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验证溶血对血清检测NSE的影响彭静 合肥市第八人民医院 检验科摘要目的：探讨溶血程度对血清检测NSE的影响程度。方法：采用Elecsys 2010电化学发光仪，检测正常人血清标本及不同溶血程度的标本NSE含量。结果：当血清中Hb含量0.685g/L时，就会使血清NSE出现假阳性，每增加1g/L的血红蛋白，就会使NSE含量增加23.764 ug/l。结论：溶血对血清检测NSE存在严重影响，NSE含量随溶血程度的增加而增加，临床检测NSE要杜绝溶血标本。关键词溶血 NSE Hb含量 神经元特异性烯醇化酶(NSE) 为糖酵解关键酶,在临床上应用非常广泛,可作为神经元损伤的标志物 1 ,也可作为肿瘤标志物用于神经母细胞瘤、小细胞肺癌、垂体腺瘤等疾病的诊断2 。由于血小板和红细胞中存在其同工酶，因而标本溶血，红细胞中可释放大量的NSE ,因此溶血可导致结果偏高3，严重影响检测结果的真实性和可靠性。本文重点验证不同溶血标本对NSE检测的影响程度，从而给临床医生很好的判断和依据。1 资料与方法1.1 仪器与试剂 瑞士罗氏公司生产的Elecsys 2010全自动电化学发光分析仪及配套NSE原装试剂，质控液。 瑞典博尔医疗有限公司生产的MEDONIC CA620 全自动血细胞分析仪及配套试剂。1.2 检测对象及方法 抽取正常人（体检各项指标均正常）全血7ml,其中5 ml置于促凝胶管2 ml置于EDTA-K2抗凝管，将促凝胶管于离心机3000r/m离心5分钟，立即分离血清，将血清标本分成10等份，每份200ul,进行编号。 将抗凝全血混匀，用CA620血细胞分析仪，检测其血红蛋白（Hb）含量。 用微量加样器，分别吸取0.1 ul，0.2 ul，0.5 ul，0.8 ul，1.0 ul,1.5 ul，2 ul,5 ul，10 ul抗凝全血，置于2-10号管，混匀。将10个样本置于-20冷冻2小时，使其充分溶血。用Elecsys 2010分析仪检测NSE原装质控，确定其仪器状态是否稳定。将1-10号样本分别置于Elecsys 2010检测NSE含量。 1.3 结果判断NSE原装质控范围9.58-15.60 ug/l ,正常人群参考范围为0.00-16.30 ug/l。2 结果 全血HB含量为145 g/l，NSE原装质控测定值为11.61 ug/l，在控，仪器处于稳定状态。 1-10号血清管HB含量及其测得NSE值见下表 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10加入全血量 0 0.1 0.2 0.5 0.8 1.0 1.5 2.0 5.0 10.0（ul）Hb含量 0 0.076 0.145 0.363 0.580 0.725 1.087 1.450 3.625 7.250（g/l）NSE值 9.81 11.88 13.96 20.60 24.25 29.86 37.06 50.89 92.55 182.10 （ug/l） 3 讨论 烯醇化酶是催化糖原酵途径中甘油分解的最后的酶。由3个独立的基因片段编码3种免疫学性质不同的亚基、，组成5种形式的同工酶、。二聚体是该酶分子的活性形式，亚基同工酶存在于神经元和神经内分泌组织，称为神经元特异性烯醇化酶（NSE）。因为NSE参与了糖酵解，使癌肿组织糖酵解作用增强，细胞增殖周期加快，细胞内的NSE释放进入血液增多，导致此酶在血清内含量增多，小细胞肺癌也是一种分泌NSE的神经内分泌性质的肿瘤。所以，NSE是小细胞肺癌，神经母细胞瘤最敏感、最特异的肿瘤标志物4 .其中，NSE水平升高以小细胞肺癌 (SCLC)最为显著 (86 72 98 2 g L) ,灵敏度为 82 4 % ,特异性为 95 5 % 5。另外，NSE在Whims瘤、乳腺癌、胃癌、淋巴瘤中也可有表达，68.7%的转移性精原细胞瘤患者在行睾丸切除术前血清NSE水平可见升高。所以NSE检测的准确性对临床诊断非常重要。而在红细胞、浆细胞和血小板中也有NSE存在，若静脉穿刺抽血后的60分钟内未进行红细胞分离，那么NSE便会释放到血清中， 或由于抽血不顺利等其他原因造成标本溶血都会对检测结果影响非常大，本试验结果显示，当正常血清NSE为9.81 ug/l，Hb浓度为0.363 g/l时，NSE浓度就会出现假阳性（20.60 ug/l），每增加1g/L的血红蛋白，就会使NSE含量增加23.764 ug/l。按照这个比例，即使正常血清检测值为0，当Hb浓度0.685 g/l，NSE就会出现假阳性（16.3 ug/l）。而含有0.685 g/l的Hb，血清肉眼可见微红色。所以当临床采集标本困难，尤其是采集儿童患者，造成标本溶血，而又必须检测时，临床医生和检验人员可以根据溶血程度来大致判断NSE的真实水平。当然，规范采血、及时分离血清，避免溶血，才能得出准确而可靠的肿瘤指标含量。1 De Giorgio CM.Neurom-specific enolase,marker of acute neuronal injury,is increased in complex partial-status epilepticusJ.Epilepsia,1996,37(7):606-609 2 晏勇，王学峰，陈阳美，等. 癫痫患者血清神经元特异性烯醇酶的测定 J；中华神经科杂志；1999，32（1）：34-36. 3 张亚松;肖登岩;麦富巨. 温度、时间及溶血对全血标本中NSE测定的影响J;医学临床研究；2008，25（7）：1193-11944 Ebraheim NA ,Mekhail AO ,Gargasz SS,et al.Ankle fractures involving the fibula proximal to the