课题3　血红蛋白的提取和分离 (2).doc

血红蛋白的提取与分离测试题第卷选择题 一、单选题1. 凝胶色谱法是根据蛋白质（ ）分离蛋白质的有效方法。 A对其他分子的亲和力 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度的大小2. 缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持（ ）基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度3. 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（ ）的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向4. 血液由血浆和各种血细胞组成，其中（ ）的含量最多。 A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞5. 血红蛋白因含有（ ）而呈红色 A. O2 B. CO C. CO2 D.血红素. 6. 血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显 看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是（ ） A无色透明的甲苯层 B脂溶性物质的沉淀层 C血红蛋白的水溶液 D其他杂质的暗红色沉淀物 第二卷非选择题7. 红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题： （1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步：_、_、_和_。（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。 加入柠檬酸钠的目的是_。 以上所述的过程即是样品处理，它包括_、_、收集血红蛋白溶液。（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。 透析的目的是_。 透析的原理是_。（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 样品纯化的目的是_。 血红蛋白有什么特点？_。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？_。8.在蛋白质的提取和分离实验中，若用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液来分离血红蛋白，需对 样品如何处理？9. 你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？10.有4瓶失去标签的无色透明液体。已知各装有：大肠杆菌超标的自来水，丙种球蛋白溶液（一 种抗体），溶解着DNA分子的2mol/L的NaCl溶液，葡萄糖溶液。 请根据提供的第一步鉴定方法，简要写出用相应物质进行鉴定的其余步骤和结果。 第一步：各取4种液体少许分别倒入4个试管中，缓慢加入蒸馏水并用玻璃棒搅拌，则 。 第二步： 除上述鉴定DNA的方法外，还可以用哪些方法进行鉴定？ 凝胶色谱法血红蛋白的提 基础知识 缓冲溶液取和分离 电泳 样品处理实验操作 凝胶色谱操作 SDS聚丙烯酰凝胶电 红细胞的洗涤实验操作 色谱主填料的处理 凝胶色谱柱的装填 蛋白质的分离结果分析与评价课题延伸专题5 DNA和蛋白质技术答案1B 2B 3B 4C 5D 6C 7.（1）样品处理；粗分离；纯化；纯度鉴定 （2）防止血液凝固红细胞的洗涤，血红蛋白的释放 （3）去除分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内 （4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去 血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收 集洗脱液；这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。8红细胞的洗涤；血红蛋白的释放；分离血红蛋白溶液；透析（注意每步的细节问题）9血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步。包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首 先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；在经 过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂 质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。10第一步：出现丝状物的溶液，为溶解着DNA分子的2mol/L的NaCl溶液。第二步：向其 余3支试管中加入伊红美兰试剂，呈现深紫色的为大肠杆菌超标的自来水。第三步：将其 余2种溶液各取少许倒入2支试管中，加入双缩脲试剂，呈现紫色反应的为丙种球蛋白溶液。 最后一瓶为葡萄糖溶液用二苯胺沸水浴变为蓝色；或加入冷却的酒精，搅拌出现丝状物12. 分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为4层：第一层