可见及紫外分光光度法测定女贞子总黄酮含量的研究.doc

可见及紫外分光光度法测定女贞子总黄酮含量的研究2006NO.8?70?SeriaINo.161ChinaBrewingAnalysisandExamination可见及紫外分光光度法测定女贞子总黄酮含量的研究黎或Lz,蓝方存z,李梅娣z,郑康伟z,王锡茂z,欧冬霞z,曾房金(1.中山大学化学与化学工程学院,广东广州510275;2.广东轻工职业技术学院轻化系,广东广州510300)摘要:利用可见光及紫外分光光度法测定女贞子总黄酮含量,可见光分光光度法是以芦丁为参照品,硝酸铝作显色剂,在510rim波长测定总黄酮含量.紫外分光光度法是以芦丁为参照品,在359nm波长测定总黄酮含量.经过比较,认为紫外分光光度法是一种较理想的测定方法.关键词:女贞子;总黄酮;紫外可见光分光光度法中图分类号:O657.32文献标识码:A文耄编号:O2545071(2006)08007002DeterminationoftotalflavonoidinLigustmmLucidumAit.byISspectrophotometryLIYu,LANFangcan2,LIMeidi2,ZHENGKangwei,WANGXimao,OUDongxia,ZENGFangin(J.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,SunYat-SenUniversity,Guangzhou510275,China;2.DepartmentofChemicalEngineering,GuangdongInstituteorLightIndustrialVocationalTechnology,GuangZhou51o3oo,China)Abslraet:TotalflavonoidinLigusmarnLucidumAirwasdeterminedbyUVorVISspectrophotometryatthewavelengthof510nmor359nm,withrutinascontrastsampleandAI(NO3)3asrevealingagent.ThecomparisonofdeterminationresultsobtainedfromVISandUVspec.trophotometrywasdoneandthelatterWasprovedtobeabettermethodfordeterminationoftotalflavonoidcontentinLigus.rnLucidumAir.Keyword:LigusmunLucidumAiL;totalflavonoid;UVNISSpectrophotometry女贞子(LigustrumLucidumAir)为木犀科植物女贞的果实.在欧亚大陆分布广泛,在我国主要分布在浙江,江苏,湖南,广西,江西,四川等地.女贞子主要含有萜类,黄酮,苯醇类等化合物.女贞子的主要药用价值有:提高机体免疫功能,降低眼压,降血糖血脂,抗菌消炎,护肝和抗癌等作用【l】.目前报道的测定植物中黄酮含量的方法主要是可见光分光光度法嘲,其测定女贞子总黄酮含量的方法未见报道.本文采用可见光与紫外光分光光度法测定女贞子中总黄酮含量,并对2种方法进行了比较,拟寻找一种准确而简便的测定女贞子中黄酮含量的方法.1仪器与试剂1.1仪器UV一3150型紫外一可见分光光度计;上海二分7230G可见光分光光度计;北京赛多利斯电子分析天平;索氏抽提器;PHILIPS一7120S粉碎机.1.2试剂与样品芦丁对照品从广州中医药大学药物化学研究所购买,芦丁含量>-98%;其他试剂均为分析纯.女贞子样品购于广州,经粉碎后过60目筛,在60cI=烘箱干燥6h后冷却备用.1.3实验方法1.3.1样品处理精确称取女贞子粉末1.0000g,在索氏抽提器中经石油醚脱脂到无色后,放冷后转出石油醚,加入80mL无水甲醇,抽提至无色.提取液全部转移到l00mL容量瓶,用无水甲醇定容作为试液待用.l3.2可见光分光光度法标准曲线的制备121精密称取120C干燥至恒重的芦丁对照品250mg,用无水甲醇溶解,转移入250mL容量瓶中,用无水甲醇收稿日期:2006.03.06:修回日期:2006-03.20基金项目:广东轻院科研启动基金资助项目(200503)作者简介:黎或(1970.),男,博士研究生,副教授,主要从事材料物理化学与精细化工的研究工作.分析与检测中国酿造2006年第8期总第161期?71?定容,摇匀.精确移取5.00mL置于50lL容量瓶中,用无水甲醇定容,摇匀.此芦丁对照品溶液浓度为0.1mg/mL.准确吸取0.1mg/mL芦丁对照品溶液0.OOmL,1.OOmL,2.OOmL,3:00mL,4.OOmL,5.OOmL,6.OOmL,分别置于25mL容量瓶中,各n5o%乙醇至6mL,分别加5%亚硝酸钠溶液1.00mL,摇匀,放置6min后分别加10%硝酸铝溶液1.OOmL,摇匀,放置6min,再分别加1%氢氧化钠溶液10.00mL,再用50%乙醇定容,摇匀,放置15min后,以空白溶液为参比,在波长510nm处测吸光度,得回归方程.1.3-3可见光分光光度法回收率实验精密称取5份已知总黄酮含量的女贞子粉末1.0000g,加入一定量的芦丁对照品,按照1.3.1所述制得样品液,按照l-3.2所述显色并测定吸光度,由回归方程计算总黄酮含量.回收率=(实测值一样品所含的总黄酮)仂口入的芦丁x100%.1.3.4可见光分光光度法样品的总黄酮含量测定分别准确吸取1.OOmL试液置25mL容量瓶中,按照1.3.2所述显色并测定吸光度,在5lOnm波长处测定吸光度A,由回归方程计算样品中总黄酮含量.1.3.5紫外光分光光度法标准曲线的制备精密称取120%干燥至恒重的芦丁对照品96.4mg,用无水甲醇溶解,转移入lOOmL容量瓶中,用无水甲醇定容,摇匀.精确移取10.OOmL置于lOOmL容量瓶中,用无水甲醇定容,摇匀.此芦丁对照品溶液浓度为0.0964mg/mL.准确吸取浓度0.0964mg/mL丁对照品溶液0.00mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL,6.00mL,分别置于25mL容量瓶中,各加无水甲醇定容,在359nm处测吸光度A,得回归方程.1.3.6紫外光分光光度法回收率实验精密称取5份已知总黄酮含量的女贞子粉末1.O000g,加入一定量的芦丁对照品,按照1.3.1所述制得样品液,用无水甲醇稀释样品液,在359nm处测吸光度A,由回归方程计算总黄酮含量.l_3.7紫外光分光光度法样品的总黄酮含量测定分别准确吸取1.00mL试液置25mL容量瓶中,用无水甲醇稀释定容,在359nm波长处测定吸光度A,由回归方程计算样品中总黄酮含量.2结果与讨论2.1可见光分光光度法将配制好的不同浓度的芦丁对照品溶液在510nm波长处测定吸收度A,得回归方程为:A=.0.01l5+0.02062C(A为吸光度,C为浓度mg/L),相关系数r2=0.9997.表明芦丁浓度在4mL24mg/L范围内线性良好.2.2紫外光分光光度法将配制好的不同浓度的芦丁对照品溶液在359nm波长处测定吸收度A,得回归方程为:A-0.0004054+0.02718C(A为吸光度,C为浓度mg/L),相关系数0.9997.表明芦丁浓度在4m24mg/L范围内线性良好.2-3样品的总黄酮含量测定黄酮类化合物具有特定的紫外吸收带,其结构中的肉桂酰环产生的I带在300nm4OOnm内,由苯甲酰环产生的II带在240nm285nm内,不同的黄酮在这2个吸收带的吸收强度不同3J.含黄酮类化合物的原料经一定的提取纯化后,可直接于最大吸收波长处测定其吸收度,以芦丁为对照品对照计算其含量4.实验选择芦丁在I带的最大吸收波长359nm作为紫外光分光光度法的测量波长.取不同产地的女贞子样品,分别用可见光分光光度法和紫外光分光光度法对每个样品平行测定3次,RSD=I.04%,各个样品的总黄酮含量结果见表1.表1不同产地的女贞子样品的总黄酮含量测定结果Table1.DeterminationresultsoftotalflavonoidcontentinLigustrumLucidumAitfr0mdifferentproducingareas从表l可见,不同产地的女贞子全草的总黄酮含量有一定差异,其中以浙江女贞子黄酮含量最高,而广西女贞子黄酮含量最低.用可见光分光光度法测得的总黄酮含量总是比用紫外光分光光度法测得的总黄酮含量要高,这可能因为女贞子的化学成分中含多种萜类,其中相当部分萜类的分子结构中含有能与铝离子络合显色的酚羟基1,而可见光分光光度法是在强碱性溶液与铝离子反应后显色,酚羟基在该条件下也能够与铝离子结合,在510rim处也被吸收,这样就导致测定结果有偏差阍.2.4回收率实验把一定量的芦丁对照品加入已知总黄酮含量的广东女贞子中做回收率实验,由表2可见,回收率范围在98.63%100.7%,符合定量分析要求.3结论实验结果表明,可见光分光光度法和紫外光分光光2006No.8?72?SerialNo.161ChinaBrewingProductDevelopment金针菇酒生产工艺研究杨胜敖(铜仁职业技术学院,贵州铜仁554300)摘要:研究了以金针菇,糖为主要原料,用发酵法生产金针菇酒.通过正交试验对发酵条件进行优化,结果表明:金针菇浆液10%,糖22%,柠檬酸1.5%,酵母1.2%,温度29,发酵4d,可生产得到风味独特,酒体醇厚,营养丰富的金针菇酒.关键词:金针菇酒;发酵;工艺;研究中图分类号:T262.7文献标识码:B文章编号:02545071(2006)080072-03ResearchonprocessingtechnologyofflammulinavelutipeswineYANGSheng.ao(TongrenVocationalandTechnicalCollege,Guizhou554300,China)Abstract=Usingflammutinavelutipesandsugarasrawmaterial,flammulinavelutipeswinewasproducedbyfermentation,Theoptimizationfermentationconditionwasobtainedbyorthogonaltest:10%flammulinavelutipes,22%sugar,1.5%citricacid,1.2%yeast,temperatureat29.fermentationfor4days.Theflammulinavelutipeswinehasspecialflavor;mellowliquorandrichnutrients.Keywords=flammulinavelu邱eswine;fermentation;technology;research金针菇又称朴菇,冬菇,构菌,毛柄金钱菌等【”,其味道十分鲜美,是药食两用菌.金针菇含有18种氨基酸,糖,脂肪,蛋白质,多种维生素和矿物质,其中赖氨酸,精氨酸含量十分丰富,能促进婴幼儿健康成长和智力发育,对成人也有健脑和增强记忆力的作用,故国外称之为”增智菇”.据赵建英2】对金针菇营养成分分析,每lOOg收稿日期:2006.03.06作者简介:杨胜敖(1966.),男,贵州印江人,副教授,主要从事农副产品贮藏与加工的教学,科研工作.度法2种方法测定女贞子总黄酮含量都有较好的线性关系.紫外光分光光度法能直接测定黄酮的含量,不需用硝酸铝显色,从而能够避免女贞子萜类化合物中酚羟基的干扰,