药物的杂质检查课件_2

药物检测与分析技术 中篇药物检测与分析专项技术 一 药物的纯度 定义 药物的纯净程度 又称药用规格 最高杂质限量 因药品的纯度检查主要针对杂质检查 因此杂质检查又称纯度检查 第一节药物的杂质及其来源 杂质检查 既定工艺进行生产 正常贮存过程 需控制的杂质 改变原料改变工艺新药研究 需检查 可能引入而未规定的杂质 杂质 forin impurities 有毒副作用的物质 无毒副作用影响药物的稳定性和疗效 无毒副作用不影响药物的稳定性和疗效影响药物的科学管理的物质 二 药物中杂质的来源 在药物生产过程中引入杂质的途径为A 原料不纯或部分未反应完全的原料造成B 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C 需加入的各种试剂产生吸附 共沉淀生成混晶等造成D 所用金属器皿及装置等引入杂质E 由于操作不妥 日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质 例 三 杂质的分类 一般杂质 特殊杂质 按来源分 一般杂质 自然界是中分布较广 容易引入的物质 其方法收载在中国药典的附录中 特殊杂质 指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质 杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中 水杨酸 CH3COOH 水解一步 硫酸 臭味 例 阿司匹林水杨酸 信号杂质 有害杂质 按危害性分 Cl SO2 Fe3 H OH H2O 剧毒 重金属 砷盐 中国药典 2005年版 中规定的一般杂质检查中不包括的项目是A 硫酸盐检查B 氯化物检查C 溶出度检查D 重金属检查E 砷盐检查 例 一 杂质限量 指药物中允许杂质存在的最大量 通常用百分之几或百万分之几 ppm 来表示 第二节药物的杂质检查法 杂质量 杂质量 药品合格 药品不合格 杂质限量 二 药物的杂质检查法 1 对照法需对照物质限量检查法 LimitTest 特点 不需知道杂质的准确含量 选择待检杂质作对照 2 灵敏度法 系指在供试品溶液中加入试剂 在一定反应条件下 不得有正反应出现 不需对照物质 50mlH2O 5滴HNO3不浑浊 纯水中Cl 合格 3 比较法 含量测定法 测定杂质的绝对含量 如测定吸收度 pH值等 特点 准确测定杂质的量 不需对照物质 三 杂质限量的计算 检查某药物中的砷盐 取标准砷溶液2ml 每1ml相当于1 g的As 制备标准砷斑 砷盐限量为0 0001 应取供试品的量为A 0 20gB 2 0gC 0 020gD 1 0gE 0 10g 已知 c 1 g ml 1 10 6g mlV 2mlL 0 0001 一 一般杂质检查规则 药品检验操作标准 规定 1 遵循平行操作原则 1 仪器的配对性 如纳氏比色管应配对 刻度线高低相差不超过2mm 砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 2 对照品与供试品的同步操作 第三节一般杂质检查 2 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过 2 1g不超过 1 3 正确的比色 比浊方法4 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份 二 氯化物检查法 一 原理对照法 二 检查方法药典附录1 除另有规定外 取各药品项下规定量的供试品 加水溶解使成25ml 溶液如显碱性 可滴加硝酸使成中性 再加稀硝酸10m1 溶液如不澄清 应滤过 置50ml纳氏比色管中 加水使成约40m1 摇匀 即得供试溶液 2 另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液 置50ml纳氏比色管中 加稀硝酸10m1 加水使成40m1 摇匀 即得对照液 3 于供试溶液与对照溶液中 分别加入硝酸银试液1 0m1 用水稀释使成50m1 摇匀 在暗处放置5分钟 同置黑色背景上 从比色管上方向下观察 比较 即得 三 测定条件 1 标准NaCl溶液10 gCl ml 50ml溶液中含50 80 g的Cl 所显浑浊梯度明显 相当于标准NaCl溶液5 8ml 2 反应需在硝酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜 1 加速AgCl浑浊的形成 2 产生较好的乳浊 3 避免弱酸银盐如碳酸银 磷酸银以及氧化银沉淀的形成 3 试剂 硝酸银4 供试液和对照液稀释后 再加硝酸银溶液 使生成白色浑浊而不是白色沉淀5 避光 暗处放置5分钟后比浊 因氯化银见光易分解 6 比浊方法 同置于黑色背景上 自上向下观察 7 平行操作原则 四 干扰及排除 1 若供试品有色 需经处理后方可检查 1 内消色法 倍量法 如枸橼酸铁铵中氯化物的检查 在对照液中加一定量供试液 2 外消色法 如高锰酸钾中氯化物的检查 可先加乙醇适量 使其还原褪色后再依法检查 2 当有其它干扰物质存在时 必需在检查前除去 1 碘中氯化物的检查 2 碘化物中氯化物的检查 3 溴化物中氯化物的检查3 有机药物中有机氯杂质的检查具体情况 具体分析 4 不溶于水的有机药物 1 加水振摇 过滤 取滤液进行检查 2 加热 放冷 过滤 取滤液进行检查 3 溶于有机溶剂如稀乙醇 丙酮 可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查 95 82 药物中氯化物杂质检查 是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊 所用的稀酸是 B A 硫酸B 硝酸C 盐酸D 醋酸E 磷酸 例1 中国药典 2005年版 规定 检查氯化物杂质时 一般取用标准氯化钠溶液 10 gCl ml 5 8ml的原因是 D A 使检查反应完全B 药物中含氯化物的量均在此范围C 加速反应D 所产生的浊度梯度明显E 避免干扰 例2 采用硝酸银试液检查氯化物时 加入硝酸使溶液酸化的目的是 ABCDE A 加速生成氯化银浑浊反应B 消除某些弱酸盐的干扰C 消除碳酸盐干扰D 消除磷酸盐干扰E 避免氧化银沉淀生成 例3 当采用比浊法检查氯化物杂质时 若药物本身有颜色而干扰检查的话 应该选用的处理方法为 AB A 内消色法B 外消色法C 比色法D 差示比浊法E 差示可见分光法 例4 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查 最佳方法是 D A 加入一定量氯仿提取后测定B 氧瓶燃烧C 倍量法D 加入一定量乙醇E 以上都不对 例5 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件 ABC A 所用比色管需配套B 稀硝酸酸性下 10ml 50ml C 避光放置5分钟D 用硝酸银标准溶液做对照E 在白色背景下观察 三 硫酸盐检查法 一 原理对照法 二 测定条件 1 标准K2SO4溶液0 1mg ml 50ml溶液中含0 1 0 5mg的所显浑浊梯度明显 相当于标准K2SO4溶液1 5ml 2 反应需在盐酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜 3 试剂 氯化钡4 供试液和对照液稀释后 再加氯化钡溶液 使生成白色浑浊而不是白色沉淀5 比浊方法 同置于黑色背景上自上向下观察 若供试品有色 也可用内消色法即倍量法处理 三 干扰及排除 例 药物中硫酸盐检查时 所用的标准对照液是 D A 标准氯化钡B 标准醋酸铅溶液C 标准硝酸银溶液D 标准硫酸钾溶液E 以上都不对 四 铁盐检查法 1 原理对照法 一 硫氰酸盐法ChP 2005 USP 24 2 检查方法药典附录除另有规定外 取各药品项下规定量的供试品 加水溶解使成25ml 移置50ml纳氏比色管中 加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg 用水稀释使成35m1后 加30 硫氰酸铵溶液3ml 再加水适量稀释成50ml 摇匀 如显色 立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液 取各药品项下规定量的标准铁溶液 置50ml纳氏比色管中 加水使成25ml 加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg 用水稀释使成35m1后 加30 硫氰酸铵溶液3ml 再加水适量稀释成50ml 摇匀 比较 即得 3 测定条件 1 用FeNH4 SO4 2 12H2O 硫酸铁铵 配制标准铁贮备液 加入硫酸防止Fe3 的水解 标准铁溶液临用前稀释而成 标准铁溶液10 gFe3 ml 50ml溶液中含10 50 g的Fe3 显色梯度明显 一般取标准铁溶液1 0 5 0ml 2 反应需在盐酸酸性条件下进行 且以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜 3 试剂 硫氰酸铵 加过量硫氰酸铵 使反应向正反应方向进行 4 检查Fe2 和Fe3 5 铁盐检查时 加氧化剂氧化Fe2 为Fe3 加过硫酸铵可氧化Fe2 为Fe3 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 加硝酸后加热也可氧化Fe2 为Fe3 6 比色方法 同置于白色背景上 自上向下观察 4 干扰及排除 1 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时 可用正丁醇提取后 分取正丁醇层比色 2 具环状结构的有机药物 需经700 800 炽灼破坏处理后再依法检查 3 干扰离子的影响 二 巯基醋酸法对照法 本法灵敏度较高 但试剂较贵 例1 中国药典 2005年版 规定铁盐的检查方法为 A A 硫氰酸盐法B 巯基醋酸法C 普鲁士蓝法D邻二氮菲法E 水杨酸显色法 例2 中国药典 2005年版 规定 硫氰酸铵法检查铁盐时 加入过硫酸按的目的是 AB A 使药物中铁盐都转变为Fe3 B 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色C 使产生的红色产物颜色更深D 防止干扰E 便于观察 比较 例3 中国药典收载的铁盐检查 主要是检查 D A FeB Fe2 C Fe3 D Fe2 和Fe3 E 以上都不对 五 重金属检查法以铅为代表 中国药典 2005年版 共收载四法 第一法硫代乙酰胺法第二法炽灼残渣法第三法硫化钠法第四法微孔滤膜法 一 第一法硫代乙酰胺法 1 原理对照法 适用于溶于水 稀酸和乙醇的药物 2 测定条件 1 用硝酸铅配制标准铅贮备液 加硝酸防止Pb2 水解 标准铅溶液临用前稀释而成 标准硝酸铅标准溶液10 gPb2 ml 适宜比色范围为27ml溶液中含10 20 g的Pb2 2 本法用2mlpH3 5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为3 3 5 3 显色剂 从ChP 1990 开始改用硫代乙酰胺做显色剂 1 供试品如有色 需经处理后方可检查A 外消色法 在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液 B 内消色法C 改用第四法 微孔滤膜过滤法 3 干扰及排除 2 若供试品中有微量Fe3 存在 会氧化硫化氢生成单质硫 干扰比色 加入抗坏血酸或盐酸羟胺 0 5 1 0g 还原Fe3 为Fe2 可消除干扰 3 若供试品为铁盐 Fe3 在盐酸中生成物用乙醚提取除去 剩余微量铁在氨碱性溶液中 加KCN掩蔽 然后用第三法检查 4 若药物本身含有与S2 反应的物质时可加入掩蔽剂消除干扰 如Sb2 中重金属的检查 要在碱性下加KCN掩蔽Sb2 后 依第三法检查 二 第二法炽灼残渣法 适用于含芳环 杂环以及不溶于水 稀酸 乙醇及碱的有机药物 1 原理对照法500 600 炽灼后的残渣 经处理后 依一法检查 2 操作方法 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚 石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿 因可腐蚀瓷坩埚 带入大量重金属 三 第三法硫化钠法 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物 如磺胺类 巴比妥类 1 原理对照法 2 测定条件 1 NaOH碱性条件下 2 显色剂 硫化钠 四 第四法微孔滤膜法 适用于含2 5 g重金属杂质及有色供试液的检查 依一法检查 结果微孔滤膜过滤后比较色斑 P34 35 USP 23 检查重金属时 使用硫化氢试液显色 检查时 除用供试管 对照管 还规定用监控管 三管同法检查 我国 药品检验操作标准 中规定 检查新产品中重金属时 应用该法 97 78 重金属检查中 加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是 B A 1 5B 3 5C 7 5D 9 5E 11 5 95 84 微孔滤膜法是用来检查 C A 氯化物B 砷盐C 重金属D 硫化物E 氰化物 例1 中国药典 2005年版 重金属检查法中 所使用的显色剂是 BC A 硫化氢试液B 硫代乙酰胺试液C 硫化钠试液D 氰化钾试液E 硫氰酸铵试液 例2 葡萄糖中进行重金属检查时 适宜的条件是 C A 用硫代乙酰胺为标准对照液B 用10ml稀硝酸 50ml酸化C 在pH3 5醋酸盐缓冲溶液中D 用硫化钠为试液E 结果需在黑色背景下观察 例3 现有一药物为苯巴比妥 欲进行重金属检查 应采用 中国药典 上收载的重金属检查的哪种方法 C A 一法B 二法C 三法D 四法E 以上都不对 例4 下面哪些方法为 中国药典 收载的重金属检查方法 ACD A 500 600 炽灼残渣后 按一法操作B pH3 3 5条件下 加入硫化氢试液C 碱性下 加入硫化钠试液D 按一法操作 结果用微孔滤膜过滤后观察色斑E 以上都对 六 砷盐检查法 一 古蔡法ChP 2005 1 原理对照法 遇HgBr2试纸生成黄色 棕色的砷斑 与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较 2 操作方法P35 1 标准砷斑用2ml标准砷溶液制备 2 供试品需经有机破坏 则标准砷溶液应平行操作 3 测定条件 1 标准砷溶液临用新配 1 gAs ml 2 酸为反应物 酸量应足够 所以加浓盐酸5ml 3 酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是 还原As5 为As3 加快反应速度 碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I I 与反应中生成的Zn2 能形成稳定的配位离子 有利于生成砷化氢的反应不断进行 c 氯化亚锡与锌作用 在锌表面形成锌锡齐 使氢气均匀而连续地发生 d 可抑制微量Sb的干扰 在实验条件下 100 gSb存在不干扰 4 醋酸铅棉花的作用 是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰 醋酸铅棉花60mg装管高度60 80mm 5 锌粒应无砷 6 砷斑不稳定 应立即观察 4 干扰及排除 1 供试品若为硫化物 亚硫酸盐 硫代硫酸盐时 加HNO3 使氧化成硫酸盐 以除去干扰 如硫代硫酸钠中砷盐的检查 2 供试品若为铁盐 需先加酸性氯化亚锡试液 将Fe3 还原为Fe2 如枸橼酸铁铵中砷盐的检查 3 具环状结构的有机药物 要先行有机破坏后再进行检查 常用的有机破坏方法 碱破坏法 石灰法 无水碳酸钠碱融法酸破坏法 如葡萄糖中砷盐的检查 4 供试品中有强氧化剂加H2SO4先行分解 5 本法适用于不含Sb或含Sb量小于100 g的供试品 二 Ag DDC法检查 含量测定 原理对照法本法适用于含Sb量小于500 g的供试品 操作 砷化氢与Ag DDC溶液作用 还原Ag DDC为红色胶态银 直接比色或于510nm波长处测定吸收度 进行比较 用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行 USP用吡啶 ChP用三乙胺 三 白田道夫法ChP 2000 含Sb药物中砷盐的检查如葡萄糖酸锑钠 原理对照法 四 次磷酸法BP 1998 原理对照法 98 82 在药物的杂质检查中 其限量一般不超过百万分之十的是 D A 氯化物B 硫酸盐C 醋酸盐D 砷盐E 淀粉 97 79 在用古蔡法检查砷盐时 导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是 C A 除去I2B 除去AsH3C 除去H2SD 除去HBrE 除去SbH3 99x 75 砷盐检查法中 在检砷装置导气管中塞入醋酸铅棉花的作用是 C A 吸收砷化氢B 吸收溴化氢C 吸收硫化氢D 吸收氯化氢E 吸收锑化氢 95 140 古蔡氏法中 SnC12的作用有 ACD A 使As5 As3 B 除去H2SC 除去I2D 组成锌锡齐E 除去其它杂质 95 83 Ag DDC法检查砷盐的原理为 砷化氢与Ag DDC吡啶作用 生成的物质是 E A 砷斑B 锑斑C 胶态砷D 三氧化二砷E 胶态银 98 137 中国药典 2005年版 收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是 BE A 与锌 酸作用生成H2S气体B 与锌 酸作用生成AsH3气体C 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑D 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小E 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度 96 106 110 99x 126 130 适用于A 古蔡氏 Gutzeit 法B 二乙基二硫代氨基甲酸银法C A和B均可D A和B均不可96 106 在连接砷化氢发生瓶的导管中装入醋酸铅棉花 C 96 107 使用的标准砷溶液为2m1 C 96 108 测定结果要与标准砷斑相比较 A 96 109 要测定吸收度 B 96 110 要用酸碱滴定法 D 例 1 5 用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时 排除干扰的方法 A 先用硝酸或溴水氧化B 先加酸性氯化亚锑还原C 改用白田道夫法D 先加氰化钾掩蔽E 先加草酸生成沉淀1 硫化物 A 2 亚硫酸盐 A 3 硫代硫酸盐 A 4 高铁盐 B 5 锑盐 C 例6 Ag DDC法检查砷盐时 所产生的红色溶液为 C A HDDC吡啶溶液B Ag吡啶溶液C Ag的胶态溶液D Ag DDC 溶液E AsAg3溶液 例8 葡萄糖中砷盐的检查 需要的试剂应有 BCDE A Pb2 标准液B SnCl2试液C KI试液D ZnE 醋酸铅棉花 例9 Ag DDC法检查砷盐时 加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为 ABCDE A 将As5 还原为As3 B 有利于AsH3生成反应C 抑制SbH3的生成D 形成Zn Sn齐以均匀而连续地发生氢气E 催化加速生成AsH3 例10 古蔡氏法检砷 药典规定制备标准砷斑时 应取标准砷溶液 C A 1mlB 5mlC 2mlD 依限量大小决定E 以上都不对 例11 古蔡氏法检查所用的溶液是 B A 强碱性溶液B 强酸性溶液C 含稀盐酸10ml 50ml溶液D 含稀硝酸10ml 50ml溶液E 含强氧化剂 硝酸或过硫酸铵 溶液 96 96 100 所含待测杂质的适宜检测量为A 0 002mgB 0 01 0 02mgC 0 01 0 05mgD 0 05 0 08mgE 0 1 0 5mg96 96 硫酸盐检查法中 50ml溶液中 E 96 97 铁盐检查法中 50ml溶液中 C 96 98 重金属检查法中 35ml溶液中 B 96 99 古蔡氏法中 反应液中 A 96 100 氯化物检查法中 50ml溶液中 D 97 106 110 A 硝酸银试液B 氯化钡试液C 硫代乙酰胺试液D 硫化钠试液E 硫氰酸盐试液97 106 药物中铁盐检查 E 97 107 磺胺嘧啶中重金属检查 D 97 108 药物中硫酸盐检查 B 97 109 葡萄糖中重金属检查 C 97 110 药物中氯化物检查 A 98 96 100 可用于检查的杂质为A 氯化物B 砷盐C 铁盐D 硫酸盐E 重金属98 96 在酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法 D 98 97 在酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法 C 98 98 在实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法 E 98 99 Ag DDC法 B 98 100 古蔡法 B 例 1 5 杂质检查中所用的酸是A 稀硝酸B 稀盐酸C 硝酸D 盐酸E 醋酸盐缓冲液1 氯化物检查法 A 2 硫酸盐检查法 B 3 铁盐检查法 B 4 重金属检查法 E 5 砷盐检查法 D 七 硒 氟 及硫化物检查法 原理 含 e的供试品经氧瓶燃烧被有机破坏SSeO3 HNO3与盐酸羟胺反应使Se6 Se4 再与二氨基萘生成易溶于环乙烷的4 5 苯并硒二唑在 378nm处测A 注意 1 pH值 2 0 0 2 2 有机破坏要完全 否则吸收液有色使结果偏高 测 发生改变 3 标准液用亚硒酸钠配制 稀释后做对照液 二 F 原理 含 供试品经氧瓶燃烧分解产生 气体再与茜素氟蓝与硝酸亚铈 红色试剂在pH 4 3条件下反应生成蓝紫色配位化合物 操作 1 供试液与对照液制备 配制相当供试品2 0mg的供试液 用20 g ml NaF做对照液 2 检测 以上两液各2ml 处理后在 610nm处测A比较大小 三 原理 2 醋酸铅 棕色硫斑用Na2S做标准液 装置 在古蔡法装置基础上 1 去掉 b c 2棉花 2 将HgBr2换为Pb Ac 2试纸 3 80 90 水浴中加热10min 八 干燥失重测定法 干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量 主要是水分 也包括其它挥发性物质 测定方法 常压恒温干燥法 干燥剂干燥法 减压干燥法 一 常压恒温干燥法 定义 适用于受热较稳定的药物 干燥温度一般为105 干燥失重 失重 供试品重 100 操作 第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行直至Mn Mn 1 0 3mg为恒重 注意 1 供试品厚度 A 一般 5mm B 疏松 10mm C 大粒结晶粒度 2mm 2 干燥温度 A 一般105 B 含结晶水要提高温度 C 含水量大且熔点低要先低温后105 3 特殊供试品 A 膏状物 粗砂粒及玻璃棒并均匀搅拌B 对不达恒重的 用一定时间内减失重量代替 二 干燥剂干燥法适用于受热易分解或挥发的供试品 干燥剂有 硅胶 最常用 吸水较强 价廉 可重复使用 无腐蚀性 浓硫酸 吸水差 价廉 可重复使用 有腐蚀性 P2O5 吸水强 价贵 不可重复使用 出现结块 液滴即更换 三 减压干燥法适用于熔点低 受热不稳定或水分难赶除的药物 除另有规定外 压力应在2 67kPa 20mmHg 以下 例 1 5 A 干燥失重测定法B 炽灼残渣检查C 两者皆是D 两者皆不是1 有机物杂质检测法 D 2 不溶物的测定法 D 3 杂质检查法 C 4 有机药物中不挥发无机物的检测法 B 5 药物中挥发性物质的检测法 A 例6 干燥失重测定的方法有 BCDE A 炽灼 500 600 法B 常压恒温干澡法C 减压干燥法D 干燥剂干燥法E 减压干燥剂干燥法 例7 干燥失重测定中应注意哪几个方面 ABCD A 供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mmB 干燥温度一般为105 C 可用干燥剂干燥D 主要指水分和挥发性物质E 测定时间不超过3小时 四 热分析法热分析法是在程序控制温度下 精确记录待测物质理化性质与温度的关系 研究其受热过程所发生的晶型转变 熔融 升华 吸附等物理变化和脱水 热分解 氧化还原等化学变化 对物质进行物理常数 如熔点和沸点 的确定 鉴别和纯度检查的方法 亦可用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选 热重法 TGA 热重法是在程序控制温度下 测量物质质量与温度关系的一种技术 记录质量变化对温度的关系曲线即热重曲线 热重曲线的纵坐标为质量 m 横坐标为温度 T 或时间 t m 特点 准确测量物质的质量变化及变化速度 样品用量少 速度快本法适用于药物结晶水的测定和贵重药物或在空气中极易氧化药物的干燥失重分析 2 差热分析法 DTA 差热分析法是在程序控制温度下 测量待测物质和参比物之间的温度差 T 与温度 或时间 之间的关系的一种技术 本法可鉴别药物或其多晶形 可检查药物的纯度 差热分析曲线记录的纵坐标为样品与参比物的温度差 T T与热容量差 CR Cs 成正比 横坐标为温度 T 3 差示扫描量热法 DSC 差示扫描量热法是在程序控制温度下 测量输给待测物质和参比物的能量差与温度 或时间 关系的一种技术 本法可鉴别药物或其多晶形 纯度检查以及熔点和水分等的测定 测定方法 1 卡尔费休水分滴定法 费休法 适用于加热易破坏 不适于氧化剂 还原剂 水反应的物质 2 甲苯法 适用颜色较深药物 氧化剂还原剂 皂类 油类等 3 甲醛法 不适于 1 2 用 3 法 九 水分测定法 费休法 1 原理 非水溶液中氧化还原滴定 标准滴定液即费休液 I2 SO2 吡啶 甲醇 I2 SO2 H2OSO3 HI SO3 HI 无水吡啶氢碘酸吡啶 硫酸酐吡啶 不稳定 硫酸酐吡啶 无水甲醇甲基硫酸氢吡啶 稳定 总反应方程式 I2 SO2 3C2H5N CH3OH H2O2C2H5N HI C2H5N HSO4CH3 2 操作 水分标定费休液 干燥具塞玻璃瓶中 重蒸馏水30mg 无水甲醇2 5ml 费休试液滴至终点并用空白校正 得 F W A B F 4 0为宜 F 3 0不宜再用 F 滴定度 相当水重量 ml费休液 mg mlW 重蒸馏水重量 mg A 滴定消耗费休液容积 ml B 空白消耗费休液容积 ml 供试液测定 将 中重蒸馏水换上供试品 使终点由黄色至红棕色 永停滴定法指示终点 得 供试品中水分含量 A B F W 100 3 注意 吡啶和甲醇即是反应物又是溶剂 终点指示法可 2自身作指示剂 永停滴定法指示 电流计突然偏转且数分钟不退回 费休试剂 要求纯度高 含水量 0 1 其中的I2干燥器中48hr SO2用浓H2SO4脱水后再配制 供试品取量 以消耗费休液1 5ml为宜 实验条件 不宜在温度大的环境中操作 检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质 金属氧化物或无机盐类 1 原理样品炭化 分解后 H2SO4湿润 700 800 炽灼至恒重 炽灼残渣 硫酸灰分 限量一般为0 1 0 2 十 炽灼残渣检查法 2 操作方法 3 注意事项 1 供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定 2 含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀 应采用铂坩埚 3 若残渣需留作重金属检查 则500 600 炽灼至恒重 4 加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐 并帮助有机物炭化 例1 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为 C A 500 600 B 600 700 C 700 800 D 800 1000 E 1000 1200 例2 炽灼残渣检查后 将残渣留作重金属检查时 炽灼温度应为 A A 500 600 B 600 700 C 700 800 D 800 1000 E 1000 1200 例3 炽灼残渣的限量一般为 E A 1 B 0 5 1 C 0 4 0 5 D 0 2 0 3 E 0 1 0 2 例4 炽灼残渣检查时 炭化后经硫酸处理后灰化至完全的称为 C A 灰分B 残渣C 硫酸灰分D 炽灼灰分E 残余灰分 十一 易炭化物检查法 检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质 方法 H2SO4炭化后与对照液比较 比色 同置白色背景前 平视观察比较 对照液 1 溶液颜色检查 项下的标准比色液 2 由比色用氯化钴液 比色用重铬酸钾液 比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液 3 高锰酸钾液 十二 溶液颜色检查法控制药物中有色杂质限量的方法 采用三种方法检查 第一法目视比色法即与标准比色液比较的方法 标准比色液的配制 第二法分光光度法单一波长定量 第三法色差计法全波长范围定量 本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值 对其颜色进行定量表述和分析的方法 测色仪器一般为光电积分型色差计 十三 澄清度检查法 检查药物中的微量不溶性杂质 用作注射剂的原料药一般应作此项检查 1 检查方法对照法 2 浊度标准液的配制 中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准 反应原理 乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛 甲醛与肼缩合生成甲醛腙 不溶于水 形成白色浑浊 操作 1 00 硫酸肼溶液与10 乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液浊度标准原液浊度标准液 5个级号 3 判断 药典中规定的 澄清 系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂 或未超过0 5号浊度标准液 4 溶剂 水 酸 碱 有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用 新沸过的冷水 十四 酸碱度检查法 检查药物中酸碱性杂质 原理 酸碱中和反应 1 用酸滴定或规定值pH 7 0称碱度 2 用碱测定或规定值pH 7 0称酸度 3 用酸 碱滴定或规定值pH 7 0称酸碱度 溶剂 1 常用新沸过冷水 2 药不溶用中性乙醇 3 药不溶而杂质溶 用水溶后 过滤取滤液 检查方法 1 酸碱滴定法 酸 碱滴定供试品中碱 酸杂质 用消耗酸 碱滴定液体积为限度指标 2 PH测定法 对酸碱度要求严格用此法 用电位法测供试液pH值 3 指示剂法 规定指示剂变色pH值范围 控制杂质 如 10ml纯水 甲基红2滴不得呈红色 控制酸度 10ml纯水 溴麝香草酚蓝5滴不得呈蓝色 控制碱度 从而控制纯水的pH4 2 7 6 定义 药物生产和贮存过程中 据药物自身性质 生产方法 工艺条件可能引入的杂质 第四节特殊杂质检查 一 物理法 二 化学法 三 旋光法利用杂质与药物旋光度差异 通过测 与 來控制杂质 硫酸阿托品 消旋 中检杂质莨菪碱 左旋 要求50mg ml供试液 0 4 WXG 4圆盘旋光仪 四 分光光度法 利用杂质与药物对光选择吸收差异 通常选药物无吸收而杂质有吸收的波长测 规定 值 一 紫外分光光度法 药物无吸收而杂质有吸收 药物与杂质在某一波长有重叠 不含分解产物 A294 A262 Amax Amin 含分解产物 A294 A262 Amax 0 Amin Ax A294 A262 3 1 合格 紫外可见分光光度计 数学表达式 A log tr 0 kbcA 吸光度 K 比例常数 B 液层厚度 C 溶液浓度 由光源发出的光 经单色器分光获得一定波长的单色光 照射到吸收池中的样品溶液 经检测器将光强度变化转变为电信号变化 信号处理系统计算出结果后显示或打印测量结果 光源单色器 吸收池 检测器 信号处理系统 各项指标在安装时均和用户当场测量 保证仪器性能 低杂散光 优于0 01 T低噪声 优于0 0004Abs采用双光束动态反馈测光系统 进口 光栅 氘灯 光电倍增管 保证仪器优良性能和长寿命 TU 1901六档光谱带宽可调 适应用户不同的需求 自动化程度高 只有一个电源开关 各项指标在安装时均和用户当场测量 保证仪器性能 可选型号多 共计12种 用户可以选择光谱带宽是否可调 是否连接电脑 双光束或准双光束进口 光栅 氘灯 硅光电池 保证仪器优良性能和长寿命 可以连接打印机 232接口连接电脑 可以选择五联池或八联池 一次测量多个样品 国家 十五 科技攻关成果 各项指标在同等价位机器中处于领先 杂散光达到0 05 T氘灯 钨灯 光栅 硅光电池均采用进口部件 保证了优良性能和长寿命内部光学元件表面镀有SiO2保护膜 延长光学部件使用寿命全工业化流水线生产 提高生产效率 节约了成本 可以连接打印机 电脑 自动记录光源使用时间 方便用户更换光源 二 比色法 供试品 试剂对照品 试剂比色 AF710 3目视比色计 三 红外分光光度法 常测药物中无效 低效晶型 遵循朗伯 比尔定律数学表达式 A kbcA 吸光度 K 比例常数 B 基态原子层的厚度 C 蒸汽中基态原子的浓度 四 原子吸收分光光度法 分析方法 标准曲线法配制一组含有不同浓度被测元素的标准溶液 在与试样测定完全相同的条件下 按浓度由低到高的顺序测定吸光度值 绘制吸光度对浓度的校准曲线 测定试样的吸光度 在校准曲线上求出被测元素的含量 供试液 标准限量的待测元素 供试液先将 液喷入火焰读数a 再将 液喷入火焰读数b 要求b a b 为合格 此法可消除背景对检测影响 光源 原子化器 单色器 检测器 信号处理系统 由光源发出的光 通过原子化器产生的被测元素的基态原子层 经单色器分光进入检测器 检测器将光强度变化转变为电信号变化 并经信号处理系统计算出测量结果 光源作用 提供待测元素的特征波长光 光强应足够大 有良好的稳定性 使用寿命长 空心阴极灯是符合上述要求的理想光源 应用最广空心阴极灯 一个阳极 钨棒一个空心圆柱形阴极 待测元素的高纯金属或合金一个带有石英窗的玻璃管 管内充入低压惰性气体 高度的自动化可扩展火焰自动进样器 石墨炉自动进样器 先进的横向加热石墨炉技术质量流量计控制燃气流量完善的安全系统 五 色谱法 吸附 分配 离子交换 排阻差异 一 纸色谱法通常测极性较大的药物杂质 放射性药物中杂质缺点 扩散时间长 斑点呈扩散状 展开剂受限等 故应用不广泛 二 薄层色谱法测有机药物中与主药密切关系的原料 中间体 副产物 分解产物等 此法简便 快捷 灵敏 常定性分析 Rf 三 含量分析 含杂质检查 色谱图中各字母表示的含义 E mV进空样气峰 h 2h0tmtRt R tR tm b tm 死时间tR 保留时间t R 调整保留时间h 峰高Wb 峰宽Wh 2 半峰宽 Agilent1100高效液相色谱仪 1 高压输液泵 用于输送流动相