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尿碘快速定量试剂盒检测与国标法的对比雷航琪 杨志琼 朱万明 万衍 罗燕 冯鑫 （乐山市疾控预防控制中心 乐山614000）碘是人体必须的微量元素，当摄入不足时人体会出现一系列的问题，导致所谓的“碘缺乏病”，特别是孕妇和儿童缺碘后会引起严重的后果。尿碘是反应人体碘营养水平的重要指标，要想知道人体的碘营养状况，检测尿碘是较为直接的方法。尿碘检测目前实验室所采用的方法是砷铈催化分光光度法（WS/T107-2006）。该法是目前测定尿碘的国标方法，该方法的灵敏度高、准确度高，但由于尿碘含量很低且测定受多种因素干扰影响，外界环境的温度、湿度以及检测人员的操作都直接影响检测结果的准确性。国标方法规定的操作较为复杂，时间控制严格，需多人配合完成。现市场上有原理大致相同、操作更为简洁的试剂盒出现。现采用试剂盒法和国标法对相同样品、相同质控样同时进行测定，统计测定结果。对两种方法的灵敏度、准确度、精密度方面进行比较。1实验部分1.1 样品 井研县、金口河县、犍为县各140份尿样，包含儿童和孕妇。共420份。1.2 试剂 国标法：按照国标方法的要求进行配制。 试剂盒：尿碘快速定量试剂盒AR型（武汉众生）。1.3 标准物质： 冻干人尿中碘成分标准物质GBW(E)09108i、GBW(E)09109g、GBW(E)09110n 以及试剂盒中自带的质控样品。 1.4测定方法 国标法：取各尿样及标准使用液系列0.25mL置于试管中，加入1.0mL过硫酸铵溶液（1.0mol/L），置于100烘箱中消化60min，冷却后加入2.5mL亚砷酸（0.10mol/L），混匀后放置15min，间隔30s加入0.3mL硫酸铈铵（0.076mol/L）反应，上分光光度计间隔30s比色。 试剂盒：取各尿样及标准使用液系列0.20mL置于试管中，加入0.5mL消解夜，置于100烘箱中消化60min；冷却后加入0.5mL还原剂，混匀。再加入0.5mL指示剂摇匀。加入0.5mL氧化剂的同时秒表计时，观察反应突变点。 2结果 2.1标准曲线r值 分别使用试剂盒和国标法在不同温度下（温度都在15-30之间，并且同一标准曲线的温度波动不超过0.5）分别配制并测定了6条标准曲线。 表1 国标法 线性相关系数r值 测定次数 线性方程相关系数r1C=-158.38A+36.48r=-0.99952C=-131.33A+70.98r=-0.99983C=-145.98A+60.37r=-0.99954C=-138.76A+66.30r=-0.99975C=-151.82A+70.92r=-0.99946C=-148.67A+87.95r=-0.9999表2 试剂盒 线性相关系数r值测定次数 相关系数r 测定次数相关系数r1 -0.9989 4-0.99952 -0.9985 5-0.99903 -0.9993 6-0.9993国标法的r值变异范围为-0.9994 -0.9999，平均相关系数为-0.9996.试剂盒的r值变异范围为-0.9985 -0.9995，平均相关系数为-0.9991。试剂盒法的相关系数基本能达到0.9990，曲线较为稳定，能满足检测、分析的要求2.2精密度和准确度试验 每批平行测定3次，6条标准曲线则测6批冻干人尿中碘成分标准物质GBW(E)09108i、GBW(E)09109g、GBW(E)09110n。对应的浓度分别为70.8g/L9g/L、143g/L10g/L、224g/L10g/L。 2.2.1国标法 精密度和准确度试验 见表35。表3低浓度 表4中浓度 表5高浓度次123次123114414514312242242232142142141222722322831451481463224225227414614714442232202195143148145522222121861421411436225224224次数123 166.769.068.5270.571.272.3374.173.272.8470.370.970.6567.468.968.6668.569.369.72.2.2试剂盒 精密度和准确度试验见表68。表6低浓度 表7中浓度 表8高浓度次123次123113814014312132202172142145146221622321931521501443224230228415314514842222202235136139142521821622161341411446224226227次数123164.567.066.8269.370.470.6368.169.273.4470.771.472.9573.475.675.3667.569.973.6国标法:低浓度=70.1，相对偏差为0.99%，S=2.03，变异系数为2.90%。 中浓度=144.0 相对偏差为0.70%，S=2.24，变异系数为1.55%。 高浓度=223.6 相对偏差为0.45%，S=2.72，变异系数为1.22%。试剂盒:低浓度=70.5，相对偏差为0.43%，S=3.10，变异系数为4.40%。 中浓度=143.4 相对偏差为0.28%，S=5.90，变异系数为4.12%。 高浓度=220.0 相对偏差为1.76%，S=4.84，变异系数为2.20%。试剂盒法测定的各浓度质控样浓度除高浓度一个点超出质控范围，其余17个点均在质控范围内，且相对偏差2.0%,变异系数5.0%，能满足日常检测要求。2.3检出限 2.3.1国标法: C=-148.67A+57.95,10次测定的空白值分别为1.476、1.454、1.484、1.452、1.464、1.470、1.445、1.496、1.475、1.457.S=0.012，检出限对应的吸光度值为1.481-3S=1.445，代入公式计算出检出限为0.8ng，最低检出浓度为3.2g/L。 2.3.2试剂盒:对空白样品进行10次测定，计算得X=2098.46，S=309.61.代入公式计算出检出限为1.2 ng，最低检出浓度为6.0g/L。3尿碘检测结果比对 每次抽取一个县140份样品在同一实验室同时分别采用国标法和试剂盒法测定。部分结果如下表9：表9 2种方法样品比对结果样号国标法试剂盒法相对标准偏差（%）167635.9721211264.13372742.7841601653.1251361276.6161321255.3071451514.1381441472.0891171180.85101841792.72116957021.01124934694.8713797011.39141541699.7415991034.04162582600.7817515813.72181571655.091987925.74202382577.98由上表9可见，用试剂盒法和国标法测定的样品结果基本一致，相对标准偏差基本小于10%。在低浓度范围时误差相对较大。对420份样品的结果进行配对资料的t检验，d=5.09， t（140,0.05）=1.9826, t=1.86590.05 ,表明两种方法之间的差异无显著性意义。 4.讨论根据实验操作过程和实验结果，说明尿碘的快速定量试剂盒检测是一个简单、方便、准确、稳定、重现性好的方法。该法虽然在精密度、准确度和灵敏度方面不优于国标法，但是操作更为简便、快捷。该法与国标法的比较无显著性差异，具有同一性。该法测定的线性范围为50g/L 400g/L，高于国标的300g/L，当样品浓度过低时（50g/L）反应时间过长降低了实验效率；当样品浓度高于400g/L，不适合使用标准曲线直接外推，可稀释后再测定 。在针对大量样品和初筛检测时，该法比国标法更适合。使用试剂盒测定不需要仪器，只