食用白醋中总酸量和氨基酸含量.doc

食用白醋中总酸量和氨基酸含量（氮）的分析李萍（化学生物学08级1班，20085849）摘要：本实验采用约0.1mol/L的NaOH标准溶液滴定法和乙酰丙酮甲醛分光光度法分别对白醋的总酸量和氨基酸含量（氮）进行分析测定。通过NaOH标准溶液滴定得*牌白醋得其酸含量为0.1415 mol/L，四次平行测定的相对平均偏差为0.02%，相对标准偏差为0.006%，再经乙酰丙酮甲醛分光光度法测得食用白醋中氨基酸含量为。的到了较为满意的结果。根据实验结果，可对食用白醋的质量和作用进行初步评判。关键词：白醋；酸量；氨基酸含量；分光光度法In edible white vinegar total acid quantity and amino acid content (nitrogen) analyzesLi Ping (chemical biology 08 levels of 1 class, 20085849)Abstract: This experiment uses approximately the 0.1mol/L NaOH standard solution titrimetric method and the acetylacetone - formaldehyde spectrophotometric method separately (nitrogen) carries on the analysis determination to the white vinegar total acid quantity and the amino acid content.Results in * sign white vinegar its acid content through the NaOH standard solution titrate is 0.1415 mol/L, four parallel determination relatively average deviations are 0.02%, the relatively standard deviation is 0.006%, again passes through the acetylacetone - formaldehyde spectrophotometric method to obtain in the edible white vinegar the amino acid content is.Arrived a more satisfactory result.According to the experimental result, may carries on the preliminary judgment to the edible white vinegar quality and the function.Key words: White vinegar; Sour quantity; Amino acid content; Spectrophotometric method食品工业是人类的生命产业，同时食品也是一种对人类健康有着密切关系的特殊有形产品。其具有独特的特殊性和重要性。食品质量安全关系到人民群众的身体健康，生命安全及社会经济。食品中的各组分和各组分的含量，是衡量食品质量安全的重要指标之一。因此要保证食品安全，首要任务就是测定食品中的各组分和各组分的含量。食用白醋是人们家庭常用的调味品之一，其主要成分除醋酸外，也有较高含量的有机酸和氨基酸，因此有一定的营养价值。除此之外，现代医学认为，食用白醋对治病养生，消除疲劳，调节血液酸碱平衡，帮助消化，抗衰老等方面有作用。此外，过多的食用含酸量高的醋对胃病患者有危害作用。由此看来，白醋的质量安全与人们的日常生活息息相关。因此，测定食用白醋的成分和各自的含量，对评判白醋质量，保证人们身体健康，有很大的参考价值。就目前来看，测定食用醋的总酸量，我们可以用标准NaOH溶液滴定，因为只要Ka10-7的弱酸都可以用NaOH溶液滴定，反应如下：NaOH+ HAc=NaAc+H2OnNaOH+HnA=NanA+nH2O由于是强碱滴定弱酸，滴定突越在碱性范围内，终点的PH值在8.7左右，所以通常选用酚酞作指示剂，从而测得其总酸度。氨基酸态氮亦称氨基氮，氨基酸含有酸性的-COOH基，也含有碱性的-NH2基。它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐，常常不能直接用酸碱标准溶液进行滴定。就目前来看，对其氨基酸含量（氮）的分析，则有较多的方法，如甲醛法、凯式定氮法、分光光度法、氨基酸测定仪等。用吸光度法测氨基酸含氮量的原理： 乙酰丙酮与甲醛的混合试剂在N存在的，能发生显色反应，并且与-氨基酸显色非常灵敏。根据Hantzsch反应原理，认为显色产物为N-取代基2,6-二甲基-3,5-二乙酰基1,4-二氢吡啶羰酸衍生物，反应式如下：相信随着科学技术的发展，将有更多更为方便、快速、准确的测定方法出现。本实验秉着仪器要求低，操作较为简便，实验结果准确度较高的原则，对于食用白醋的总酸量的测定，选用NaOH标准溶液，酚酞做指示剂进行滴定，测定其中醋酸的浓度。对于其中氨基酸总量（氮）的测定，则采用乙酰丙酮甲醛混合液作为氨基酸的衍生物，再采用分光光度法测定食醋中氨基酸态氮的含量。1 实验部分1.1 实验仪器与试剂滴定管（50ml碱式一只）、分析天平、称量瓶、250ml烧杯、玻璃棒、表面皿、250ml锥形瓶6只、20ml，25ml移液管、试剂瓶（带橡胶塞）、量筒、7200型分光光度计NaOH固体（AR）、邻苯二甲酸氢钾固体（AR）、酚酞指示剂、食用白醋（阆州，四川白醋，产地为四川省，南充市）显色剂：取37.5mL37%甲醛和19.5mL乙酰丙酮混合，加水稀释至250mL氨氮标准液：称量已在105下干燥2h的分析纯硫酸铵0.0472g于100mL容量瓶中，混匀，使氨氮浓度为100g/mLPH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液：称取NaAc20.75g溶于水中，加冰醋酸15mL，稀释至250mL1.2 实验方法1.2.1 食用白醋中总酸量的测定1.2.1.1 0.1mol/LNaOH标准溶液的配制 在台秤或分析天平上迅速称取2g NaOH 固体置于烧杯中，立即用500mL水溶解，配制成溶液，贮于具橡皮塞的细口瓶中，充分摇匀，备用。1.2.1.2 NaOH标准溶液的标定 在分析天平上准确称取46份已在105110烘过1h以上的分析纯的邻苯二甲酸氢钾固体，每份0.40.5g，放入250mL锥形瓶中，用2030mL煮沸后刚冷却的水使之溶解（如果没有完全溶解，可稍微加热）。冷却后加入2滴酚酞试剂，用NaOH标准溶液滴定至呈微红色半分钟内不褪，即为终点，记录所用NaOH标准溶液的体积V。平行滴定46次。1.2.1.3 食用白醋的总酸量的测定用移液管移取市售白醋25.00mL，放入250mL容量瓶中，用新鲜刚冷却的去离子水稀释至标线，摇匀。用20mL移液管移取稀释醋样20.00mL，置于250mL锥形瓶中，加水2030mL，再加入1%酚酞指示剂23滴，用0.1mol/LNaOH标准溶液滴定至浅粉色30s不褪色，即为终点。记录所消耗NaOH标准溶液的体积。平行滴定46次。1.2.2 食用白醋中氨基酸含量（氮）的测定1.2.2.1 吸收曲线的制作及测定波长的选择用吸量管吸取0.0和0.5mL氨氮标准液分别注入两个25mL容量瓶中，再各加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它们置于100水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比，在335400nm之间，每隔5nm或10nm测一次吸光度，然后以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制出A-吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。1.2.2.2 标准曲线的绘制取7个25mL的容量瓶，编号。用吸量管分别加入0mL，0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL，0.6mL 100g/mL的氨氮标准液，再分别加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它们都置于100水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比溶液，在所选择的适宜波长下，测定各溶液的吸光度。再以吸光度为纵坐标，氨态氮浓度为横坐标绘制标准曲线。1.2.2.3 食用白醋中氨基酸含量（氮）的分析用吸量管准确吸取5mL待测液于25mL容量瓶中，再加入10.00 PH=4.7的NaAc-HAc缓冲溶液和10.00显色剂，再用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。将它置于100水浴中加热15min后，取出用冷水冷却至室温，移入1cm比色皿中，以试剂空白作为参比溶液，在所选择的适宜波长下，测定其吸光度。由未知液的吸光度在标准曲线上查出5mL未知液中的氮含量。2 实验结果2.1 实验数据记录与处理2.1.1 NaOH标准溶液的标定 准确称取2.0047gNaOH固体，溶于500mL蒸馏水，按要求制成标准溶液。平行滴定次数记录项目1234mKHC8H4O4（g）0.48600.48230.48040.4808VNaOH初(mL)0.000.130.050.00VNaOH末(mL)23.4023.3423.2023.18VNaOH(mL)23.4023.2123.1523.18CNaOH（mol/L）0.10170.10170.10160.1016CNaOH平均（mol/L）0.1017个别测定的偏差0.00000.0000-0.0001-0.0001相对平均偏差0.05%相对标准偏差0.008%2.1.2 食用白醋的总酸量的测定平行滴定次数记录项目1234V白醋稀释液（mL）20.0020.0020.0020.00VNaOH初(mL)0.200.000.000.00VNaOH末(mL)28.8028.6028.6028.60VNaOH(mL)28.6028.6028.6128.60平行滴定次数记录项目1234CHAc（mol/L）0.14540.14540.14550.1454CHAc平均（mol/L）0.1454个别测定的偏差0.00000.00000.00010.0000相对平均偏差0.02%相对标准偏差0.006%白醋原始液中的CHAc（mol/L）0.18182.1.3 吸收曲线的制作及测定波长的选择 本实验的测定条件为： 7200型分光光度计，比色皿厚度为1cm，以试剂空白溶液作参比溶液。入射光波长/nm335340345350355360370380390400溶液吸光度A0.3410.4860.5440.4930.4410.3660.2770.2290.1940.172 根据数据，将其吸收曲线绘制如下：由曲线得知，在345nm处，溶液有最大吸收。图12.1.4 标准曲线的绘制以下实验的测定条件都为：7200型分光光度计，比色皿厚度为1cm测定波长为345nm，以试剂空白溶液作参比溶液。氨氮标准液的浓度（g/mL）10025.00mL容量瓶编号0123456所移取氨氮标准液体积（mL）0.00.10.20.30.40.50.6容量瓶中氨态氮的浓度（g/mL）0.00.40.81.21.62.02.4溶液的吸光度A0.0000.1650.3190.2310.3280.7500.953将数据处理后，绘制出其标准曲线如下图，得其标准曲线方程为：y=0.372x+0.010，R2=0.999图2从以上曲线可知，当吸光度A=0.175时，待测液中氨态氮的浓度为0.444g/mL 。2.2 结果分析与讨论食用白醋中总酸量和氨基酸含量（氮）的测定有很多方法，本实验采用的NaOH标准溶液滴定法和乙酰丙酮甲醛分光光度法分别测定白醋的总酸量和氨基酸含量。此法仪器要求低，操作较为简便，实验结果准确度及灵敏度都较高，各次平行实验的相对平均偏差和相对标准偏差都较小，因此实验结果较为可靠。通过实验得此次实验所用的白醋中醋酸浓度为0.1818mol/L，含量较高，从食品检测方面来说，其酸的纯度较高，但不适用于胃病患者食用。此外，在最佳实验条件下以体系的吸光度对氮量浓度绘制了标准工作曲线，绘制出其标准曲线如下图，得其标准曲线方程为：y=0.372x+0.010，R2=0.999，标准曲线如图2所示。标准曲线的线性关系良好，因此此法能较为准确的测出溶液中氨态氮含量。与标准曲线测定条件相同的情况下，样品的吸光度A=0.175；从而可求得5mL白醋中氨态氮含量为2.22g，含量不是很高，但作为人们家庭常用调味品，仍有一定的营养价值。参考文献1 武汉大学，分析化学，第五版，上册M.高等教育出版社，20062 四川大学工学院，浙江大学化学院，分析化学实验，第三版M，高等教育出版社，2003，p:74-903 王仁国，无机及分析化学实验M，中国农业出版社，2007 4 苗凤琴，于世林，分析化学实验M,化学工业出版社，教材出版中心，2002，p:9