及其中的微生物）和分散介质又称连续相（空气)组成的均匀体系，微粒大小一般在0.110m之间。（2）微生物气溶胶（microbialaerosol）属分散性气溶胶，包括液态和固态，主要特点为微粒上附着有各种微生物。,第四节空气微生物污染预防与控制,微生物气溶胶大小与其感染性的关系,直径5m，被阻于鼻腔直径45m，仅到支气管直径14m，到达肺泡直径1m，部分停留于肺泡，其余随呼吸排出,第四节空气微生物污染预防与控制,微生物气溶胶的存活特点,物理衰减：微粒自身从介质中分离出来的衰减生物衰减：微生物自身的死亡影响因素：固有的生命力太阳辐射温度相对湿度（RH）,第四节空气微生物污染预防与控制,（二）空气微生物的预防与控制,原则：微生物数目控制在不能引起感染的范围内1.综合性措施（1）控制污染来源（2）个人防护,个人防护-佩戴口罩,第四节空气微生物污染预防与控制,2.物理方法（1）物理通风法（2）紫外线照射（3）负离子发生器,第四节空气微生物污染预防与控制,（1）物理通风法,自然对流通风湍流空调通风过滤层流通风,第四节空气微生物污染预防与控制,第四节空气微生物污染预防与控制,第四节空气微生物污染预防与控制,垂直层流方式,第四节空气微生物污染预防与控制,水平层流方式,第四节空气微生物污染预防与控制,BSL-2实验室级生物安全柜,第四节空气微生物污染预防与控制,（2）紫外线照射,第四节空气微生物污染预防与控制,化学药剂作为空气杀菌剂的一般特征：,具备高度杀菌力容易分散成气溶胶，并保持较长时间的杀菌活性常温常湿下有效在常用浓度时应对人畜无毒性，无刺激性不具染色性、褪色性,3.化学消毒剂消毒,第五节空气微生物应用及研究前景,第五节空气微生物应用及研究前景,1.监测控制技术2.群落结构和多样性解析技术3.空间洁净技术,小结,空气生境特征室内空气中微生物的主要种类？试列举23种致病性细菌。空气中细菌室内空气微生物中细菌占绝大多数。细菌中有产芽孢与不产芽孢的G(+)球菌和杆菌以及G(-)杆菌等。其中G(+)球菌占多数。通过空气传播的致病性细菌：结核分枝杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌、百日咳杆菌、鼠疫杆菌、嗜肺军团菌，脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌空气中的真菌真菌孢子构成了空气微生物群的主