细菌性阴道病快速诊断试剂PPT课件.ppt

细菌性阴道病诊断试剂QuickBacterrialVaginosisDetectionKit,1,.,什么是细菌性阴道病,它指是由于阴道内微生态平衡失调，即阴道内正常菌群(产H2O2的乳酸杆菌)大量减少,其它条件致病厌氧菌（加德纳氏菌、类杆菌、动弯杆菌等）过盛生长所引起的一种无阴道粘膜炎症表现的综合症候群。是妇科最常见的疾病之一.感染率比较高，易复发，对妇女及其妊娠都有危害，在妇科、产科以及施行流产术前进行BV检查意义重大。其临床症状主要表现为异味白带增多，外阴有不适感等，近50%的患者没有明显的症状。如治疗不当，可引起反复发作。,2,细菌性阴道病的发展史,早在上个世纪人们就已经开始注意并研究细菌性阴道病，但在相当长的时间里，人们对其产生是原因尚不清楚，因而称之为”非特异性阴道炎”（NonspecificVaginities）。1955年，Gardner和Dukes医生的研究才把引起细菌性阴道病的原因归结为”阴道嗜血杆菌性阴道炎”。70年代，由多种细菌混合感染引起细菌性阴道病的观点代替了单一微生物感染的观点，而且引起感染的微生物数量是决定症状发展的关键。80年代，对细菌性阴道病的研究越来越深入，并发现细菌性阴道病与早产、炎症、肿瘤等妇产科疾病密切相关。,3,细菌性阴道病的发展史,为求名称统一，1984年的瑞典国际专题会议上正式将其命名为“细菌性阴道病（BV）”,同时,在临床上对细菌性阴道病下了严格的定义.90年代，人们不断寻找并发现了许多与细菌性阴道病相关的指标，特别是发现致病细菌特有的分泌物和代谢产物的活性与细菌性阴道病关系十分密切。随着现代生化技术的发展，人们可以检测到这一类致病细菌的分泌物或代谢物(唾液酸酶)的活性，从而为临床快速诊断细菌性阴道病提供了方便有效的手段。,4,BV的发病机理,细菌性阴道病（BacterialVaginosis，BV）是以阴道菌群失调为特征的，以产H2O2的乳酸杆菌占优势的正常菌群被过渡生长的混合菌取代，而导致的一种无阴道粘膜炎症表现的临床综合征。病原菌主要有：加德纳菌（GV），厌氧菌，莫比伦式（Mobiluncus）菌及支原体，BV已被WHO列为性传播疾病之一，为育龄期妇女常见的阴道感染性疾病，占妇科阴道感染的1/3，有报导其发病率远高于滴虫和霉菌感染1，2。50%患者无症状。作为内源性致病菌，可以引起盆腔炎、宫颈非典型增生、自然流产、胎膜早破、早产、新生儿窘迫、妇产科术后感染等多种并发症3，4，并且与其它性传播疾病如梅毒、HIV等感染相关5，严重危害女性健康。BV发病机理还不十分明确，仍无法肯定引起BV的特异细菌，目前多细菌混合感染观点已代替了单一微生物感染观点。正常菌群(产生H2O2的乳酸杆菌),在生殖道内环境改变(PH4.5,分泌物增多、变稀及有腥味），造成菌群失调即产生H2O2的乳酸杆菌减少，厌氧菌群（加德纳氏菌、类杆菌族、莫比伦式菌等）数量增多。其厌氧菌能产生活性酶增多，比如：粘蛋白水解酶（能分解生殖道中具有保护作用的粘蛋白外壳成分，削弱宫颈防御功能，导致微生物进入宫腔，并引发炎症反应。）、唾液酸酶（能去除组织中接末端的糖链）；这两种酶的作用均可增加细菌在宿主粘膜及组织表面的附着力，从而更容易与宿主上皮细胞结合并侵入，引发细菌性阴道病（BV）。当人体雌激素水平下降，导致阴道上皮萎缩，细胞糖原减少，不利于乳酸杆菌生长。大量使用抗生素或用碱性液体过度冲洗阴道，抑制乳酸杆菌的生长。性乱，性交频繁等导致多种条件致病性厌氧菌大量繁殖，引起阴道微生物生态平衡失调。需氧性乳酸杆菌减少。最终导致细菌性阴道病的发生。,5,“团伙”作乱的阴道病,细菌性阴道病，没有特定的“元凶”，是由各种病原体组织成的“犯罪团伙”作乱所致。这种病以往被称为非特异性阴道炎或细菌性阴道炎。淋病性阴道炎、滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎等，致病“元凶”是特定而单一的-淋球菌、滴虫或念珠菌，所以被称为特异性阴道炎一旦由于某种原因，乳酸杆菌减少，阴道菌丛生态平衡发生紊乱，平时数量不多的加德纳菌、厌氧菌、生殖道支原体等微生物过度繁殖，形成混合感染，就可对妇女的健康构成威胁。检查这一类微生物优势生长特异性代谢产物唾液酸酶是目前国内外最先进和最准确的方法。,6,细菌性阴道病的临床症状,7,阴道生态环境情况比较,8,细菌性阴道病的现状,细菌性阴道病是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病之一。感染率在30-50%，发病率在10-30%，患病人数远远高于阴道滴虫、霉菌等的感染人数，且易复发。另外，约50%的细菌性阴道病患者因无明显临床症状而被贻误诊断和治疗。美国临床研究细菌性阴道病发病率-大学生妇科门诊15%-孕妇门诊10-25%-老年妇女门诊10%-性传播疾病门诊33-37%,9,北大一院妇科门诊对310例人群所做调查,调查对象BV发病率妇科门诊19.7%健康体检6.9%阴道异常排液39.0%,10,北大一院产科对380例孕妇所做检查BV阳性为26例，占6.8%，其中BV合并致病情况：,妊娠合并BV不合并BV-产褥感染14.3%（3/21）2.2%-新生儿感染9.5%（2/21）1.3%-新生儿黄疸23.6%（5/21）5.4%相比均有显著差异,11,常见检查细菌性阴道病的方法,Amsel法(又称传统检查方法)即以下四项中有三项符合方可诊断；1、阴道PH值4.5;2、阴道分泌物增多、变稀呈奶状、有异味；3、胺试验阳性，即在分泌物中加入10%KOH产生鱼腥味；4、阴道分泌物刮片见线索细胞。,方法一:Amsel法,12,常见检查细菌性阴道病的方法,胺试验(检测卡或试纸条)此法仅查了上述(Amsel法金标准法)四项中的一项(即胺试验)，是否确诊BV还需结合其它三项指标。所以检查的依据不够充分,方法学有缺陷,已被淘汰。,方法二:胺试验法,13,常见检查细菌性阴道病的方法,唾液酸酶法机理为：利用微生物独具的特异性酶催化机理，结合发色底物形成的酶快速检测技术已成为微生物快速鉴定发展的主导方向。正常阴道中有少量厌氧菌生长，厌氧菌与需氧菌的比例为1:2-1:5，患BV时厌氧菌与需氧菌的比例为200:1-1000:1，而唾液酸酶的活性与厌氧菌的数量有关。正常人阴道中唾液酸酶活性极低，唾液酸酶法测不出，因此唾液酸酶法测定时不变色；患BV时唾液酸酶活性大大增加，测定时变色。,方法三:唾液酸酶法,14,唾液酸酶法与胺试验法检测BV的比较,15,细菌性阴道病检测的临床意义,在妇科方面：BV是导致霉菌性阴道炎的主要原因。BV与滴虫感染密切相关，80%的滴虫患者同时伴有BV感染。BV是造成输卵管炎、盆腔炎、泌尿系统感染、术后感染的危险因素。BV与不孕症、宫外孕有关。BV与妇科肿瘤有关。-细菌性阴道病患者发生CIN的危险是正常妇女的2倍。-细菌性阴道病患者子宫切除术后残端感染机会为正常妇女3倍。在BV患者中常可检出常见的性病病原体,BV感染与性传播疾病关系密切,BV患者感染HIV危险性是正常人的2倍.,16,细菌性阴道病检测的临床意义,在产科方面：BV是造成早产、胎膜早破、低体重儿的主要原因。BV阳性的妊娠妇女中40-50%易在37周前早产或分娩低出生体重儿，比正常妇女高3-4倍，她们的孩子也因此可能受到直接感染，患新生儿肺炎等，并可能带来各种后遗症。BV是导致羊膜绒毛膜炎、羊水感染、剖腹产术后子宫内膜炎的危险因素。BV患者产后或剖宫产后发生产褥期子宫内膜炎的是正常人群10倍。BV是导致某些妊娠不良和妊辰并发症的危险因素,17,细菌性阴道病检测的临床意义,BV患者=性病高危人群？BV是育龄期妇女最常见的阴道感染性疾病。中国性疾病防治网报道在健康妇女中，BV患病率为18.9%，在性乱人群中为36.7%，在孕妇中患病率为12.5%。BV在性病高危人群更为多见，而且可增加艾滋病、淋病、非淋菌性尿道炎等性病的易感性，值得注意。BV的主要表现为阴道分泌物增多伴有恶臭味，并引起宫颈、子宫体感染及盆腔炎症性疾病（PID）的危险。在妊娠妇女可引起一系列妊娠并发症，如早产及绒毛膜羊膜炎。,18,细菌性阴道病的检测对象,鉴于细菌性阴道病对妇女及其妊娠的危害性，在妇科、产科应列为常规检测，并在计划生育与健康体检中广泛推广。妇科普通门诊病人；阴道分泌物有异常者；不孕症.宫外孕者;输卵管炎.盆腔炎.泌尿系统感染有性病史，久治不愈反复发作的病人；妇科手术之前必须做必要的诊断。产科对有症状的孕妇，应及时诊断；对无症状的孕妇，应在28周前进行筛查。,19,鸿琪BV试剂与传统Amsel方法之比较,传统Amsel方法诊断标准：四项指标至少有三项阳性时诊断为BV1、白带增多和/或白带腥臭。缺点：基本上绝大多数妇女都有这一症状，无科学性与客观性可言，无诊断价值。2、阴道pH4.5。缺点：正常阴道菌群的妇女在用药、阴道灌洗、性交后、月经期也有阴道pH值升高现象，阴道分泌物中混有宫颈黏液也将产生较高的pH值。92%-97%BV患者阴道pH值大于4.5。故以pH值4.5为BV的指标也无客观性。,20,鸿琪BV试剂与传统Amsel方法之比较,传统Amsel方法诊断标准：四项指标至少有三项阳性时诊断为BV3、胺试验阳性（阴道分泌物中加入10%KOH产生鱼腥味）缺点：气味的鉴别因人而异、另外一些与感染无关的因素如近期性交、阴道灌洗、行经或是存在大量子宫颈粘液等同样可以导致阴道分泌物产生异味4、线索细胞阳性,其中线索细胞阳性是必备的条件（且线索细胞在上皮细胞中所占百分比20%）缺点：对于作BV诊断最佳标志的线索细胞的识别则受到显微设备的质量、样本的采集以及操作者的经验等诸多因素的共同影响，主观性强、因而很难对判定结果进行统计和比较。,21,鸿琪BV试剂与胺试剂方法之比较,胺试验(Whiff)法（即在阴道分泌物中加入10%KOH产生鱼腥味）在高pH条件下，容易挥发而产生恶臭的腐氨和尸氨真正原理：氨气体反应结果：1、PH+胺试剂检测BV较之传统的方法更无科学性可言。2、检测原理决定了其可靠性，结果只能是误导了患者与检测单位。,22,鸿琪BV试剂与ELISA方法之比较,1、有研究显示，在应用该方法进行BV诊断与阴道滴虫感染有交叉，在相当比例的阴道滴虫感染者中，脯氨酸氨肽酶检测结果为阳性，其原因在于滴虫是一种能够在厌氧环境中大量繁殖的厌氧性原生物，它有一种能够产生氢的颗粒物质，当滴虫大量存在时，其产生的氢会与阴道中的氧结合生成水，从而加剧阴道中的无氧状况，刺激并加速其他厌氧微生物的生长，导致一些BV的临床表征的出现，其中包括阴道pH升高、分泌物增加并伴以检测BV相关菌群的代谢产物为基础的诊断实验：有异味、厌氧菌数升高以及与相应细菌有关的酶水平的升高等等。由此可见在应用本方法诊断BV时会大量产生假阳性。2、其检测产物之一-naphthylamin有强致癌性。3、该方法相对来说比较费时，一次检测至少需要4小时另外：该方法在结果判定方面虽然是通过颜色进行识别，但颜色往往差别不大，阳性和阴性的区别不易判断。马玉楠国家药品监督管理局审评中心,23,鸿琪BV试剂与其它方法之比较,诊断BV致病菌特异性代谢物-唾液酸酶唾液酸酶是由引起BV的细菌产生的一种特异性代谢产物，非BV妇女阴道分泌物中不显示异常的唾液酸酶活性，唾液酸酶的含量与BV致病菌的数量呈线性关系。本试剂就是根据这一原理，直接定量检测阴道分泌物中蛋白水解酶的含量。结果：敏感性高、特异性强、操作简便、结果快速准确。10分钟内检测完成。,24,鸿琪BV试剂与唾液酸酶方法之比较,阴道分泌物中唾液酸酶活性与BV之间存在一定的量的关系，无BV的妇女则不显示异常的唾液酸酶活性。检测唾液酸酶的方法有若干种，但由于技术和成本等原因未能在临床得到普及。90年代，美国公司开发出一种快速诊断试剂盒，用于判定BV治疗用药的临床诊断。该方法利用阴道分泌物进行简便操作，在10min之内即可得出明确结果。试剂盒中包含一种遇蛋白水解酶产生颜色反应的结合物，该水解酶是BV的特异性指征。将患者的阴道分泌物样本放入装有具有颜色反应活性的结合物的玻璃管中，于37保温10min，加入显色液，由颜色判定结果，黄色，绿色表示结果为阴性，蓝色表示结果为阳性，颜色变化的不同，反映了唾液酸酶活性升高的不同程度。这一成果大大提高了BV的诊断水平。,25,细菌性阴道病(BV)诊断试技术分析表,26,与进口唾液酸酶方法之比较,进口唾液酸酶试剂：诊断BV致病菌特异性代谢物-蛋白水解酶成本高，价格为同类国产试剂的3倍，高收费、不利于普及。,27,BV四联的临床意义,BV四联卡主要包括以下内容：1.过氧化氢（H2O2）主要检测阴道的微生态平衡，检测结果为阳性，则阴道微生平衡遭破坏。2.唾液酸苷酶（BV）导致霉菌性阴道炎的主要原因，阴道内优势菌群减少，检测显阳性。3.白细胞酯酶（LE）为阴道炎和宫颈炎的测定指标，检测阴道粘膜损伤程度。4.PH值妇科阴道病评价指标之一，了解阴道生态恢复情况。,28,鸿琪产品优势及先进性,广州鸿琪光学仪器有限公司成立于2005年7月，坐落在风景如画的广州市经济技术开发区科学城广州科技创新基地，由留美归来的生物医学专家陈为群博士与公司总经理罗琪先生共同发起创立，公司的目标是用五年的时间成为国内体外诊断及医疗检验设备行业的领先企业。目前公司已成功研发并生产出：细胞性阴道病快速诊断试剂盒（BV）.液基细胞学薄层涂片系统及耗材（HQTCT）及沙眼衣原体金标检测试剂盒（CT）等产品，是为专业的妇科体外诊断试剂生产企业。公司以生产高品质高技术含量的医学产品服务大众为己任，通过高标准的技术设计.严格的生产工艺控制流程确保产品质量；利用灵活多变的市场宣传推广策略.规范的市场管理及优质高效的售后服务体系迅速占领市场，为国家健康产业的发展贡献自己的力量。鸿琪TM细菌性阴道病快速诊断试剂盒采用的是目前国内最先进的BV特异性代谢产物检测方法-唾液酸酶法，经过长期大量的临床实验显示由于其产品设计的先进性和产品质量的稳定性，鸿琪TM细菌性阴道病快速诊断试剂盒的敏感性与特异性大大优于国内同类产品，检测结果快速准确稳定，易于观察判断，品质与进口产品相仿，但价格仅为进口产品的1/3，因此具有极强的产品优势与市场竞争力。,29,市场规范,广州鸿琪光学仪器有限公司作为一家规范化经营的专业体外诊断试剂生产企业，非常重视市场的培育和保护。公司要求各地的合作伙伴守法诚信经销本公司产品，并将派出专业的市场人员指导与配合各代理商或经销商开展各项市场推广活动。公司对各地的代理商及经销商有如下要求：1.具有医疗器械经营许可证,一.二类检验仪器及试剂项目批准.2.具有一定有经济实力,在区域内有较强有销售网络和客户基础,熟悉医院检验科与妇科产品.3.在本公司的统一指导下开展销售及推广活动,不向客户传递不实的产品信息.4.积极参与区域内临检及妇科方面的各种学术活动,本公司将提供相应的技术.人员支持.5.以合理的销售价格向终端客户或下级经销商提供本公司产品,不得以低于公司最低市场限价倾销产品,或以高于公司最高市场限价牟取暴利.6.在经营的过程中遵守国家及地方的有关法律法规.7.不得在公司授权区域以外的地区擅自销售本公司产品,一经查实公司保留经济处罚.取消代理或经销资格及法律诉讼的权力.,30,售后服务,鸿琪TM产品的售后服务是本公司产品价值的延伸,公司将本着这一原则向代理商.经销商及终端客户提供优质高效的售后服务.公司设立了售后服务部,配备专人负责与本公司产品相关的售后服务工作.本公司提供的售后服务主要包括如下内容:1.以快捷便利的方式向各代理商或经销商提供优质充足的货源供应.2.规范市场运作,保护各代理商.经销商及终端客户的利益.3.向代理商.经销商(不包括二级经销商)提供完整的产品宣传资料.报价单,相关的临床文献及一定数量的产品样品,对相关的销售人员进行系统的产品知识与业务培训.4.配合各代理商.经销商做好区域内的学术宣传.专家网络建设及招投标工作.5.对可能出现的产品质量.包装等方面的问题第一时间做出反应,及时更换质优的产品.6.设立专线电话受理客户质询及投诉,并及时将具体的反馈意见告知有关人员.7.对代理商.经销商及终端客户提出的关于产品好的意见.建议一经采纳将对相关人员给予奖励.,31,北京大学第一医院妇产科感染专业组介绍,主要成员：董悦、廖秦平、杨慧霞、刘朝晖妇产科感染性疾病是女性的常见疾病，是门诊就诊病人最多的一类疾病。目前在我国对此类疾病普遍重视不够，北大一院妇产科以董悦教授为首的感染专业组一直在妇产科感染性疾病的研究方面进行着不懈的努力，力求解决妇女最常见的妇科疾患。感染专业组早在十余年前，就针对细菌性阴道病（BV）、外阴阴道念珠菌病（VVC）、宫内感染、感染性早产等疾病做了深入的研究。特别是认识到细菌性阴道病（BV）与多种妇产科手术后感染、盆腔炎、早产等有关，特别是通过筛查BV预测早产，通过治疗BV可降低早产发生率。所发表的对细菌性阴道病的诊断研究明显早于国内的同类研究，甚至在我们的研究报告发表后45年时，在国外仍有类似研究报道。,32,细菌性阴道病和胎膜早破的关系探讨作者单位:150076黑龙江省哈尔滨市红十字中心医院妇产科【文献标识码】B【文章编号】1684-2030（2004）06-0537-02,胎膜早破和早产是新生儿致病率和病死率最主要和最常见的原因。近年的研究认为孕期感染与胎膜早破和早产密切相关。细菌性阴道病（bacterialvaginasis，BV）是妇女常见的疾病，发病率10%50%，其感染远高于阴道滴虫和霉菌感染，而且发病率不断上升，并与许多妊娠不良后果或妊娠并发症有关。BV检测结果表明，156例胎膜早破孕妇中57例BV检测呈阳性，占36.5%，120例足月妊娠孕妇中13例BV阳性，占10.9%，两者差异有显著性（P0.05）采用唾液酸酶活性诊断BV，具有较高的灵敏性和特异性。Wiggins等5报道，采用阴道分泌物唾液酸酶活性检测BV，其灵敏度和特异性分别达95.6%和96.3%。由于感染BV后，细菌对宿主粘膜和组织进行附着、侵入和损伤，易造成蜕膜炎、绒毛膜和羊膜炎，使胎膜脆性增加。除妊娠期无症状宫内感染的危险性增加外，阴道内细菌厌氧菌产生大量降解产物，其终末产物前列腺素F2和E2，可刺激子宫收缩，以致易于发生胎膜早破。同时阴道内细菌产生脂酶和蛋白酶，消化胎膜的脂质和蛋白质成分，亦可使胎膜变薄变脆而导致胎膜早破。甲硝唑对胎儿是否致畸，尚无定论，但经临床研究表明，克林霉素用于治疗妊娠合并细菌性阴道病是安全有效的。妊娠期细菌性阴道病可使胎膜早破、早产、低出生体重儿和围产儿死亡的危险性增加，应引起重视。建议在妊娠早期对BV进行普查和治疗，有助于减少胎膜早破和早产的发生，对于提高产科质量、降低围产儿死亡率有重要意义。,33,细菌性阴道病及其实验室检查关键词细菌性阴道病阴道加德纳菌蛋白水解酶唾液酸酶实验室检查崔岚300074天津市妇女儿童保健中心(全国妇女儿童保健重点实验中心）中华现代临床医学杂志2004年7月第2卷,由于细菌性阴道病感染与传播和性活动有关，故此将细菌性阴道病列入第三代性传播疾病。随着性病病原体感染谱的变化，其发病率有逐年增高的趋势。由于BV是阴道中乳酸杆菌与其它多种菌群间的平衡失调所致，BV发病是混合感染。因此，对单一种类细菌的分离培养在BV的诊断中意义不大，必须同时结合临床表现方能做出判断。在一些与BV密切相关的细菌的培养试验中，不是特异性差，就是敏感性不好。阴道分泌物中唾液酸酶活性与BV之间存在一定的量的关系。用此方法测定诊断BV，操作简便，出结果快，阳性标准准确，适用于临床。,34,充分认识RTI防治与实现计划生育目标、任务的关系中国计划生育学杂志2002年第九期总第83期(530-531页)杨立舫-国家计生委/福特基金RTI防治项目负责人,生殖道感染(ReproductiveTractInfection,RTI)综合防治示范工程系国家计生委正在组织实施的“三大工程”的一项重要工程。常见RTI：20世纪90年代的资料以及近两年来北京、江苏防治项目(工程)提供的结果均表明：细菌性阴道病，滴虫性阴道炎、念珠菌阴道炎、宫颈炎等常见RTI的患病率高达50%左右。即两名妇女中就有一人不同程度有常见RTI。RTI影响和危害人的身心健康乃至生命；增加异常妊娠、盆腔炎等发生率；影响人口素质；增加HIV感染发生的危险。细菌性阴道病感染HIV危险性是正常人的2倍。RTI尤其是上生殖道感染的不良后果之一是导致不孕症的发生。为患不孕症的夫妇提供帮助与服务，是计划生育重要任务之一。,35,细菌性阴道病与常见性病病原体相关性叶千红尚红陈昕侯香圃张淑兰：中国医科大学第一临床学院检验科；中国医科大学第二临床学院妇产科,探讨人型支原体（MH）、沙眼衣原体（CT）、淋病奈瑟氏菌（NG）、念珠菌（CD）、阴道毛滴虫（TV）与细菌性阴道病（BV）的相关性。BV系由多种微生物所致的阴道粘膜无炎症表现的综合症。BV是育龄妇女最常见的疾病之一。因其感染率高，可以引起众多的并发症，如早产、绒毛羊膜炎、产后子宫内膜炎、新生儿低体重，宫颈癌及盆腔炎等。在BV者中常可检出常见的性病病原体。BV与性传播性疾病关系密切，应引起重视。,36,细菌性阴道病及其诊断马玉楠国家药品监督管理局药品审评中心中华检验医学杂志2000年第23卷第5期,在BV的诊断方面，临床上最为普遍采用的方法有传统的Amsel方法，然而要在实际中准确实施并非易事。首先，一些与感染无关的因素如近期性交、阴道灌洗、行经或是存在大量子宫颈粘液等同样可以导致阴道pH值升高，或使分泌产生异味；胺试验中对气味的鉴别因人而异；而对于作BV诊断最佳标志的线索细胞的识别则受到显微设备的质量、样本的采集以及操作者的经验等诸多因素的共同影响，主观性强，因而很难对判定结果进行统计和比较。阴道分泌物培养：由于BV是阴道中乳酸杆菌与其他多种菌群间的平衡失调所致，BV发病是混合感染，因此对单一种类细菌的分离培养在BV的诊断中意义不大，必须同时结合临床表现方能作出判断。