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l单元生物工程及技术1目录l单元生物工程及技术1l1 传统发酵技术与发酵工程的应用1l2 微生物的类型、营养和代谢3l3 微生物的培养与应用3l4 酶的应用4l5 dna的粗提取及蛋白质提取技术10l6 植物有效成分的提取 l1 传统发酵技术与发酵工程的应用【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三8月开学考试】19、家庭制作果酒、果醋和腐乳三种传统发酵食品的共同点是 a.菌种均可来自于自然环境 b.将原料灭菌后再发酵c.保证在无氧环境下发酵 d.适宜的温度都是相同的【答案】【知识点】l1传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】a解析:制作果酒、果醋和腐乳时菌种均可来自于自然环境,a正确;原料均不需灭菌,b错;果醋的制作需要有氧的环境,c错;制作果酒适宜的温度是1825,制作果醋适宜的温度是3035,制作腐乳适宜的温度是1518,d错。【生物卷(解析)2015届湖南省师大附中高三第一次月考(201409)】30.(15分,每空1分)完成下列传统发酵技术中的相关问题:.(5分)下图是果酒和果醋制作的实验流程和发酵装置图,请据图示分析回答下列问题。(1)请将图1中的实验流程补充完整。(2)图2中的充气口在 时关闭,在 时连接充气泵,并不断向内泵入无菌空(氧)气。(3)排气口在果酒发酵时排出的气体是由 产生的二氧化碳(co2)。(4)葡萄酒呈现红色的原因是红色葡萄皮中的色素溶解在发酵液中,重铬酸钾在酸性条件下与酒精的颜色反应为 色。.(5分)下图为腐乳制作的流程示意图,请据图分析回答下列问题。(1)现代科学研究表明,许多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是 毛霉。(2)传统的制作过程中,豆腐块上生长的“霉”来自 。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下,将优良的菌种接种在豆腐上,这样可以 ,保证产品的质量。(3)卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的,卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在12%左右。加酒的作用:一是可以 ;二是能使腐乳具有 。.(5分)下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图分析回答下列问题。(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料,原因是 。(2)制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为 ,盐水煮沸的目的是 ,冷却后再使用的目的是 。(3)泡菜的制作方法不当,很容易造成泡菜变质,甚至发霉变味,发霉主要与 有关。【答案】【知识点】l1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】. (1)醋酸发酵 (2)果酒发酵果醋发酵(3)酵母菌(4)灰绿.(1) 毛霉(2)空气中的毛霉孢子 避免其他菌种的污染(3)抑制微生物生长 独特的香味. (1)亚硝酸盐的含量低 (2)41 杀灭杂菌保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响 (3)霉菌解析:.(1)图1方框中的内容是果醋发酵。(2)果酒发酵是在无氧环境中进行的,而果醋制作是在有氧环境中进行的,因此图2装置中的充气口在果酒发酵时关闭,在果醋发酵时连接充气泵,并连续不断地向内泵入空气。(3)酵母菌无氧呼吸时,除了产生酒精,还会释放二氧化碳,因此排气口在果酒发酵时排出的气体是由酵母菌产生的co2,在果醋发酵时排出的是含氧量少的空气、co2。(4)果酒发酵过程中,红色葡萄皮中的色素溶解在发酵液中,因此葡萄酒呈现红色;重铬酸钾在酸性条件下与酒精的反应出现灰绿色。.(1)参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种,其中起主要作用的是毛霉。(2)传统的制作过程中,腐乳制作中的菌种来自空气中的毛霉孢子。而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下,将优良的菌种接种在豆腐上,这样可以避免其他菌种的污染,保证产品的质量。(3) 腐乳制作中卤汤中的酒的作用:一是可以抑制微生物生长;二是能使腐乳具有独特的香味。.(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料,原因是亚硝酸盐的含量低.(2)制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为4:1,盐水加热煮沸是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响(3)泡菜的发霉变味主要与霉菌有关。【思路点拨】.图1是果酒和果醋制作的实验流程,酒精发酵后还可以进行果醋发酵;图2是果酒和果醋的发酵装置图,其中排料口的作用是出料、检测;充气口的作用是在果醋制作时通入氧气的;排气孔是排气,其弯弯曲曲的好处是防止杂菌和浮尘的污染。.腐乳制作中起主要作用的是毛霉;传统的制作过程中,腐乳制作中的菌种来自空气中的毛霉孢子;为了避免其他菌种的污染,现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下,将优良的菌种接种在豆腐上;腐乳制作中卤汤中添加的酒可以抑制微生物生长,也能使腐乳具有独特的香味。. 新鲜的蔬菜和原料里面亚硝酸盐含量低;腌制过程中因为盐水比细胞內液浓度高,细胞会失水,产生的水使坛子中溶液量增加;为了抑制其它杂菌的繁殖,可以利用多种措施如:加盐、加白酒、加水密封等;制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为4:1,盐水要加热煮沸是为了杀灭杂菌,冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响;泡菜的发霉变味主要与霉菌有关。【理综卷(生物解析)2015届河北省唐山市高三9月模拟考试(201409)word版】39【生物选修1:生物技术实验】(15分)根据相关知识,回答关于果酒、果醋和腐乳制作的相关问题。(1)当 、 时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。(2)在 条件下,重铬酸钾与酒精发生反应呈现_ 色。(3)下图为腐乳制作的实验流程示意图,据图回答下列问题图中a代表 ,其主要目的是_ ,同时还能_ _;在配制卤汤中酒的含量一般控制在_ 左右,加酒含量过高腐乳成熟时间将会 ;酒精含量过低, ,可能导致豆腐腐败。【答案】【知识点】l1 传统发酵技术与发酵工程的应用【答案解析】(15分;前5空每空1分,后5空每空2分)(1)氧气;糖源都充足(2)酸性;灰绿色(3)加盐腌制;析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬;抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质12%;延长;不足以抑制微生物的生长解析:在氧气、糖源都充足的条件下,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性条件下,重铬酸钾与酒精发生反应呈现灰绿色;在腐乳制作过程中,豆腐上长出毛霉后需加盐腌制,盐的作用是析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,还能抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质。卤汤中加酒需适量,加酒过高使腐乳成熟时间延长,酒含量低,不足以抑制微生物的生长。【思路点拨】根据果酒发酵及腐乳制作的原理过程分析。l2 微生物的类型、营养和代谢l3 微生物的培养与应用【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三8月开学考试】33、(8分)下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方,回答下列问题:(1)从作用上看,甲培养基属于_,其中能提供氮源的物质是_。(2)为了判断甲培养基是否具有筛选作用,应在牛肉膏蛋白胨培养基上接种等量的相应浓度的土壤稀释液,相同且适宜条件下培养。如果_,则证明该培养基具有筛选作用。(3)如果将b配制成固体培养基,则在培养基上长出的菌落_ _(是/否)都能分解纤维素,理由是_ _。该培养基的主要作用是_。(4)为了计数微生物的数量,接种时应采用_法,一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1ml,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为_。【答案】【知识点】l3微生物的培养与应用【答案解析】(1)选择培养基 尿素 (2)上述培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落 (3)否 因培养基中还有水解酪素等能提供碳源,纤维素被分解后产生的糖类等也可为其它微生物生长提供碳源(合理即得分) 能增加纤维素分解菌的浓度,确保从样品中分离到所需的微生物(或选择培养等) (4)稀释涂布平板 1.6109解析:(1)甲培养基中以尿素为唯一的氮源,可以筛选出尿素分解菌,该培养基属于选择培养基。(2)为了判断甲培养基是否具有筛选作用,应设计对照试验,在牛肉膏蛋白胨培养基上接种等量的相应浓度的土壤稀释液,在相同且适宜条件下培养。如果上述培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落,则证明该培养基具有筛选作用。(3)由于b培养基不是以纤维素作为唯一的碳源,还有水解酪素等能提供碳源,所以在培养基上长出的菌落不都能分解纤维素。乙培养基能增加纤维素分解菌的浓度,确保从样品中分离到所需的微生物(或选择培养等)。(4)对微生物计数应采用稀释涂布平板法接种。每毫升原土壤样液中上述微生物数量应求培养后菌落数的平均值,即为(180+155+176+129)106/(60.1)= 1.6109。【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三8月开学考试】22、下列有关制备固定化酵母细胞叙述正确的是 a在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞b溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温,才能加入细胞c溶解海藻酸钠,最好采用小火,或者持续加热的方法d在固定化酵母细胞的过程中,要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的cacl2溶液中 【答案】【知识点】l3酶的应用【答案解析】abd解析:海藻酸钠加热时很容易发生焦糊,所以溶解海藻酸钠,最好采用小火,或者间断加热的方法,c错。【生物卷(解析)2015届江苏省扬州中学高三8月开学考试】20、科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株q,步骤如下图所示,下列相关的叙述中,错误的是 a. 步骤中,培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源b. 步骤中,将锥形瓶放在摇床上充分振荡,使菌株与培养液充分接触c. 步骤是利用平板划线法纯化菌株q,图中所示接种环最少灼烧2次d. 步骤中每一区域可重复画几次,但1区和5区不能出现交叉【答案】【知识点】l3微生物的培养与应用【答案解析】c解析: 要想分离能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株,配制培养液时,必须用多环芳烃菲作为唯一碳源,故a正确;培养过程中,将锥形瓶充分震荡,目的是使菌株与培养液充分接触,b正确;接种环在每次接种前和接种后都要通过灼烧灭菌,图中所示接种环要灼烧6次,c错误;纯化菌株q的过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上次划线的末端开始划线,1区和5区不能出现交叉,d正确。【生物卷(解析)2015届云南省玉溪一中高三上学期第一次月考(201409)】选一(15分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如图所示(1)挑选可疑菌落制片后,用_(1分)观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。(2)对配制的液体培养基等需采取_(2分)灭菌;实验所用液体培养基的碳源为_(2分)(填“无机碳”或“有机碳”)。(3)接种可疑菌后,35 培养24 h,液体培养基变浑浊,原因是_(2分),对照组试管中应加入_(2分),与实验组同时培养6 h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(2分)(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除t细胞、b细胞外,还有_(2分)和_(2分)。【答案】【知识点】l3 微生物的培养与应用【答案解析】(1)显微镜(1分)(2)高压蒸汽有机碳(3)细菌大量繁殖等量生理盐水低(4)吞噬细胞、浆细胞解析:(1) 炭疽杆菌是原核生物,为单细胞生物,观察它的结构应借助于显微镜。(2)微生物培养基需采用高压蒸汽灭菌。实验所用培养基的碳源应为有机碳,因为炭疽杆菌为异养型生物。(3)35培养24小时,细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊,对照组不能含有细菌,根据等量原则故应该是等量的生理盐水,加入噬菌体后,由于噬菌体能够使炭疽杆菌死亡,故实验组液体培养基的浑浊度比对照组低(4)抗体是由体液免疫过程产生,参与体液免疫的细胞有t细胞、b细胞、吞噬细胞、浆细胞等。【生物卷(解析)2015届江西省师大附中等五校高三第一次联考(201408)】31、生物选修1:生物技术实验(10分) 无菌操作是微生物接种技术的关键;传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题:(1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 。皮肤 饮用水 牛奶 注射器 培养皿 接种环 培养基果汁 酱油 手术刀ab c d以上全部(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 ,接种前要进行 ,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是_ 。右图是利用 法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意: 每次划线前要 ; 冷却后从上一区划线末端开始划; 首尾区 。(4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是 ,观察培养基上是否有菌落产生。(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌,也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入 。(6)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是 。【答案】【知识点】l3 微生物的培养与应用【答案解析】(1)a (2)调整ph 高压蒸汽灭菌 (3)防止外来杂菌的入侵 平板划线 灼烧接种环 不连接(不重叠) (4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间 (5)植物激素(或生长素和细胞分裂素)(6)青霉素杀死了乳酸菌解析:(1)皮肤、饮用水、牛奶、果汁、酱油应消毒处理,注射器、培养皿、接种环、培养基、手术刀应灭菌处理。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整ph,接种前要进行高压蒸汽灭菌,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线进行时应每次划线前要灼烧接种环,冷却后从上一区划线末端开始划,首尾区不连接。(4)接种前检测培养基是否被污染的方法为将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间,观察培养基上是否有菌落产生。(5)与大肠杆菌培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素(或生长素和细胞分裂素)。(6)制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸发酵,但乳酸菌对青霉素敏感,会导致死亡。【理综卷(解析)2015届广西桂林中学高三8月月考(201408)】39.生物选修1:生物技术实践(8分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_。通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。(3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_和_。【答案】【知识点】l3 微生物的培养与应用【答案解析】(1)原油 选择(2)强 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰 (3) 平板划线法 稀释涂布平板法(1)欲筛选出能降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其它碳源,不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基。(2)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大;实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽灭菌(如培养基)等无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。(3)分离纯化菌种时,需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,以便纯化菌种。【思路点拨】本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术,分离微生物的常用的接种方法和接种工具,主要考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。【典型总结】(1)培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐培养基的分类:按物理性质分,分为液体培养基和固体培养基,固体培养基中含有凝固剂,一般是琼脂按化学成分分,分为天然培养基和合成培养两者的区别是天然培养基成分不确定,合成培养基成分的含量是确定的按用途分,分为选择培养基和鉴别培养基选择培养基主要是培养、分离特定的微生物,培养酵母菌可在培养基中加入青霉素;鉴别培养基可以鉴定不同的微生物,比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌,可以用伊红-美蓝培养基,如果菌落呈深紫色,并带有金属光泽,说明有大肠杆菌。(2)常用灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次:高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法。(3)接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体-菌落。【理综卷(生物解析)2015届宁夏银川一中高三上学期第一次月考(201408)】39【生物选修1:生物技术实践专题】(15分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如下图所示对配制的液体培养基需采取 方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为 (填“无机碳”或“有机碳”)。在提供主要营养物质的基础上,培养基还需要满足炭疽杆菌生长对 、 以及特殊营养物质的要求。 挑选可疑菌落制片后,用 观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后,35培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是 ,对照组试管中应加入 ,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的 比对照组低,则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除t细胞、b细胞外,还有 、 。【答案】【知识点】l3 微生物的培养与应用【答案解析】(除标明外,其余每空2分,共15分)高压蒸汽(1分) 有机碳 ph、氧气 显微镜 细菌大量繁殖 等量生理盐水 浑浊度 吞噬细胞、浆细胞解析:液体培养基采用高压蒸汽法灭菌,由于炭疽杆菌是异养型生物,因而液体培养基中的碳源为有机碳;培养基除了必需的营养外,还需适宜的ph及氧气。炭疽

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