细胞免疫治疗

肿瘤细胞免疫治疗 久腾医学 基本内容 一 癌症治疗二 肿瘤免疫治疗三 技术发展前景四 公司介绍 一 癌症治疗 一 背景 WHO国际癌症研究中心报告 根据目前癌症的发病趋势 2020年全世界癌症发病率将比现在增加50 全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人 近五十多年来 尽管肿瘤治疗中常用的手术 放疗 化疗等手段有了很大的改进 但肿瘤患者的五年生存率仍提高甚微 人们认识到单靠现有的肿瘤治疗手段是不够的 应大力加强新的有效的肿瘤治疗方法的研究 二 人为什么会得癌症 人类接触致癌物是不可避免的 不过多少而已 人体内癌细胞产生也是每天都有的 不过多少而已 但为什么大多数人不得癌症呢 癌细胞产生 癌细胞清除 12 5 25 0 37 5 50 0 75 0 62 5 87 5 100 0 0 正常小鼠 白细胞的体外杀癌活性 明标实验法 对人宫颈癌细胞 Hela 杀伤率 人体抗癌活性稳定性及相关因素的影响 100 80 60 40 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 周数 急性精神压力 三天恢复 癌细胞杀伤率 100 80 60 40 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 周数 慢性精神压力 三个月恢复 人体抗癌活性稳定性及应相因素 癌细胞杀伤率 人与人之间有差别 不同人对不同癌有差别年龄不同有差别 身体状况不同有差别生活环境有差别 饮食习惯有差别 肿瘤 全身性疾病 系统性疾病 三 癌症治疗方法的比较 放疗 会产生放射性皮炎 放射性食管炎以及食欲下降 恶心 呕吐 腹痛 腹泻或便秘等诸多毒副反应化疗 会产生食欲下降 恶心 呕吐 免疫功能下降 骨髓抑制等副反应手术治疗 有局限性 很多肿瘤无法进行 近年来 肿瘤的生物治疗以其安全有效 副作用小等优点已逐渐被广大医务工作者和患者接受 并已成为继手术 放疗 化疗后的第四种肿瘤治疗模式 手术 放疗 化疗 生物治疗 二 肿瘤免疫治疗 一 概念及历史 肿瘤免疫治疗是生物治疗的一种方法 通过激发和增强机体的免疫功能或以生物制剂的作用调节机体的免疫反应 从而达到治疗肿瘤的目的 1 肿瘤免疫理论的历史 1909年Ehrlich首先提出 免疫系统能从机体内清除改变了的宿主成分 并提出了细胞免疫直接对抗肿瘤的概念 六十年代经Thomas Burnet和Good等人将该观点系统化 提出了免疫监视学说 免疫系统具有一个十分完备的监视功能 能准确地分辨 自己 和 非己 的成分 能消灭机体内突变的细胞 防止肿瘤的生长 上个世纪末 科学家们提出抗肿瘤保护性免疫反应的存在以及诱导和扩大这种反应的可能性 2 肿瘤免疫治疗的临床应用 1 细胞因子疗法 IL 2 IFN IL 12 TNF a 2 生物分子靶向药物 抗人细胞表皮生长因子的单克隆抗体 C225 抗血管内皮生长因子 VEGF 配体的单克隆抗体 Avastin 等等3 过继性细胞免疫治疗 4 肿瘤疫苗疗法肿瘤 5 肿瘤的免疫基因治疗 二 肿瘤过继性细胞免疫治疗 概念指向肿瘤患者转输具有抗肿瘤活性的免疫细胞直接杀伤肿瘤或激发机体免疫反应杀伤肿瘤细胞 1 过继性细胞免疫治疗分类 1 抗原激活的杀伤细胞 TAK 2 肿瘤浸润性淋巴细胞 TIL 3 细胞毒性T淋巴细胞 CTL 4 激活的杀伤性单核细胞 AKM 5 自体细胞因子诱导的杀伤细胞 CIK 6 自然杀伤细胞 NaturalkellcellNK 7 自体DC细胞刺激的CIK细胞免疫治疗 8 经修饰的自体DC细胞刺激的T淋巴细胞治疗 2 CIK细胞治疗肿瘤 又称细胞因子诱导的杀伤细胞 是将人的外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养后获得的T淋巴细胞 因为同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子 又被称为NK细胞样 淋巴细胞 兼具有 淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点 培养9天CIK细胞 培养2天CIK细胞 培养12天CIK细胞 2 1 CIK细胞抗肿瘤治疗的特点 1 CIK细胞增殖速度快 2 CIK细胞对正常细胞无毒性作用 3 CIK细胞杀瘤活性高 杀瘤谱广 4 CIK细胞是活化的自体细胞 应用起来非常安全 2 2 CIK抗肿瘤机理 1 CIK细胞以细胞 杀伤 作用对多种肿瘤细胞均有的杀伤活性 2 CIK细胞表面的CD3样受体被结合而激活CIK细胞产生浆毒性颗粒介导溶解肿瘤细胞作用 3 CIK细胞分泌IL 2 IL 6 IFN 等多种抗肿瘤的细胞因子 2 3 CIK细胞治疗适应症 1 早 中 晚期恶性实体瘤和白血病2 部分暂时不宜做手术 介入或其他治疗的肿瘤患者 2 4 自体CIK细胞的治疗策略 1 手术或放化疗后抽取50ml外周血 2 体外诱导CIK细胞100亿以上 3 患者回输CIK细胞至少一个疗程 每星期回输一次共四次 4 CIK能提高机体免疫功能清除残留的肿瘤细胞防止肿瘤向远处器官转移 2 5 CIK细胞免疫治疗的作用 1 改善生活质量 食欲增强 睡眠改善 体重增加 2 抑制肿瘤复发和转移 3 保护机体的免疫功能 4 一些肝癌患者经过CIK治疗后甲胎球蛋白值下降 肝功能好转 5 血液中抗肿瘤效应细胞数量和抗肿瘤的细胞因子有所提高 3 NK细胞治疗肿瘤 NK细胞来源于造血细胞 其发育成熟依赖骨髓及胸腺微环境 无需抗原预先作用 就可以直接杀伤细nm菌或病毒感染的细胞和肿瘤细胞 原技术上的限制 在体外要获得临床上使用的足够数量的NK细胞有较大困难 而且费用高 培养7天NK细胞 NK细胞 3 1 NK细胞治疗适应症 1 早 中 晚期恶性胶质瘤 肾癌 肺癌 食道癌 肝癌 结肠癌 乳腺癌 卵巢癌等多种恶性实体瘤2 部分暂时不宜做手术 介入或其他治疗的肿瘤患者 也可先进行NK细胞治疗 以提高机体的免疫功能 3 2 自体NK细胞的治疗策略 1 手术或放化疗后抽取患者30ml外周血 2 体外诱导NK细胞30亿以上 3 每星期回输NK细胞一次给患者 至少一个疗程四次 4 CIK能提高机体免疫功能清除残留的肿瘤细胞防止肿瘤向远处器官转移 3 3 NK细胞治疗流程 4 自体DC CIK细胞免疫治疗 将DC细胞在体外直接与CIK细胞混合 体外刺激CIK细胞大量增值后将活化的免疫细胞回输入患者体内 产生抗肿瘤作用 4 1 DC CIK细胞治疗的适应症 1 早 中 晚期恶性实体瘤和白血病2 部分暂时不宜做手术 介入或其他治疗的肿瘤患者 也可先进行D CIK细胞治疗 以提高机体的免疫功能 4 2 DC CIK制备流程 CIK细胞 成熟DC细胞 DC细胞刺激的CIK细胞 1 1 5 1010 肿瘤抗原 PBMNC0 5 3 107 50ml 共培养 细胞因子 细胞因子 4 3 自体DC CIK治疗肿瘤的策略 1 抽取病人50 60ml外周血 2 体外诱导DC CIK细胞100亿以上 3 回输患者DC CIK细胞 至少一个疗程四次 4 杀伤细小残留的肿瘤细胞防止肿瘤复发和转移 5 各种体细胞比较 三 肿瘤疫苗治疗肿瘤 肿瘤疫苗治疗肿瘤是利用肿瘤细胞抗原或相应的核酸进行治疗肿瘤的方法 主要包括以下几种 1 基因修饰的肿瘤疫苗 2 热休克蛋白疫苗 3 肿瘤抗原肽疫苗 4 核酸疫苗 5 树突状细胞 DC 疫苗和DC 肿瘤融合细胞疫苗 6 CA125的抗独特型抗体ACA125疫苗 7 预防宫颈癌发生的HPV疫苗 1 DC细胞治疗肿瘤 因具有长长的树突状突起和星状多形性而得名 源自骨髓中的前体细胞 是已知机体内抗原呈递能力最强的细胞 比普通抗原呈递细胞强1000倍 DC细胞 分化成熟的DC模式图 它能在机体内外捕获抗原后 将信息传递给T B淋巴细胞 从而引发一系列的特异性免疫应答反应 人成熟DC表型的流式细胞检测 可见CD80 CD83 CD86高表达 1 1 DC肿瘤疫苗制备流程 1 2 特点及适应症 特点 DC细胞是体内提呈抗原最强的细胞 它在负载肿瘤抗原后 能刺激T淋巴细胞分化为具有抗肿瘤活性的细胞毒性T淋巴细胞 对肿瘤细胞实施特异性杀伤 适应症 该治疗方法在治疗恶性实体瘤和白血病方面具有广泛的临床应用前景 1 3 树突状细胞疫苗在实体瘤治疗中的策略 1 1 抽取病人50 60ml外周血 2 分离单核细胞体外诱导DC细胞 3 DC细胞负载自体肿瘤抗原通过静脉回输给病人或皮下注射 4 经肿瘤抗原负载DC细胞能刺激自体T细胞产生强烈的抗肿瘤免疫应答 1 3 树突状细胞疫苗在实体瘤治疗中的策略 2 1 抽取病人50 60ml外周血 2 分离单核细胞体外诱导DC细胞 3 DC细胞负载自体肿瘤抗原并与自体的淋巴细胞混合刺激自体T细胞产生细胞毒性T淋巴细胞 4 将这些细胞毒性T淋巴细胞通过静脉回输给病人直接杀伤肿瘤细胞 肿瘤细胞模式图 由于肿瘤细胞表面抗原的多样性 肿瘤抗原免疫原性弱 难以激活有效的机体免疫 2 自体DC 肿瘤融合细胞疫苗 2 1 DC 肿瘤融合细胞诱导机体产生抗肿瘤免疫的机理 提呈所有肿瘤细胞表面抗原 包括已知和未知抗原 诱导高亲合力的多克隆CTL 2 2 自体DC 肿瘤融合疫苗制备过程 原代肿瘤细胞 成熟DC细胞 自体DC 肿瘤融合细胞疫苗 PBMNC 50 60ml 融合 细胞因子 肿瘤细胞纯化技术 术后肿瘤组织 2 3 自体DC 肿瘤融合疫苗治疗策略 1 抽病人50ml 60ml外周血 分离单核细胞 体外诱导DC细胞 DC 融合细胞疫苗经皮下注射 DC 融合细胞疫苗能刺激自体T细胞 诱导产生的抗肿瘤免疫应答 制备DC 肿瘤融合细胞疫苗 自体DC 肿瘤融合疫苗治疗策略 2 抽病人50ml 60ml外周血 分离单核细胞 体外诱导DC细胞 DC 肿瘤融合细胞与淋巴细胞混合 刺激产生细胞毒性T淋巴细胞 将这些细胞毒性T淋巴细胞通过静脉回输给病人 直接杀伤肿瘤细胞 制备DC 肿瘤融合细胞疫苗 未纯化的肾癌细胞 纯化后的肾癌细胞 从术后肾癌组织中分离纯化肾癌细胞 从手术后肝癌组织中分离纯化肝癌细胞 未纯化的肝癌细胞 纯化后的肝癌细胞 4 肿瘤疫苗的区别 五 各种治疗方法的区别 六 治疗方案的制定 根据病人的肿瘤特征 遗传背景 病情状况 年龄等制定出个适合病人的个体化特征的生物治疗方案 制定时应遵循以下原则 1 通常在进行体细胞免疫治疗前 要降低肿瘤负荷 A 临床恶性肿瘤综合治疗的一部分 常规治疗后的巩固治疗 B 一些免疫原性较强的恶性肿瘤或对化疗和放疗不敏感肿瘤在手术或介入微创治疗后可直接接受细胞免疫治疗C 体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子 抗肿瘤抗体 生物靶向药物进行治疗2 体细胞免疫治疗与其它治疗应交替进行 1 治疗方案举例 保健治疗或单独进行体细胞免疫治疗时 体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子 抗肿瘤抗体 生物分子靶向药物增强疗效的方案 七 治疗后效果评估 按照生物制品的疗效评估方法 主要以肿瘤病灶的大小变化和患者的生存期评估疗效 及患者的生活质量等 1 免疫学指标的评价 治疗前后T淋巴亚群的变化 2 无进展生存期 PFS 和生存期 3 影像学检查 按RECIST标准评价 分为完全缓解 CR 部分缓解 PR 稳定 SD 和进展 PD 4 肿瘤患者的肿瘤标记物的变化情况 八 有效性证明 微创介入联合CIK治疗原发性肝癌 MinimallyInvasiveTreatmentCombinedwithCytokine InducedKillerCellsTherapyLowertheShort TermRecurrenceRatesofHepatocellularCarcinomas JImmunother 2008 31 1 63 71 Figure585名原发肝癌患者生存曲线CIK治疗组6 12 18个月时无复发生存率分别为93 3 91 1 74 4 对照组则分别为90 0 70 0 60 0 三 发展前景 一 临床应用趋势 传统治疗方法只负责杀肿瘤细胞 不负责防止癌细胞扩散 以及巨大的副作用 使各种生物治疗作为传统疗法的辅助治疗手段越来越普遍 作为生物治疗的热点 过继性细胞免疫治疗的疗效也得到肯定 能明显抑制肿瘤细胞向远处转移 并有效提高肿瘤患者远期生存率 过继性细胞免疫治疗的疗效也已得到各国的认可 1 美国FDA 日本卫生厅已经认可体细胞治疗 并开展临床治疗 2 中国卫生部已经将体细胞治疗划为第三类医疗技术 近期将出台技术标准 3 国内顶尖医院已经大规模开展体细胞治疗临床试验达10年之久 国内很多的医院已经开展体细胞治疗项目 1 比较出名的有天津肿瘤医院 北京北大医院 北京道培医院 中山大学附属肿瘤医院等2 国内比较出名的专家有夏建川 任秀宝 王福生等近期内 国内越来越多的医院将开展体细胞治疗项目 已成为趋势 二 治疗技术