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基因工程(建议用时:30分钟)1如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。(1)能否利用人的皮肤细胞来完成过程?_,为什么?_。(2)过程必需的酶是_酶,过程必需的酶是_酶。(3)在利用a、b获得c的过程中,必须用_切割a和b,使它们产生_,再加入_,才可形成c。(4)为使过程更易进行,可用_(药剂)处理d。2已知h7n9禽流感是由一种rna病毒感染所引起的疾病。h7n9禽流感病毒表面的外膜血凝素(h)和神经氨酸酶(n),即h7n9是主要的病毒抗原,在sars病人康复后的血清中有抗h7n9的特异性抗体。某研究小组为了研制预防h7n9禽流感病毒的疫苗,开展了前期研究工作,其简要的操作流程如下:(1)实验步骤所代表的反应过程是_。(2)步骤构建重组表达载体a和重组表达载体b必须使用限制性核酸内切酶和_酶,后者的作用是将限制性核酸内切酶切割的_和_连接起来。(3)如果省略步骤而将大量扩增的h7n9基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的h7n9,其原因是h7n9基因在大肠杆菌中不能_,也不能_。(4)为了检验步骤所表达的h7n9是否与病毒h7n9蛋白有相同的免疫反应特性,可用_与_进行抗原抗体特异性反应实验,从而得出结论。(5)步骤和的结果相比,原核细胞表达的h7n9与真核细胞表达的h7n9的氨基酸序列_(相同、不同),根本原因是_。3(2012高考海南卷)已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产,乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此,可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内,使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题:(1)为了获得丙种蛋白质的基因,在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上,推测出丙种蛋白质的_序列,据此可利用_方法合成目的基因。获得丙种蛋白质的基因还可用_、_方法。(2)在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中,常需使用_酶和_酶。(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共同培养,筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织,由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗_的危害。(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则该植株的种子_(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。4(2014陕西渭南质检)干扰素是用于治疗病毒感染的一种糖蛋白,传统的生产方法是从人血液中的白细胞内提取,现在可以通过基因工程大量获得。请回答相关问题。(1)已知干扰素的氨基酸序列,则获取目的基因的较简单方法是人工合成法,合成后的目的基因可以用_技术扩增。(2)基因表达载体除含有干扰素基因外,还必须有标记基因、启动子和_等。(3)如果受体细胞为动物的受精卵,则将基因表达载体导入受体细胞的常用方法是_。(4)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞_上是否插入目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键,检测的方法是dna分子杂交技术。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质,利用的技术是_。答案与解析1解析:(1)图中过程是从细胞中获取相应的mrna,由于基因的选择性表达,人的皮肤细胞中的胰岛素基因不表达、不转录,因此不能形成胰岛素mrna。(2)从mrnadna是逆转录的过程,需要逆转录酶。dna分子的扩增,双链dna解旋为单链用解旋酶。(3)构建基因表达载体时需将目的基因与载体用同一种限制性核酸内切酶切割,产生相同的黏性末端,才可以在dna连接酶的作用下连接形成基因表达载体。(4)将目的基因导入细菌,常用ca2处理细菌,使其变为感受态细菌,可吸收含目的基因的载体。答案:(1)不能皮肤细胞中的胰岛素基因未表达(或未转录),不能形成胰岛素mrna(2)逆转录解旋(3)同一种限制性核酸内切酶相同的黏性末端dna连接酶(4)cacl2(或答ca2)2解析:(1)利用rna获取dna,一般采用逆转录的方法,在这一过程中需要逆转录酶。(2)目的基因与载体结合,先用限制性核酸内切酶在目的基因和载体上切出相同的黏性末端,将目的基因片段插入载体的切口处,再加入适量dna连接酶,将黏性末端连接起来。(3)选择性扩增后得到的含有遗传信息的dna片段(h7n9基因),直接导入大肠杆菌细胞内,在不与其dna整合的情况下,不能进行复制和转录,也得不到相应的蛋白质。(4)由大肠杆菌合成的h7n9在结构和功能上可能会发生变化,可与人体内产生的抗h7n9的抗体进行抗原抗体特异性反应,以此进行检测。(5)各种生物都共用一套遗传密码,因此转入相同的目的基因,表达出的蛋白质一般应相同。答案:(1)逆转录(2)dna连接载体h7n9基因(3)复制合成h7n9基因的mrna(4)大肠杆菌中表达的h7n9h7n9禽流感康复病人血清(5)相同表达蛋白质所用的基因相同3解析:(1)获取目的基因的方法主要有基因文库获取法、pcr技术扩增法和人工化学合成法三种。已知丙种蛋白质氨基酸序列,可通过推测丙种蛋白质的基因序列,然后利用化学方法人工合成丙种蛋白质基因。(2)在构建重组质粒的过程中,需要使用限制性核酸内切酶和dna连接酶。(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共同培养,可筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织,而后培养出含有丙种蛋白质的抗乙种昆虫的植株。(4)若只用重组质粒感染甲种农作物叶片伤口,可在叶片组织中筛选出含丙种蛋白质的细胞,由于该重组质粒感染的是体细胞,故该植株的种子中不含有丙种蛋白质基因。答案:(1)基因化学基因文库pcr(2)限制dna连接(3)乙种昆虫(4)不含4解析:(1)目的基因可以用pcr技术进行扩增。(2)基因表达载体除含有目的基因外,还必须有标记基因、启动子和终止子。(3)如果受体细胞为动物的受精卵,则将目的基因导入受体细胞的常用方法是显微注射法。(4)转基因技术对受体细胞进行分子
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