芳酸类药物的分析.ppt

第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析TheAnalysisofAromaticAcids,第一节典型药物的结构与性质,一.结构特点根据结构分为:水杨酸类邻氨基苯甲(乙)酸类芳基丙酸类吲哚乙酸类苯并噻嗪甲酸类其它非甾体抗炎药物,水杨酸类代表药物,阿斯匹林aspirin,水杨酸(钠）Salicylicacid,对氨基水杨酸（钠）Sodiumaminoslicylate,贝诺酯benorilate,二氟尼柳diflunisal,邻氨基苯甲(乙)酸类,甲芬那酸Mefenamiacid,双氯芬酸钠Diclofenacsodium,芳基丙酸类,布洛芬ibuprofen,其它非甾体抗炎药物,对乙酰氨基酚paracetamol,二.主要理化性质,1.固体,具有一定的熔点,多数是白色晶体或结晶性粉末.2.酸性:本类药物多数具有游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强度的酸或弱酸；X、NO2等吸电子取代基存在使酸性增强；CH3、NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱,可以与碱成盐.,3.芳酸酯可水解;溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。4.UV:具有苯环;IR5.基团和元素:如羟基,羰基,硫元素等.,一、与FeCl3呈色反应,紫堇色,第二节鉴别(Identification),+,+,适于含酚OH或者潜在OH的药物鉴别苯甲酸的碱性或中性溶液与三氯化铁试液生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。,二.缩合反应,酮洛芬与羰基试剂反应生成腙.,三、重氮化-偶合反应对氨基水杨酸钠,对乙酰氨基酚具有芳伯氨基结构，在盐酸酸性溶液中，与亚硝酸钠试液发生重氮化反应，生成重氮盐，与碱性萘酚偶合产生橙红色沉淀。,四.氧化反应,甲芬那酸溶解,深蓝色.,H2SO4,K2Cr2O7,CHCl3,254nm绿色荧光,H+/,五、水解反应,六.特殊元素反应双氯芬酸钠:加NaOH1粒,加热,滤液显氯化物鉴别反应.美洛昔康:加NaOH1粒,加热,加醋酸铅生产硫化铅黑色沉淀;加HNO3数滴,加HCl成酸性,加BaCl2BaSO4.,七、紫外和红外光谱法贝诺酯:无水EtOH7.5g/mL,240nm测定A,E应为730-760.对氨基水杨酸钠:10g/mL,265nm和299nm测定A,A265/A299应在1.50-1.56间.布洛芬：max在265nm和273nm，min在245nm和271nm，在259nm有一个肩峰红外光谱法:与对照谱图对照(ChP).,八.色谱法,1.TLC：Rf值2.HPLC：tR值,第三节特殊杂质检查,一、阿斯匹林中的杂质检查,来源：生产过程中乙酰化不完全或贮藏过程中水解产生。,1、游离水杨酸,方法：比色法(ChP2005)阿斯匹林无酚羟基，不与高铁FeNH4(SO4)2反应。水扬酸有酚羟基，与高铁反应生成紫堇色.ChP2010用HPLC外标法,条件同含量测定，检测波长303nm。含量测定则是276nm限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：3.0%,2.有关物质,ChP2005检查溶液澄清度;ChP2010用HPLC检查除水杨酸外的其他有关杂质.方法:主成分自身对照法,供试品(10mg/ml)色谱图中除水杨酸外的其他杂质峰面积的和不得大于对照液(50g/ml)的主峰面积.,二.甲芬那酸中2.3二甲基苯胺检查,GC(2010):对照品对照法,毛细柱,Detector:FID.,三.二氟尼柳中有关物质检查,有关物质A:TLC:硅胶GF254高低浓度对比法,C1:10mg/ml,C2:0.05mg/ml,各点样5l,254nm下检视.所得杂质斑点与的主斑点比较，不得更深。有关物质B:HPLC主成分自身对照法,同上二个溶液进样各5l(2010);20l(2005),如有杂质峰不得超过的主峰面积.,对照品对照法,主成分自身对照法,四萘普生中6-甲氧基，2-萘乙酮等有关物质检查HPLC：对照品法检查6-甲氧基，2-萘乙酮；高低浓度对比法检查有关物质,五.对乙酰氨基酚中对氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查,1.对氨基酚及有关物质ChP2005用比色法检查对氨基酚.ChP2010用HPLC检查:对照品对照法检查对氨基酚(0.005%),高低浓度对比法检查其他有关物质.,2.对氯苯乙酰胺ChP2005用TLC检查.ChP2010用HPLC检查:对照品对照法检查(0.005%).,副反应,第四节含量测定,一、酸碱滴定法,(一)直接滴定法,原理：阿司匹林具有游离羧基，有酸性，以标准碱滴定液直接滴定。,方法:取本品0.4g,精密称定,加中性乙醇(对酚酞指示液显中性,目的：扣除乙醇中酸的影响)20ml,溶解后,加酚酞指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定.每1mL的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。,中性乙醇：易溶解供试品防止酯水解,含量%=,VFT,W1000,100,(二)剩余滴定法,(三).水解后剩余滴定法原理:阿斯匹林酯结构在碱性溶液中易水解,加入定量过量的氢氧化钠滴定液,加热使酯水解,剩余的碱用酸回滴.USP（32）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）或0.25mol/L的硫酸滴定液相当于45.04mg的C9H8O4。,2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2OASA与H2SO4的反应摩尔比为11,剩余滴定：,水解：,含量%=,(V0-V)FTW103,100,(四)两步滴定法（ChP2005)适用于阿斯匹林片剂片剂稳定剂:酒石酸或枸橼酸分解产物:水杨酸和醋酸第一步:中和,第二步:水解和测定,ASA与H2SO4的反应摩尔比为21本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色;再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,(五)非水溶液滴定法吡罗昔康有吡啶环,可以用非水碱量法测定.,二、紫外分光光度法,1.直接紫外分光光度法UV比较法(片剂)含量%=Cr100%UV/E值法(片剂)标示量%=100%,AxDWArWS标,ADW100WS标,酚磺乙胺注射液ChP（2010）精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（）为159计算含量。,注射液含量测定结果的计算,紫外分光光度法之吸收系数法,丙磺舒片:取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9100）4m1，置70水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算。,片剂含量测定结果的计算,2.柱分配色谱紫外分光光度法USP（32）阿司匹林胶囊:可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量,对照液15g/ml,A供不得大于A对.,（2）ASA含量测定固定相：硅藻土3g，新制NaHCO3（112）2ml；冰醋酸/CHCl3洗脱，280nm测定对照液50g/ml,样品中ASA含量(mg)=,CsAxDAs,三、HPLC阿司匹林栓剂外标法ChP（2010）系统适用性试验:n不得低于3000,R应符合规定,标示量%=,CxDW,WS标,100%,D=50100/5,Cx=CsAx/As,第五节体内药物分析,一.血浆中ASA和SA的HPLC-MS测定1.RP-HPLC2.MS:电喷雾离子源.3.标样和质控样品.4.样品处理(去蛋白).5.线性范围.6.日内,日间精密度;准确度.,二.血浆中布洛芬的HPLC测定与立体选择性代谢研究,1.内标法(对溴苯甲酸)2.以对照品浓度为横坐标,以H标/H