日语医学论文：急性実験におけるラットの手术法.doc

本文档系作者精心整理编辑，实用价值高。急性実験手術法目次 実験始前 麻酔方法（吸入麻酔、麻酔薬投与） 方法（気管、血管） 他（筋弛緩薬投与人工呼吸、実験終了後処理） 参考文献実験用、19世紀初期産中白色変種見固定、実験動物用使。分類学的哺乳動物網、歯目、真鼠亜種、科、属属1）。現在多数種類系統存在、主系統近交系ACI、ALB、F344、LEW、SHR、TO、WM等、系、遺伝性黄疸、遺伝性白内障等、Donryu、SpragueDawley、Wistar等、系HORF1、LBNF1、LF344F等2）。実験動物取扱、広使。我研究室主用電気生理学的研究行。本稿、麻酔下行急性実験際基本的方法述。2.動物実験始前近年、福祉的観点動物実験対是非問、論文発表際各研究機関倫理委員会承認動物実験関基本指針旨記述必要場合多。実験動物飼育及保管等関規準、昭和55年総理府告示International guiding principles for biomedical research involving animals. CIOMSS1984動物実験関指針、日本実験動物学会1987倫理規範示。1988年生理学領域動物実験関基本的指針、日生誌51巻1号53頁日本生理学会示。動物実験行際指針順守、適正実験計画実験遂行務。基本的事項、科学的観点最適正種属選択項目。実験用場合、生理的特徴把握必要。表1生理学的特徴示。表1生理学的特徴体重雄300700雌200400(初生時体重56)性成熟年齢910週交配開始齢914週性周期（雌）45日妊娠期間2122日産仔数615匹離乳年齢1823日食餌量1520/日/匹(10/100体重/日)飲水量4ml/日/匹(811ml/100体重/日)寿命23年体温38.2（37.838.7）開眼日齢1012日心拍数352（260450）回/分血圧98（82120）mmHg総血液量6.41（5.756.99）ml/100体重呼吸数85.5（66114）回/分呼吸量0.86（0.601.25）ml/回、73(50101)ml/分赤血球数8.9（7.29.6）106/m3値46（3953）赤血球容積55（5258）mm3白血球数総数：14（5.525.0）103/mm3球：73(6584)好中球：22(934)単球：2.3(05.0)好酸球：2.2(06.0)好塩基球：0.5(01.5)血小板数1240(10001380)103/mm3血漿H ：7.40.06CO2 ：22.54.5mM/lCO2圧 ：405.4mmHg尿H ：7.38.5比重 ：1.041.071）、2）、5）引用動物愛情持静取扱大切。動物扱不適切動物狂暴、実験者指、実験処置不正確2）。動物不安与、動物嫌（動物尾長時間下）3）。、母指中指背部腋下持。右手場合、示指右前肢前方、中指右前肢持。12週齢背部皮膚持4）。保定者、手力入、肝心部分保定重要。3.麻酔方法麻酔実験動物不安苦痛緩和、動物取扱検査、実験処置容易目的使用。麻酔使用、動物麻酔深度注意深観察必要。麻酔直後意識混濁共一種興奮期（全身運動眼球移動瞳孔散大）。興奮期過、眼球下方固定、均等安静呼吸入、各種反射消失。時期手術適期（深麻酔期）、麻酔剤投与量多時期排尿痙攣見。覚醒期近、全身震起睫毛反射見。一般麻酔動物体温低下、保温用保温。、実験室室温高望5）。麻酔全身麻酔局所麻酔、一般的実験用小動物（、類等）局所麻酔使用6）。全身麻酔方法、麻酔薬気化吸入麻酔、麻酔薬投与（静脈内注射、腹腔内注射）種類一般的用。表2各種麻酔薬長所短所示。 表2各種麻酔薬長所短所麻酔薬長所短所 筋弛緩作用、鎮静作用強 呼吸循環系抑制作用少 気化器使用、安価 部屋換気悪他動物実験者害 可燃性、爆発性 麻酔作用強、麻酔深度調節容易 刺激性少非燃性非爆発性 呼吸循環系抑制強 専用装置気化必要 水溶吸収早 呼吸循環系抑制 長時間麻酔効果得 発性有 回復慢性実験適 各種動物実験広用 呼吸循環系抑制強1）、3）、5） 8）引用吸入麻酔揮発性麻酔薬（、）麻酔薬（笑気）、単独混合使用1）。麻酔薬体内分解肺排泄、麻酔深度適宜調節利点1）、手術適期短、補助麻酔併用繁雑6）。小型動物麻酔法、麻酔瓶容器揮発性麻酔薬浸綿花動物入蓋方法、動物入容器専用装置気化麻酔薬送込方法。筋弛緩作用、鎮痛作用強、呼吸循環器系抑制作用少、気化器必要、安価1）利点。、部屋換気悪他動物実験者害5）、可燃性、爆発性注意必要。麻酔作用強麻酔深度調節容易、刺激性少非燃性非爆発性利点、呼吸循環系抑制強1）7）。、専用装置気化使用必要。麻酔薬投与長時間手術適期得、系統週齢、性、健康状態投与量考慮死亡恐6）。麻酔薬使用。酸、水溶、吸収早8）。呼吸循環系抑制、長時間麻酔効果得、発性有麻酔回復慢性実験適7）。表3体重当投与量示。商品名流通、各種動物実験広用。表4体重当投与量示。表3体重当投与量（単位：ml、濃度：2 g / 8 ml d.w.）体重（）1.1 g / kg1.2 g / kg1.4 g / kg2001.101.201.402501.351.501.753001.651.802.103501.902.102.454002.202.402.804502.452.703.155002.753.003.50表体重当投与量（単位：ml、濃度：50 mg / ml）体重（）30 mg / kg40 mg / kg50 mg / kg2000.120.160.202500.150.200.253001.080.240.303500.210.280.354000.240.320.404500.270.360.455000.300.400.50腹腔内投与場合、麻酔薬満26G 1/2注射針（直径0.45mm、長13mm、社製）取付。胸骨下端外尿道口結線中央注射針腹腔内刺入。刺入際、針先皮膚、皮下注射針入腹膜穿刺。注射針一気腹腔内刺入腹腔内臓器損傷可能性気。次一度軽引、出血確認一気麻酔薬注入。注射針腹腔内入動物、注射針先腹腔内臓器損傷恐注意。動物、注射針抜再度保定直。、不必要与吸入麻酔薬、軽麻酔。静脈内投与場合、注射針経皮的静脈刺入麻酔薬投与方法、静脈挿入麻酔剤投与方法。場合、最初麻酔腹腔内投与行、実験中追加投与静脈内投与行一般的。大塚7）実験、呼吸循環系抑制強述。、循環系及影響麻酔麻酔比較（図1）。結果、心拍数関両麻酔差認（群394.8134.78beat/min、群379.5519.40beat/min、meanS.D.、n=106）。平均血圧、麻酔群（72.9313.58mmHg）、麻酔群（115.799.14mmHg）、方高傾向。一般的長時間麻酔効果持続、30g/kg約30分、40mg/kg約60分覚醒始3）5）6）。、血圧差生理由、2麻酔薬持続効果差影響可能性考。、麻酔投与後時間経麻酔効果早減弱、麻酔群血圧高傾向考。、心拍数両麻酔差認、麻酔薬作用部位種影響異可能性考。図1麻酔（1.1g / kg、ip）麻酔（50mg / kg、ip）循環系対影響比較A：1分間心拍数、B：平均血圧比較。麻酔開始23時間後値、麻酔薬追加投与行。4方法、気管静脈動脈順行。動脈前静脈確保、時出血対補液行利点。気管頚部腹側毛刈皮膚切開、皮膚脂肪組織、筋鉗子剥離。皮膚脂肪組織分際下顎腺見、下顎腺及周囲脂肪組織血管豊富分布、損傷出血激、鉗子分離、。切開創皮膚鉗子左右牽引。次胸骨舌骨筋鉗子左右開気管露出、気管見開創器筋左右固定。気管露出周囲付着結合織血管先尖小剥離。気管周囲反回神経複数走行、神経損傷気。剥離終図2手順気管挿入。気管、外径2.53mm（内径22.5mm）1520mm切断数種類用意、適時気管太合選良。（図2B）気管際、気管周囲組織出血起切開気管中血液流込、気管中血餅形成、実験中気管閉塞窒息可能性高。、気管時出血起注意、出血起前止血施心。図2気管A：気管手順（1）気管下糸本通軽結。（2）吻側糸気管結紮、気管切開。（3）気管挿入。（4）尾側糸気管一緒結紮。（5）吻側糸結。（6）両方糸同士結。（7）6側面図。B.全体写真模式図血管紹介血管対象、外頚静脈（図3B）総頚動脈（図3C）。静脈麻酔薬等薬物投与目的、動脈心拍数、血圧観血的測定目的行。血管用3Fr（外径1.0mm、製）用、先端10mm印付。溶液（静脈用：生理食塩水、動脈用：生理食塩水1.000 unit/ml希釈）充填、三方活栓介接続溶液満。空気入確認。空気入部分血栓形成、空気血管中入空気塞栓起恐注意必要。外頚静脈気管約1.5cm外方、胸骨舌骨筋胸鎖乳突筋間走行。静脈黒紫色確認。総頚動脈気管外側走行、血管壁厚弾力性、鮮色、拍動。動脈静脈同様行、動脈血圧高、出血血液勢飛出注意。目的血管露出、創部開開創器固定。小血管周囲結合織剥離、結合織血管分離、血管糸十分結紮、血管抜恐、血管周囲結合織剥離必要。慣、長血管周囲剥離方。、静脈分枝、分枝避、分枝糸結紮必要。血管挿入手順図3示。挿入引血液戻確認。引血液戻先端血管壁密着可能性、場合血管位置、押中身少量入、再引血液戻。以上操作終了後、目的実験。仰臥位実験皮膚切開創上生理食塩水湿綿花等置、伏臥位実験行皮膚切開部創縁血管糸縫合後、皮膚切開部縫合。切開部乾燥防。図3血管A：血管手順（1）血管下糸本通、軽結。（2）末梢側糸結紮、一方糸心臓側血管。（3）末梢側結紮部位近位置血管鋏切込入。（4）切開部広。静脈場合、壁薄広血管断裂注意必要。（5）挿入、心臓側血管結紮。先端斜挿入、鋭角血管壁破可能性注意7）。（6）、挿入。予先端約1cm印、程度挿入目安。（7）11.5cm挿入、心臓側糸血管共結紮。（8）末梢側糸結。（9）末梢側糸心臓側糸同士結。（10）9側面図。B：静脈全体図C：動脈全体図5他筋弛緩薬投与人工呼吸動物非動化、筋弛緩薬（臭化、商品名）2mg/kg静脈内投与。筋弛緩薬作用時間短（約1時間）、適時追加投与持続投与必要。筋弛緩薬投与呼吸停止、小動物用人工呼吸器接続呼吸管理行。呼吸量、体重1001cc目安。体重450以上脂肪割肺容量大、12割程度減調整。呼吸回数90回/分規準、呼気呼気中二酸化炭素濃度3.8範囲適時回数調整。実験終了後処理実験終了後麻酔薬（1ml：50mg/ml）投与、動物苦痛与安楽死。組織学的検索行場合、深麻酔下胸骨肋骨切断開胸心臓露出。左心室上行大動脈（外径22.5mm）挿入、固定。静脈内投与後、体循環潅流液排出右心耳切開。生理食塩水500ml潅流、次10液潅流固定行。摘出標本、12日間浸漬固定。6.参考文献1）藤原公策、前島一淑、宮嶌宏彰：動物実験学辞典、朝倉書店（1989）2）日本実験動物技術者協会、図解実験