分子生物学与基因工程试卷库(4).doc

分子生物学与基因工程试题库（4）一、选择题（每题2分，共计20分）1.交配型转换反应：( ) (a)涉及将DNA盒从一个沉默基因座(HML或HMR)转移到MAT基因座 (b)通常导致交配型的改变(c)不发生在单倍体细胞中 2.锌指蛋白与DNA的结合( ) (a)位于DNA大沟 (b)通过“锌指”的C端进行 (c)利用蛋白的-螺旋区域 (d)每个“指”通过形成两个序列特异的DNA接触位点 (e)通过“指”中保守的氨基酸同DNA结合 3. 在O连接寡聚糖中，直接同多肽相连的糖基是( ) (a)甘露糖 (b)N乙酰葡糖胺 (c)C-半乳糖或N乙酰半乳糖胺 (d)半乳糖或N-乙酰葡萄糖胺(e)葡萄糖 4. 在真核生物细胞中，翻译的哪一个阶段需要GTP?( ) (a)mRNA的5末端区的二级结构解旋 (b)起始tRNA同核糖体的结合 (c)在延伸的过程中，tRNA同核糖体的结合 (d)核糖体的解体(e)5帽子结构的识别 5. 第一个作为重组DNA载体的质粒是( )(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 6. RFLP产生自( ) (a)使用不同的限制性内切核酸酶 (b)每种类型的染色体有两条(二倍体) (c)染色体中碱基的随机变化 (d)Southern印迹(e)不同探针的使用 7. DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，( ) (a)将双链DNA分子中的5磷酸基团同3-OH末端重新形成磷酸二酯键 (b)作用时不消耗能量 (c)需要Mn2+等二价辅助离子(d)也可以连接RNA分子 8. 下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述中，( )是不正确的 (a)质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数 (b)可以在氯霉素作用下进行扩增 (c)通常带有抗药性标记(d)同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子 9. pBluescriptMl3载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两个噬菌体的启动子，这样增加了该载体的功能，如： (a)可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析 (b)利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增 (c)利用通用引物进行序列分析 (d)利用这两个启动子进行定点突变上述四种功能中哪一种是不正确的?( ) 10. 所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。 二、判断题（每题1分，共计10分）1 大肠杆菌中，复制叉以每秒500个碱基对的速度向前移动，复制叉前的DNA以大约3000rmin的速度旋转。 （ ）2 在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性(退火)反应。 （ ）3 核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子. （ ）4 用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。 （ ）5 所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。 （ ）6. 根据不同物种同一蛋白质中氨基酸的不同来估计突变率往往较实际的突变率低，因为一些突变体由于危及蛋白质功能，在选择压力下从种群中消失。 ( )7. 大肠杆菌DNA聚合酶缺失3 5校正外切核酸酶活性时会降低DNA合成的速率但不影响它的可靠性。 ( ) 8. 内含子通常可以在相关基因的同一位置发现。 ( )9.转录因子具有独立的DNA结合和转录激活结构域。 ( )10.延伸因子eEF-la帮助氨酰tRNA进入A位点依赖于ATP内一个高能键的断裂。 ( )三、填空（每空1分，共计20分）1 重组体的筛选有两层涵义，一是将-，二是将-。 2.多数类型的RNA是由加工-产生的， 真核生物前体tRNA的加工包括-的切除和-的拼接。随着-和-端的序列切除，3，端加上了序列-。 3. 真核生物中有5种DNA聚合酶，它们是：(1)-(2)-(3)-(4)-(5)-。 4. 一种由于蛋白质序列中丢失了-残基引起的突变将会阻止-桥的形成，这种蛋白质更容易-。如果在-温度是稳定的而在-温度是不稳定的，将它称为-突变，是-突变的一个例子。 四、简答题（每题3分，共计30分）1.Fredrick和McClarin等用一个由13个碱基对的DNA片段与EcoRI反应，然后分离到酶和DNA共结晶的复合物，通过X射线分析发现了什么? 2. 有两个系统发育上十分接近的物种，它们染色体中的(G+C)含量不同，A株(G+C)含量为55而B株是68。同源及异源转化重组实验表明：来自(G+C)低的DNA易于转化人(GC)高的生物体基因组中，反之则不然。请说明原因。 3. 在RNA编辑中，向导RNA(gRNA)的作用是什么?它的哪些部分分别与(1)编辑前mRNA；(2)编辑后的前体mRNA互补? 4. 虽然同源异型蛋白与锌指蛋白差别很大，但是它们识别DNA序列的结构元件相似的，这个元件是什么? 5. 被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的? 6. 列出转化病毒正链RNA掺人到宿主双链DNA的详细过程。 7. 什么是增效与减效突变? 8. 在工业微生物菌种的选育中，人们喜欢用诱变的方法筛选解除了酶合成阻遏的突变株，而不要解除了酶活性反馈抑制的突变株。请解释原因。 9. RecA蛋白是怎样调节SOS反应的? 10. 说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(35)。 五、设计与分析题（每题5分，共计10分）1.有一个被认为是mRNA的核苷酸序列，长300个碱基，你怎样才能： (1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)确定它是真核还是原核mRNA。 2.YES(酵母大肠杆菌穿梭载体)是构建cDNA文库的高效载体，这种载体是噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起采的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，XYES中的质粒序列能够被诱导重组出入基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶Xho(5-CTCGAG)进行切割，然后在dTTP存在的情况下，同DNA聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链cDNA同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5，CGAGATTTACC和5GGTAAATC，它们的5端都是磷酸。然后将载体和cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用2g的载体和O1g的cDNA，构建了一个有4X107个克隆的cDNA文库。问： (1)假定载体长为43kb，cDNA的平均长度是lkb，请估计在连接混合物中，载体分子同cDNA的比例是多少? (2)在此过程中，载体分子转变成重组体的频率是多少(每对核苷酸的平均分