检测工作存在问题及仪器操作注意事项.doc

工作交流：浅谈洛南镇级农残检测工作存在问题及检测工作技巧2011年5月，洛南县农产品质量安全检验检测体系除谢湾、四皓、柏峪寺、高耀、寺耳5个镇以外，其余14个镇农产品质量安全监管站都建立了农残速测室，配备了农残速测仪，陆续开展了农残抽样检测工作，我县镇级农产品质量安全检测体系建设初具雏形、初显成效。但是，经过一年的运行，情况却不是一帆风顺，不尽人意。去年一年，部分镇检测工作不能持续坚持，甚至有个别镇检测室完全停止了农残检测工作。检测室停止了农残检测工作。究其原因，我认为主要有以下三方面：一是镇监管站领导对农产品质量安全工作的重要性认识还不够到位，总认为所管辖的镇出现农产品安全问题的概率微乎其微，存有一定的侥幸心理；二是县级和镇级财政没有拨付专门的检测经费，镇监管站无钱购买检测试剂、抽检样品等；三是镇农技站业务多人员少，没有固定专职的检测人员，检测人员换来换去，从而导致镇检测人员业务不熟，未能真正掌握速测仪操作方法，对农残检测工作有了畏难思想。以上前两方面存在的问题是目前体制和机制造成的问题，是短时间内难以解决的问题。在此，我着重谈一下我对第三方面问题的思考。目前洛南县级和镇级速测室进行的农残速测，是依据酶抑制原理对有机磷和氨基甲酸酯类农药残留进行的定性检测，虽然只是一种技术性不很强的初筛检测，但是在具体的操作中若有些细节注意不好就会经常出现不正常（如假阳性、多个0.1%等）或不正确（不能反映客观真实）的测试结果，如果再去重新检测势必会造成试剂和时间浪费，影响工作信心。据我了解，我县就有个别镇检测室因为这种原因在仅仅做了几次检测后就停止了农残检测工作。自去年5月县检测站检测仪器到位后，我一直在县检测站速测室从事农残检测工作。通过近一年来自己在检测工作实际中的切身体会和思考，我认为要想快速、顺利、准确地完成每一次农残检测也非易事，我认为在农残检测工作中应特别注意做好以下事项：1、正确保存试剂，准确配制试剂，这是保证检测结果正常的前提。由于没有对试剂按要求进行正确的冷藏和冷冻，去年我县个别镇检测室造成随速测仪配备的试剂失效。现在每盒试剂市场售价大约在200-400元（质量差异）左右，因此对于现在还没有冰箱的镇检测室一定要尽可能寻找冰箱并按照保存要求正确保存试剂。未配制的干粉试剂在应-20左右冷冻，已经配制好的液态试剂应在4冷藏，保存时间不能多于一周。在配制试剂时一定要正确使用移液枪，按要求的量（3.1毫升）准确无误的加入蒸馏水和缓冲液。可以按照先底物后酶的顺序配制，这样可以少更换一次移液器的枪头，在使用试剂时切记一定要养成“只出不入”、试剂瓶盖随开随盖的良好习惯。2、更换试剂一定要重做对照检测，确保对照检测值正确，这是保证样品检测正确的关键。农残速测得出的抑制率是和对照检测相比较而得出的一个比较值，如果对照检测值不正确的话，就绝不会得到正确的样品检测抑制率，因而对照检测是非常关键的一步。在样品检测时，如果6个检测通道的样品抑制率同时出现3个或3个以上50%或同时出现2个或2个值为0.1%的情况，都是不正常情况，这时就要考虑所做的对照检测值是不是正确。一般情况下，如果在做对照检测时酶、显色剂、底物三种试剂任何一个加入量过少(或某个试剂失效)，这时得出的这个“对照值”就会小于实际对照值， 6个通道检测出的抑制率就会出现3个或3个以上50%的错误情况；如果在做对照检测时酶、显色剂、底物三种试剂任何一个加入量过多，这时得出的这个对照值就会大于实际对照值， 6个通道检测出的抑制率就会出现2个或2个以上=0.1%的错误情况。根据我的经验，在新手进行农残速测仪操作时，会经常出现以上所述不正常情况。碰到这种情况时，心理上一定不要焦躁，要静下心来先重做一次对照检测再进行样品检测，这样就会得到正确的检测结果。在一批样品检测时，如果工作中间更换了某种试剂，切记一定要重新做一个对照检测，切忌发懒，否则就有可能出现以上所述的不正常情况，或者造成检测结果不准确。3、选择正确取样方法，这对结果起着至关重要的作用。为准确反映样品的农药残留情况，蔬果种类不同取样方法不尽相同。碎样法。这是使用最多的方法，一般称重2g。绿叶类蔬菜一般取叶沿叶尖部切成1cm见方试样，果实类蔬菜及水果类一般取1cm见方外表皮，太大可能会导致提取不完全，太小某些有颜色汁液会影响检测结果；浸提法。大葱、生姜、大蒜、韭菜、香菜、芹菜等蔬菜含有辛辣味或含有对酶有影响物质，速测时出现假阳性的可能性极大，对其进行农残速测取样时不需称重，一般最好采取整株（或整枝）蔬菜浸提；表面测定法。对于紫红茄子、西红柿、红辣椒、青椒、甜椒、丝瓜、萝卜、柑橘等含有天然色素并且多汁的蔬果，为减少色素和汁液的干扰，一般采用表面冲洗法，也不用准确称重。4、把握好3个时间和1个速度，提高检测结果的准确性。速测仪和电子天平必须等开机10分钟后仪器性能稳定时再开始工作；将缓冲液加入测样震荡后不可久置，5分钟左右就要将提取液转移至试管或比色皿。如浸泡时间太长会影响检测结果；在一组测样（一般为6个）加入酶和显色剂后，必须要等10分钟或15分钟反应时间到后再加入底物。切记做对照检测和样品检测时加入酶、显色剂后的显色反应时间一定要一致（10分钟或15分钟）。加入底物后一定要迅速地摇匀、迅速地放入仪器比色池中、迅速地点击“样品检测”键进行检测。如比色皿停留过长最后测得的“抑制率”将会比正确值偏高，致使结果不准确。 5、在检测室温度低于20时的冬季，可借助恒温水浴锅进行农残检测保证检测正常开展。去年冬季，我县有个别镇的检测人员打电话反映说他们可能因保存不善造成了试剂失效，检测时做出的对照检测值怎么也不能达到正常范围。其实情况并非如此。根据我的经验，检测实验室进行农残速测工作要求的最佳室温是25-35。当室温低于20时按常规法进行检测，虽然测量得到的对照检测值也许仍在正常范围内（0.2A1）,但这时检测得到的样品检测值不一定能反应农药在测样上的真实残留水平；当室温低于10时还按常规法进行检测，对照检测值就会0.2，样品检测就无法正常进行。所以在实验室温度低于20进行农残检测必须使用水浴锅，要把酶与显色剂在提取液中的10分钟反应过程放在水浴锅内（有试管的条件）或水浴锅上（无试管的条件）进行。具体操作方法是：石门、景村两个重点镇检测室配备了试管及试管架，可以将试管架直接置于保持在30恒温的水浴锅中，再把2.5毫升的农残提取液转移到各个试管内，然后依序加入酶和显色剂进行10分钟的显色