3m测试片操作手册.doc

细菌总数测试片该手册能指导你熟练掌握3MTM Petrifilm Aerobie Count Plants的使用，你可与3M微生物产品代理接洽会得到更多的信息。贮藏1、未开封时，冷藏于8（46），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。2、已开封的，将封口以胶带封紧。3、保存再封的袋于25（77）和温度50，不要冷藏已开启的包装袋，并于一个月内使用完。样品制备4、制备1：10和更大稀释的食物样品稀释液，0称取或吸取食物样品，置入适宜的无菌容器内，如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内.5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水. 不可使用含有枸橼酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液. 因为它们能抑止菌生长。6、搅拌或均质样品。样品的稀释液调PH6.57.2 对酸性样品的稀释液用IN NaOH 对碱性样品用IN HCL调PH接种7、将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜。8、使用吸管将1mL样液垂直滴加在测试片的中央处。9、允许使用上层膜直接落下，切勿向下滚动上层膜。10、使用压板隆起面底朝下，放置在上层膜中央处。11、轻轻的压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，切勿扭转压板。 12、拿起压板，静置至少1分钟以使培养基凝固。培养解释13、测试片的透明面朝上，可堆叠至20片，对有一定湿度养箱能保持最少份损失是需要的。14、可目视及用标准菌落计数器或其它的照明放大镜计数，并可参考判读卡计算菌落数。15、可以分离菌落作进一步鉴定，即掀起上层膜，由培养胶上判读卡Aerobic bacteria count=152测试片中含有一种红色指示染剂可使菌落着色,计算所有红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计算之).Count=0在petrifilm AC测试片上,很容易解释,图2测试片上没有任何菌落生长.Count=16图3示有不多的菌落.Count=143Petrifilm AC测试片菌落数适宜计数范围是25-250,见图4Count=560测试片面积约为20cm2,当菌落数超过250个,如图5所示,为了估计菌落数,可选择其中一个或数个有代表性菌落的小方格(1cm2),计算平均菌落数,再乘以20可得到整个测试片上的菌落数.Count=tntc(estimated count=103)图6所示petrifilm AC测试片上菌落太多而无法计数(tntc)count=tntc(Estimated count=105) 有很多高数量菌落,使整个生长区变粉色,如图7所示,你仅可在生长区边缘现观察到单个菌落,应计录为菌落太多无法计数(TNTC)count=tntc(Estimated count=103)有时菌落分布出现不均衡,如图8所示,这也记录为TNTC.Count=tntc(Estimated count=107)在图9中petrifilm AC测试片上的菌落,最先粗略一看是可计数的,然而,你密切注意到生长区边缘,能看到高密度的菌落,应记录为TNTCEstimated count=160很少数菌种会液化petrifilm AC测试片上的培养基,如图10所示.若有这种现象发生,可选择没有液化区的几个有代表性菌落的小方格(1cm2),计算平均菌落数.不要计数液化区内的红点.Count=83因为在petrifilm AC测试片上菌落是红色的,你会和不透明的不规则形状的事物颗粒区分开,见圆圈1和2.霉菌和酵母菌检验测试片Petrifilm and Mold count MoldTM测试片为预先制备好的培养基系统,它含有一种冷水可溶性的凝胶剂，营养基和一种指示染剂，可提供对比，利于菌落计数。贮藏1、未开封时，冷藏于8（46），并在保存期内用完，高温度时，凝固水可以排除，包装物最好于室温启开。2、已开封的，将封口以胶带封紧。3、保存再封的袋于25（77）和温度104)图6所示在PYM测试片边缘框里光亮区的的小型.兰色菌落同样也分布在整个测试片中(尽管有较小的可见度),这是胶木菌菌落太多无法计数(TNTC)现象.Mold count=59图7所示,在测试片上霉菌菌落出现堆挤和彼此覆盖,为了方便计数,可将测试片分成几个区域,计算每个有明显暗色中心的菌落.所划的方形区内有15个霉菌菌落。Mold count=TNTC 图8a和图8b为同一样品的测试结果.图8a为1:10样品稀释液,菌落小、虚弱暗淡、数量多、计数困难。图8b为1：100样品稀释液，生长菌落数在适宜范围（15-150个）内，很容易计数。Petrifilm and Mold count MoldTM测试片为预先制备好的培养基系统,它含有一种冷水可溶性的凝胶剂，营养基和一种指示染剂，可提供对比，利于菌落计数。磷酸酶反应Yesat and Mold Count=0yesat and Mold Count=0PYM测试片中的磷酸酶指示剂，可与含有磷酸酶的一些生鲜类和加工食品发生颜色反应，有时能见到两种类型的颜色反应：一种为很均匀兰色背景底色见图或很强烈的（明显的），针尖状兰点（见图10的圆圈），通常见於含有香料或颗粒状产品。减少样品本身的磷酸酶所造成的颜色反应可采用下列技术：1.静置沉淀混合样品，静置3-5分钟，吸取样品容器