高三生物一轮复习 微生物的实验室培养课件.ppt

,基础知识填空与背记,一、培养基1.按物理性质分：_培养基与_培养基。通常在后者中加入了_作为凝固剂(44以下凝固)。1琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。2,基础知识填空与背记,一、培养基1.按物理性质分：_培养基与_培养基。通常在后者中加入了_作为凝固剂(44以下凝固)。1琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。2,液体,固体,琼脂,2.成分：一般都含有水、无机盐、_、_。此外，还需满足微生物生长对_、_以及_的要求。例如：培养乳酸杆菌，添加在培养基中添加_；培养霉菌，需将培养基的pH调至_；培养细菌，需将培养基的pH调至_；养厌氧微生物，需提供_条件。3从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？,2.成分：一般都含有水、无机盐、_、_。此外，还需满足微生物生长对_、_以及_的要求。例如：培养乳酸杆菌，添加在培养基中添加_；培养霉菌，需将培养基的pH调至_；培养细菌，需将培养基的pH调至_；养厌氧微生物，需提供_条件。3从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？,碳源,氮源,pH,特殊营养物质,氧气,维生素,酸性,中性或微碱性,无氧,2.成分：一般都含有水、无机盐、_、_。此外，还需满足微生物生长对_、_以及_的要求。例如：培养乳酸杆菌，添加在培养基中添加_；培养霉菌，需将培养基的pH调至_；培养细菌，需将培养基的pH调至_；养厌氧微生物，需提供_条件。3从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、是构成细胞的基本元素。,碳源,氮源,pH,特殊营养物质,氧气,维生素,酸性,中性或微碱性,无氧,4(1)碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。(2)氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。,(3)微生物的代谢类型根据能否将CO2合成有机物可分为：自养型生物与异养型生物。,划分依据：自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或唯一碳源，而与氮源无关。自养微生物以CO2或碳酸盐为主要或唯一碳源进行代谢生长；异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。,5特殊营养物质：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子（生长因子），如某些氨基酸、碱基、维生素等。,5特殊营养物质：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子（生长因子），如某些氨基酸、碱基、维生素等。6培养基的配制原则：目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。,二、无菌技术1.消毒：使用较为_的物理或化学方法仅杀死物体_对人体有害的微生物(不包括_)。常用的消毒方法有：_、_、_。2.灭菌：使用_的理化因素杀死物体_的微生物(包括_)。常用的灭菌方法有：_(如接种工具的灭菌)、_(如玻璃器皿的灭菌)、_(如_的灭菌)。,二、无菌技术1.消毒：使用较为_的物理或化学方法仅杀死物体_对人体有害的微生物(不包括_)。常用的消毒方法有：_、_、_。2.灭菌：使用_的理化因素杀死物体_的微生物(包括_)。常用的灭菌方法有：_(如接种工具的灭菌)、_(如玻璃器皿的灭菌)、_(如_的灭菌)。,温和,表面和内部一部分,芽孢和孢子,煮沸消毒法,巴氏消毒法,化学,药物消毒法(如酒精、氯气),二、无菌技术1.消毒：使用较为_的物理或化学方法仅杀死物体_对人体有害的微生物(不包括_)。常用的消毒方法有：_、_、_。2.灭菌：使用_的理化因素杀死物体_的微生物(包括_)。常用的灭菌方法有：_(如接种工具的灭菌)、_(如玻璃器皿的灭菌)、_(如_的灭菌)。,温和,表面和内部一部分,芽孢和孢子,煮沸消毒法,巴氏消毒法,化学,药物消毒法(如酒精、氯气),强烈,内外所有,芽孢和孢子,灼烧灭菌,干热灭菌,培养基,高压蒸汽灭菌,7比较消毒和灭菌,7比较消毒和灭菌,8芽孢和孢子某些细菌（芽孢杆菌，梭状芽孢杆菌，少数球菌等）在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量低，抗逆性强的休眠体构造，称为芽孢。恶劣环境下，一个细菌产生一个芽孢，条件适宜时重新成为一个细菌，数量没有增加，因此芽孢不是细菌的繁殖体，是休眠体。脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的_。它是_或_的产物；多数为_，少数为_。,7比较消毒和灭菌,8芽孢和孢子某些细菌（芽孢杆菌，梭状芽孢杆菌，少数球菌等）在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量低，抗逆性强的休眠体构造，称为芽孢。恶劣环境下，一个细菌产生一个芽孢，条件适宜时重新成为一个细菌，数量没有增加，因此芽孢不是细菌的繁殖体，是休眠体。脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的_。它是_或_的产物；多数为_，少数为_。,生殖,细胞,有丝分裂,减数分裂,单倍体,二倍体,9高压蒸气灭菌的原理，是利用一定压力提高水的沸点，使温度超过100，形成高压高温水蒸汽，迅速穿透细菌细胞壁而使细菌的蛋白质变性以达到灭菌的目的。在使用高压蒸气灭菌时，灭菌锅内的冷空气的排出是否完全，极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以当水蒸气中含有空气时，含空气蒸气的温度低于饱和水蒸气的温度。,3.获得纯净培养物的关键是_。主要有下几个方面：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和_。(2)将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行_。(3)实验操作应在_进行。(4)实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,3.获得纯净培养物的关键是_。主要有下几个方面：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和_。(2)将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行_。(3)实验操作应在_进行。(4)实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,防止外来杂,菌的入侵,消毒,灭菌,酒精灯火焰附近,实验操作大肠杆菌的纯化培养,一、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为_和_两个阶段。1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化_2.纯化大肠杆菌接种：微生物最常用的接种方法是：_、_。培养：将接种后的培养基和一个_的培养基（对照）都放入_恒温箱中培养。鉴别：采用_培养基培养，大肠杆菌的菌落呈现_色。（P26）,实验操作大肠杆菌的纯化培养,一、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为_和_两个阶段。1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化_2.纯化大肠杆菌接种：微生物最常用的接种方法是：_、_。培养：将接种后的培养基和一个_的培养基（对照）都放入_恒温箱中培养。鉴别：采用_培养基培养，大肠杆菌的菌落呈现_色。（P26）,制备培养基,纯化大肠杆菌,实验操作大肠杆菌的纯化培养,一、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为_和_两个阶段。1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化_2.纯化大肠杆菌接种：微生物最常用的接种方法是：_、_。培养：将接种后的培养基和一个_的培养基（对照）都放入_恒温箱中培养。鉴别：采用_培养基培养，大肠杆菌的菌落呈现_色。（P26）,制备培养基,纯化大肠杆菌,灭菌,倒平板,实验操作大肠杆菌的纯化培养,一、用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为_和_两个阶段。1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量溶化_2.纯化大肠杆菌接种：微生物最常用的接种方法是：_、_。培养：将接种后的培养基和一个_的培养基（对照）都放入_恒温箱中培养。鉴别：采用_培养基培养，大肠杆菌的菌落呈现_色。（P26）,制备培养基,纯化大肠杆菌,灭菌,倒平板,平板划线,法,稀释涂布平板法,未接种,37,伊红美蓝,黑,1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，若需要调pH，则应该在_之后，_之前。2.倒平板时，温度一般在50左右。平板冷凝后，要_（利于水分挥发，也可防止培养皿盖上的冷凝的水珠落入培养皿）。,二、相关操作提示,1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，若需要调pH，则应该在_之后，_之前。2.倒平板时，温度一般在50左右。平板冷凝后，要_（利于水分挥发，也可防止培养皿盖上的冷凝的水珠落入培养皿）。,二、相关操作提示,溶化,灭菌,1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，若需要调pH，则应该在_之后，_之前。2.倒平板时，温度一般在50左右。平板冷凝后，要_（利于水分挥发，也可防止培养皿盖上的冷凝的水珠落入培养皿）。,二、相关操作提示,溶化,灭菌,倒置,3.在下图所示培养皿中完成平板划线操作：(1)每一次划线_都要对接种环进行_灭菌(2)灼烧接种环后，要冷却才能伸入菌种中以免_，划线时最后区域不要与_相连。(3)在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是_。,3.在下图所示培养皿中完成平板划线操作：(1)每一次划线_都要对接种环进行_灭菌(2)灼烧接种环后，要冷却才能伸入菌种中以免_，划线时最后区域不要与_相连。(3)在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是_。,前、后,灼烧,杀死菌种,第一区域,获得由1个细胞繁殖形成的菌落,4.稀释涂布平板法：将菌液进行一系列_，并将_菌液分别涂布到_培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的_。,操作中试管口和移液管应在离火焰12cm处。移液管需要经过灭菌，整个操作过程中使用1支移液管。,4.稀释涂布平板法：将菌液进行一系列_，并将_菌液分别涂布到_培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的_。,操作中试管口和移液管应在离火焰12cm处。移液管需要经过灭菌，整个操作过程中使用1支移液管。,梯度稀释,不同稀释度,琼脂固体,菌落,5.菌种的保藏临时保藏：将菌种接种到试管的_培养基上，_冰箱中保藏。以后每3-6个月，重新将菌种转移到新鲜的培养基上。长期保存：采用_的方法，放在_的冷冻箱中保存。,5.菌种的保藏临时保藏：将菌种接种到试管的_培养基上，_冰箱中保藏。以后每3-6个月，重新将菌种转移到新鲜的培养基上。长期保存：采用_的方法，放在_的冷冻箱中保存。,4,斜面,甘油管藏,-20,教材问题集锦,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.对下列材料或用具选用合适的消毒或灭菌方法:(1)培养细菌用的培养基与培养皿_；(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管_；(3)实验操作者的双手_。,教材问题集锦,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？防止感染实验操作者2.对下列材料或用具选用合适的消毒或灭菌方法:(1)培养细菌用的培养基与培养皿_；(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管_；(3)实验操作者的双手_。,教材问题集锦,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？防止感染实验操作者2.对下列材料或用具选用合适的消毒或灭菌方法:(1)培养细菌用的培养基与培养皿_；(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管_；(3)实验操作者的双手_。,培养基用,玻棒、试管、烧,酒精擦拭双手消毒,高压蒸汽灭菌、培养皿高压蒸汽灭菌或干热灭菌,瓶用高压蒸汽灭菌或干热灭菌，吸管高压蒸汽灭菌,3.未接种的培养基经恒温培养表面出现菌落生长，说明什么？4.如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，试分析可能原因。,3.未接种的培养基经恒温培养表面出现菌落生长，说明什么？培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。4.如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，试分析可能原因。,3.未接种的培养基经恒温培养表面出现菌落生长，说明什么？培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。4.如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，试分析可能原因。培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。,3.未接种的培养基经恒温培养表面出现菌落生长，说明什么？培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。4.如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，试分析可能原因。培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。10在牛肉膏蛋白胨培养基上，大肠杆菌菌落呈_色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。这些特征是菌落鉴定的重要依据。,3.未接种的培养基经恒温培养表面出现菌落生长，说明什么？培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。4.如果你在培养基上观察到了不同形态的菌落，试分析可能原因。培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。10在牛肉膏蛋白胨培养基上，大肠杆菌菌落呈_色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。这些特征是菌落鉴定的重要依据。,白,高考试题集训,1.（2010全国卷）回答下列与微生物培养有关的问题：某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_培养基。按照化学成分分类，该培养基属于_培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于_。,高考试题集训,1.（2010全国卷）回答下列与微生物培养有关的问题：某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_培养基。按照化学成分分类，该培养基属于_培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于_。,琼脂,葡萄糖,尿素,选择,合成,异养型,2.（2011年新课标卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求试验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。,2.（2011年新课标卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求试验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。,原油,选择,平板划线法,强,干热灭菌法,高压,火焰,稀释涂布平板法,蒸汽灭菌法,3.（2013江苏卷）某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次,3.（2013江苏卷）某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次,4.（2015年江苏卷）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上,4.（2015年江苏卷）做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是()A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上,各地模拟题集训,1.下列操作与消毒灭菌无关的是()A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦试双手B.接种前用火焰灼烧接种针(环)C.培养基在50左右时搁置斜面D.在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作,各地模拟题集训,1.下列操作与消毒灭菌无关的是()A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦试双手B.接种前用火焰灼烧接种针(环)C.培养基在50左右时搁置斜面D.在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作,2.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A一个细菌、液体培养基B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基D许多细菌、固体培养基,2.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A一个细菌、液体培养基B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基D许多细菌、固体培养基,3.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉，分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。,3.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉，分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。,氮