恶性肿瘤生物治疗李玉生.ppt

优秀精品课件文档资料,恶性肿瘤生物治疗的临床应用,李玉升中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院,癌与免疫-1,1943年，GrossL发现一种小鼠，切除皮肤肉瘤后，再次种植原肿瘤不再生长，提示肿瘤抗原刺激宿主可产生免疫反应。70年代，Burnet提出“Immunesurveillanceofcancer”，并用BCG治愈某些肿瘤。近20年来免疫学的主要进展是发现T细胞识别抗原而非抗体，CD8+T细胞含有IL-2受体；动物试验发现向肿瘤细胞内转入IL-4,IL-7,IFN-r,GM-CSF基因可治愈某些免疫原性很弱的肿瘤，这个过程需要共刺激分子B7-1与T细胞表面的CD28相结合。,癌与免疫-2,约10%的肿瘤病人发生迟发行过敏反应；有报告，大肠癌应用自身瘤苗后，40%病人出现迟发性过敏反应，这些病人的肿瘤复发率为61%，对照组复发率87%。,癌生物治疗的基本原理,生物治疗作为癌治疗方法的一种，主要是通过设法刺激机体的免疫防御机制。免疫系统在发育过程中可监视并排除“非己”的分子或病原微生物，而不与自身组织起反应。免疫系统不同于其他大多数组织系统，其细胞之间缺乏固定的联系，而是在循环系统和淋巴系统内外自由循环。免疫反应由淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、嗜碱性细胞、嗜酸性细胞、树突细胞、上皮细胞和体内许多细他细胞参与完成。免疫细胞主要分泌抗体和细胞因子。对抗原抗体反应和作用于免疫系统内外的多种不同靶细胞的细胞因子的深入研究，为癌的免疫治疗提供了新的可能性。,免疫系统有关细胞,发挥免疫功能的主要细胞是淋巴细胞，约占血液白细胞总量的20%，按其发育和功能不同，可分为3个只要类型：B细胞、T细胞和裸细胞。通常用单克隆抗体分析细胞表面分子。不同抗体可检测不同类型白细胞。有些抗原为不同的靶细胞所共有，有些抗原为不同靶细胞所特有。分化群（Clusterofdifferenation,CD)通常用来描述白细胞表面的不同成分。,与肿瘤免疫有关的细胞-1,胸腺来源的淋巴细胞或称T淋巴细胞，都是CD3+细胞，通过T细胞受体（TCR）识别抗原，与免疫球蛋白相似，受体也具有特异性。T细胞又可以分为两大类：能够直接进行细胞杀伤的CD8+细胞毒性T细胞（CTL），与产生细胞因子的CD4+T辅助淋巴细胞（Th）。CD8+T细胞与在细胞表面表达人白细胞抗原（HLA）I类分子的靶细胞相互作用。所有细胞都普遍表达HLAI类分子，是一种由810个氨基酸构成的短肽，由自身蛋白或病毒蛋白降解而来。CD8+T细胞的TCR/CD3复合物特异地识别单肽/HLA复合物，并与一系列复杂的辅助分子祥和作用有关的二级信号一起，通过颗粒胞吐现象激发对细胞的破坏过程，这个过程涉及溶细胞素（cytolyin）即穿孔素（perforin）和颗粒酶（grazmes）（含有丝氨酸-蛋白酶的颗粒）的释放，导致靶细胞调亡。,与肿瘤免疫有关的细胞-2,CD4+T细胞与特异性的抗原提呈细胞（APC）如巨噬细胞、树突状细胞以及表达HLAII类分子的B淋巴细胞相互作用。HLAII类分子是具有1220个氨基酸的长肽，由APC细胞摄取与加工外源性蛋白而来。CD4（+）T细胞的特异性T细胞受体被活化后，细胞就开始产生细胞因子，以增强B细胞抗体的产生、支持T细胞应答及激活其他免疫细胞。基于细胞因子产生的方式和刺激他们的抗原以及它们所支持的免疫应答，T辅助细胞可以进一步分为两个亚类：Th1细胞促进细胞毒性细胞应答、迟发超敏反应以及通过分泌白介素（IL）-2、干扰素（IFN）-r及肿瘤坏死因子（TNF）-b而激活巨噬细胞；Th2细胞支持B细胞应答，并通过分泌IL-4、IL-5、IL-6与IL-10，支持IgG、IgA与IgE的产生。这两个亚类的CD4（+）细胞都产生TNF-a、IL-3和例细胞巨噬细胞及落刺激因子（GM-CSF）。TH1细胞通常接受病毒和细菌等感染因素的刺激。而Th2细胞对过敏源和寄生虫发生反应。,与肿瘤免疫有关的细胞-3,自然杀伤细胞(NK)是一些大颗粒细胞毒性淋巴细胞，与T、B淋巴细胞明显不同。NK细胞参与宿主的第一线防御，是非特异性的，这些细胞是CD3（-）细胞，不表达T细胞受体。NK细胞表达促进细胞粘附和免疫球蛋白受体（FcR）的CD56分子。NK细胞参与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)，NK细胞不是靶细胞特异性的，但是通过目前尚未明确的作用机制，显示靶细胞选择性。NK细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性明显超过对正常细胞的细胞毒性。具有重要作用的免疫细胞还有网状内皮细胞、单核细胞和巨噬细胞。单核细胞长期生存于循环系统，进入组织中后就变成了巨噬细胞。巨噬细胞不仅具有各类生理保护功能，还具有抗原加工和呈递作用，把外周血中的抗原信息带入免疫组织中。,引起细胞破坏的免疫效应机制,抗体与补体结合可导致细胞破坏，或者发挥调理素的作用，促进巨噬细胞的吞噬作用。免疫细胞与靶细胞直接作用可引起靶细胞溶解。CTL(细胞毒T淋巴细胞）从粘附靶细胞到使之开始溶解只需数分钟。NK细胞可溶解某些类型的培养靶细胞，但不能杀灭新鲜的肿瘤细胞，但其作为抗肿瘤效应细胞的生理机制尚不清楚。经IL-2孵育而获得的淋巴细胞称为LAK细胞，可溶解多种恶性细胞，对正常细胞无作用。活化的巨噬细胞可识别、溶解肿瘤细胞。免疫细胞分泌的许多细胞因子可对组织产生毒性作用。,肿瘤免疫细胞,Th细胞通过II类HLA抗原识别，然后分泌各种细胞因子如IFN-r,IL-2;CTL通过I类HLA抗原识别，直接溶解靶细胞，或改变其肽的表达，区别Th与CTL主要为CD4和CD8分子的表达，与I,II类HLA形成的复合物；APCs包括树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞、激活的B细胞；NK细胞在外周血中为淋巴细胞，由Th细胞释放的IL-2活化。,生物治疗在恶性肿瘤治疗中的地位,1.手术治疗仍是当前根治恶性肿瘤最有效、最重要的治疗方法；2.早期诊断率低、根治性切除率低、术后复发转移率高、5年存活率低是我国目前肿瘤治疗的特点；3.即使是早期病变，不少肿瘤仍有较高的转移率（早期胃癌淋巴结转移率3%24.9%;I期恶性黑色素瘤复发转移率11%）；4.放射治疗和化疗对多种晚期恶性肿瘤均有较高的近期有效率,但对存活改善不满意;5.有效的生物治疗联合手术、放疗和化疗可提高部分肿瘤治愈率、延长存活、改善QOL。,恶性肿瘤的生物化学治疗,恶性肿瘤的生物化学治疗是根据不同肿瘤患者的具体情况，有计划、合理地应用生物反应调节剂和抗肿瘤药物，以达到提高治愈率和改善存活的目的。生物反应调节剂对多种肿瘤具有明显的直接或间接的抗肿瘤活性，与多种化疗药物有协同作用或疗效相加作用，二者合用在维持肿瘤患者的长期存活方面具有独到之处。,生物反应调节剂(BRMs)的概念,一种物质要具备以下条件之一就可称为BRMs:1.直接增加机体抗肿瘤作用;如细胞因子等2.通过减少抑制性机制间接增强机体对肿瘤的免疫反应;3.增强机体对细胞毒物质造成损伤的耐受性;4.增强肿瘤细胞的免疫原性,使之对免疫杀伤或细胞毒药物更敏感;5.预防或逆转细胞转化等.(Mitchell.1998),生物反应调节剂的种类,1.细胞因子:IL-2,IFNs,TNF,CSF等；2.抗肿瘤细胞和造血干细胞：LAK细胞，TIL细胞，TAK细胞，骨髓干细胞，外周血和脐带血干细胞；3.抗体:抗肿瘤单抗,抗细胞表面标记抗体;4.基因治疗;5.肿瘤疫苗;6.抗血管生成类;7.细胞分化诱导剂;8.酶及抑制剂;9.某些菌类及其有效成分:卡介苗,短小棒状杆菌,链球菌(OK-432)，济南假单胞菌等。,细胞因子及其受体,干扰素及其受体：I型-IFN-a,IFN-b;II型-IFN-r;IL-2及其受体：IL-2由活化的T细胞分泌，可活化NK,B,单核和巨噬细胞，NK细胞被IL-2活化后具有细胞溶解作用，并分泌IFN-r;GM-CSF及其受体：GM-CSF诱导巨噬细胞、单核细胞和粒细胞增殖，提高他们的吞噬作用和ADCC作用，还可增加树突状细胞的抗原提呈作用；IL-12及其受体：由活化的单核、NK、树突状细胞核嗜中性粒细胞分泌，影响Th1细胞反应，刺激NK,T细胞产生IFN-r.,癌免疫治疗的分类-,分类举例-主动免疫治疗非特异性免疫佐剂如BCG、左旋咪唑、干扰素、IL-2特异性肿瘤疫苗被动免疫治疗抗体单克隆抗体、多克隆抗体与毒素或放射性物质交联细胞TIL、LAK细胞间接治疗去除或阻断细胞因子，抑制生长因子血管生长因子-,细胞因子-干扰素(IFN),主要作用：1.直接抗病毒;2.增强肿瘤细胞组织相容性抗原(MHC)和肿瘤相关抗原(TAA)的表达;3.增强NK细胞的细胞毒作用；4.增强抗体依赖性细胞的细胞毒(ADCC)作用；5.直接抗细胞增殖和抗血管生成作用等.,IFN-a的有效病种,血液肿瘤:毛细胞白血病,慢粒,低度恶性淋巴瘤,多发性骨髓瘤;实体瘤:恶性黑色素瘤,肾癌,Kaposis肉瘤;内分泌性胰腺肿瘤;类癌.,IL-118-,IL-1来自单核、巨噬、内皮细胞等，具有抗早期感染作用；IL-2活化的T细胞；调节T,B,NK,单核细胞的分化；Il-3T细胞，角质细胞，上皮细胞，为多功能造血因子；IL-4CD4+细胞，某些CD8+细胞，促进CD4+细胞的分化；IL-5CD4+细胞，must细胞，促进嗜酸细胞成熟、活化和趋化；IL-6T、内皮、单和和成f细胞，促进B细胞分化，巨噬成熟；IL-7IL-8IL-9IL-10IL-11.-,细胞因子白细胞介素,IL-2和IFN-r代表了Th1辅助细胞产生的主要细细胞因子;IL-2在T细胞的生长和成熟中起着关键性作用;IL-2具有多种生物学功能:诱导抗原刺激的T细胞增殖,增强MHC限制性抗原特异性T细胞的细胞毒作用,诱导大颗粒淋巴细胞,NK细胞的MHC非限制性LAK细胞活性,对其他细胞因子的诱导作用等.,细胞因子造血生长因子,目前美国FDA批准正式用于临床的只有G-CSF,GM-CSF,EPO三种;G-CSF和GM-CSF的适应征:预防化疗引起骨髓抑制的感染,治疗严重粒细胞减少症,动员外周血祖细胞,促进自体骨髓移植的恢复;EPO主要用于治疗癌症或艾滋病的贫血;TPO主要用于化疗引起的血小板减少症；SCF用于动员外周血祖细胞。,过继性细胞免疫治疗,LAK细胞：采用癌症病人自身的淋巴细胞,经与IL-2共同培养后回输给病人。LAK/IL-2因其疗效并不优于单用IL-2,而且在花费/效益比率上无优势，目前已不用；CTL疗法：采集病人血液、胸水或腹水中的淋巴细胞，加IL-2与肿瘤细胞一起反复培养。由于CTL可来源于CD8+或CD4+的T细胞，因而其临床疗效不肯定。TIL疗法：从病人被取出的肿瘤组织中提取浸润的淋巴细胞，经CD3抗体刺激，在低浓度的IL-2中扩增，然后回输给病人。TIL细胞具有肿瘤特异性杀伤活性，但由于其非均一性增殖，疗效可重复性差、需要新鲜肿瘤组织和长时间培养，广泛临床应用还仍需时日；IVS细胞：肿瘤特异性介于LAK和TILs之间，如TAK细胞。,过继性免疫疗法存在的问题-,肿瘤抗原表达弱,MHC-1分子消失;肿瘤细胞的不均一性;培养细胞本身的抗肿瘤作用差;带瘤病人的免疫功能受抑:CD4Th介导的免疫应答低下VEGF使DC分化障碍IL-10抑制DC上B7表达和IL-12分泌IL-6使IFN-a,TNF-a分泌受抑输注的细胞向肿瘤组织的聚集性弱;缺乏评价免疫疗法疗效的标准方法.,肿瘤疫苗,目的：克服肿瘤产物造成的免疫抑制状态；刺激特异性免疫杀灭肿瘤细胞；增强肿瘤相关抗原的免疫原性。如神经节苷脂类黑色素瘤疫苗；肿瘤基因疫苗：诱导产生肿瘤特异性抗体和CTL细胞CEA基因疫苗，PSA基因疫苗,代表性肿瘤瘤苗-非限定性抗原限定性抗原-,黑色素瘤完整黑瘤细胞+BCGGD2,GD3,GM3自身黑瘤细胞+DNP抗非典型性单抗黑瘤细胞溶解瘤苗MAGE,MART,gp-100基因调节自身细胞免疫源多肽基因大肠癌完整的自身癌细胞+BCG瘤苗CEA基因，CEA抗基因型瘤苗肾癌完整的自身癌细胞+BCGGM-CSF转染的自身癌细胞前列腺癌GM-CSF刺激的自身癌细胞PSA肽加树突状细胞用于激素耐药者乳腺癌病毒调节的自身癌细胞刺激T细胞对Bcl-2起反应刺激T细胞对MUC-1起反应-,单克隆抗体1,诊断：CyT103用于产粘蛋白腺癌细胞如结肠癌、卵巢癌等；抗B72.3术前应用以指导手术;治疗：美国FDA曾经批准2种非抗肿瘤单抗：鼠单抗OKT3,用于器官移植；抗血小板上的糖蛋白IIb/IIIa受体的人鼠嵌合单抗，用于冠状动脉成形术和动脉粥样硬化切除术后的高凝状态,单克隆抗体2,美罗华（Rituxan):1993年起用于CD20(+)化疗失败的滤泡性淋巴瘤，单药RR60%,部分病人出现延迟性肿瘤缩小的后效应；和CHOP方案联合应用RR96%,CR63%.Herceptin:用于Her2/neu过渡表达的肿瘤。转移性乳腺癌表达占25%30%。Herceptin用法：第1周首次370mg.ivgtt,之后100mg/周，连续9周。,肿瘤基因治疗,把核苷酸转移到靶细胞中以扰乱或纠正某些病生理过程；纠正靶细胞内基因或基因产物的异常。美国FDA批准有关项目已超过100，其中以P53在头颈部肿瘤和NSCLC的研究最多。临床需要好的转基因载体，美国已有基因治疗导致病人死亡的报告。Decitabine重新激活肿瘤抑制基因。,部分癌基因与肿瘤-,K-RAS作用机制为点突变；肿瘤为胰腺、大肠、肺腺癌；N-RAS点突变；髓性白血病、大肠癌H-RAS点突变；膀胱癌EGFR扩增；鳞癌、神经胶质瘤NEU扩增；乳腺、卵巢、胃癌C-myc染色体易位、扩增;SCLC,Burkitts淋巴瘤N-myc扩增；神母，SCLCL-myc扩增；SCLCBcl-2染色体易位B细胞淋巴瘤（滤泡性）CycD1-,细胞、分子靶向性药物治疗恶性肿瘤,-表皮生长因子受体（EGFR）阻断剂单克隆抗体抗肿瘤血管生成抗肿瘤疫苗基因治疗-,信号传导抑制剂（SignalTransductionInhibitor）,HER-2及Herceptin已知HER-2（人类表皮生长因子受体-2）在相当一部分肿瘤的恶性转化中起着关键作用。Herceptin连续使用可阻断HER-2的再循环入胞浆膜，加速HER-2进入降解旁路，防止其与HER蛋白相互作用。,HER-2/Herceptin,1.97例晚期乳腺癌（曾应用3程化疗、87%有内脏转移、65%用过蒽环类抗肿瘤药物）应用紫杉醇90mg/m2/w+Herceptin.结果：Her-2阳性者RR83%；HER-2阴性者RR45%。2.40例晚期乳腺癌应用NVB25mg/m2/w+Herceptin.结果:RR75%(HER-2+80%)已有报告Herceptin有心肌毒性,目前有观察Herceptin+EPI+CTX治疗乳腺癌对心肌的影响.,表皮生长因子受体(EGFR)及其抑制剂,表皮生长因子的过度表达与预后差、转移快、生存期短有关。EGFR抑制剂有可能通过促凋亡、抗血管生成、抗分化增殖和抗细胞迁移等而实现其抗肿瘤作用。他们常与化疗和放疗合用起到协同作用。临床前研究表明，EGFR酪氨酸激酶活性可以被某些药物选择性的从细胞膜内抑制或被单克隆抗体从细胞膜外的配体结合位点实现竞争性阻断，从而使肿瘤停止生长。,EGFR过度表达的发生率,-NSCLC40%80%H/NCancer80%100%ProstateCaner80%90%BrestCancer14%91%GastricCancer33%74%OvarianCancer35%70%-,Iressa（ZD1839）,Iressa是一类强有力的EGFR-TK抑制剂，对癌细胞的增殖、生长、存活的信号转导通路起阻断作用，还可增加DDP/CBP/Taxol/Taxotere/ADM等化疗药物的抗肿瘤作用。主要副作用为恶心、呕吐和皮肤反应。近期日本已有Iressa治疗晚期胃癌的研究。,OSI-774,OSI-774是另一种喹那唑啉类化合物。可选择性的直接抑制EGFR-TK的活性，减少EGFR的自身磷酸化作用，导致细胞生长停止、走向凋亡。体外实验证实，OSI-774对乳腺癌、NSCLC、卵巢癌和头颈部癌有效。目前已有OSI-774联合放/化疗治疗恶性肿瘤的临床研究。,C-225（Cetuximab）-1,C-225是免疫球蛋白IgG1的人源化嵌合单抗，通过阻断EGF和TGF-a与EGFR结合抑制肿瘤生长，主要用于大肠癌和头颈部癌，近期日本用于胃癌。有报告121例CPT-11/5-FU治疗失败的大肠癌，EGFR阳性率72%，应用C-225250mg/m2/w+CPT-11RR48%。MD.Anderson报告96例头颈部癌先用PDD/Taxol或PDD/5-FU治疗，然后对NC或PD病人加用C-225联合化疗。结果：41例NC病人中，又有10例（24%）有效，25例（61%）NC；22例PD病人中有5例（23%）PR，6例（22%）NC。,C-225-2,治疗40例胰腺癌，与应用健择的对照组相比，1年存活率32.5%:18%；63例头颈部癌,RR23%。,EGFR-TK拮抗剂Glivec(STI-571),已知酪氨酸激酶（TK）的高活性可促进慢性粒细胞性白血病癌基因的恶性转化，C-kit酪氨酸激酶的高活性与胃肠间质瘤（GIST）有关。有研究Glivec300mg/d/po治疗CML临床血液学CR98%，观察5个月，细胞遗传学缓解率53%。Glivec400mg/d/po治疗不能手术的晚期GIST35例，PR54%，NC34%（GIST对放/化疗抗拒）。,46例恶性GIST临床分析（作者等，2002）,胃肠道间质瘤（GastrointestinalStromalTumor,GIST）一词于1983年由Mazu等提出，与常见的上皮来源胃肠道肿瘤的生物学行为相比有较大差别。目前关于恶性胃肠道间质瘤（恶性GIST）的报告较少，我们报告46例恶性GIST的临床特征，并且与21例良性GIST比较。,46例恶性GIST临床表现-1,患者出现症状到就诊时间为3天2年，中位时间1个月。发病时主要的症状和体征主要有腹痛25例（56.1%）、腹部肿块17例(36.9%)、贫血15例(32.6%)、黑便12例（26.1%）。其他症状有腹胀（6例）、乏力（3例）、进食困难（3例）、恶心呕吐（3例）、厌食（2例）、便秘（2例）、腹泻（1例）、腹水（1例）等。21例良性GIST出现症状到就诊中位时间1个月（7天2年），主要症状为腹痛（7例，33.3%）,1例黑便，无贫血者。67例GIST中仅1例白细胞减少，1例肌酐升高，其他所有患者的肝肾功能、心电图均在正常范围。中位KPS评分90分。,46例恶性GIST临床表现-2,46例患者中有21例出现转移或复发，17例不能根治性手术切除，9例接受含DDP/EPI/DTIC/IFO的局部化疗或全身化疗，仅2例部分缓解。,GIST免疫组化检测结果比较,-研究例数CD34+SMA+NSE+S-100+Vimentin+Desmin+-Miettimen5070%2030%-10%-4mm者建议切缘23cm可提高局部控制率，但是否延长生存不肯定；根治术后辅助放疗适应症：较多淋巴结受侵；包膜外侵犯；术中肿瘤细胞污染；术后复发特别是脑、骨及皮下转移。常规化疗（如联合DTIC、CCNU、DDP)等治疗复发或转移的晚期患者近期RR4050%，同放疗一样，二者较少能延长存活。,恶性黑色素瘤2,目前认为经过12个月高剂量的IFN-a作为高危患者的根治术后辅助治疗，可提高存活，常用剂量为36MIU.sc.tiw.高剂量IL-2治疗转移性黑色素瘤RR15%20%,CR6%.CR者69%无病存活超过5年。单用生物治疗总有效率不高，长期使用昂贵的药费也不适合中国国情。,恶性黑色素瘤3,Lancet2000.报告法国黑色素瘤协作组的结果-499例患者肿瘤厚度1.5mm,临床检测无转移，应用IFN-a-2a3MIU.sc.tiw.共18个月，随诊5年。3年复发率：IFN组32%;对照组44%。,恶性黑色素瘤4,RR(%)tochemotherapyAloneorBiochemotherapy-CRPRRR-CVDalone43640AlernatingBIO/CVD02424SeqentialBIO/CVD213758ConcurrentBIO/CVD214162-(LeghaSS:SemininOncol.1997),恶性黑色素瘤5,DDP20mg/m2/dX4dVLB1.5mg/m2/dX4dDTIC800mg/m2/dX4dIFN-a5MIU/m2/dX5dscIL-29MIU/m2/dX5dcivLeghaSS:SemininOncol.1997,恶性黑色素瘤6,DDP20mg/m2/divgttd14VLB1.5mg/m2/divgttd14DTIC250mg/m2/divgttd14IFN-a36MIU/dsctiwIL-224MIU/dimd58,d1216q21dX34cycles（作者修改）,恶性黑色素瘤不同疗法的生存情况-1,-治疗手段例数MST3年（%）-手术+生物/生物化疗572年8个月36.8手术+放/化疗481年8个月12.5-P0.050.05-,晚期黑色素瘤患者不同疗法的生存情况-2,-治疗手段例数MST-手术+生物化疗242年4个月手术+放/化疗141年6个月-P0.05-(作者等：中华中瘤杂志.2000),恶性黑色素瘤9,TAK(肿瘤抗原激活的杀伤细胞）；肿瘤瘤苗；IL-12具有抗肿瘤活性，可增加化疗药物疗效，降低度性；化疗诱导的恶性黑色素瘤细胞凋亡具有P53依赖性；基因治疗,肾癌1,外科根治性手术仍是唯一有效治疗手段;25%57%的患者确诊时已有转移,常见转移部位肺、淋巴结和骨；晚期或复发患者联合放/化疗，疗效不理想；单用激素、内分泌治疗的疗效有限。,肾癌2,IFN-aRR15%IL-2RR15%联合IFN-a/IL-2无论RR或MST均优于单用其中之一；5-FU0.75/m2/divgttd15IFN-a2MIU/m2/dscd15Q28X3RR33%,肾癌3,IFN-a4MIU/m2/dsctiwIL-22MIU/m2/divgttd155-FU600mg/m2/divgttd15Q28X3RR47%(M.D.Anderson)近年来推荐门诊病人IFN-a/IL-2sc,5-FUciv肾癌肺转移可试用IL-2雾化吸入IL-21836MIU/d+5%GS+2%人血清白蛋白每日45次，直至完全缓解或病情进展。,肾癌-4,1.已知IFN-a治疗肾癌RR10%20%,低剂量时RR0.05-(作者2002),G-CSF治疗门诊肿瘤病人化疗后的白细胞减少2,表2不同化疗病人的中位白细胞计数（范围）G/L-治疗前治疗后有效率(%)-巩固化疗2.6(1.42.9)5.7(2.315.9)91.7姑息化疗2.3(1.22.9)5.6(1.321.4)82.8-p0.050.05-,G-CSF治疗门诊化疗病人的白细胞减少3,表3不同治疗病人白细胞计数（范围）G/L-治疗前治疗后有效率(%)-初治2.4(1.62.9)10.2(2.821.4)100放疗后2.6(1.52.8)4.0(3.26.2)66.6化疗后2.4(1.22.9)5.8(2.721.5)89.5放疗化疗后2.7(1.92.8)5.0(1.36.3)81.2-,G-CSF治疗门诊化疗病人的白细胞减少4,表4不同转移部位中位白细胞计数（范围）G/L-治疗前治疗后有效率(%)-肺转移2.7(1.62.9)8.3(4.531.5)100骨转移2.0(1.22.9)4.8(3.912.1)80淋巴结转移1.8(1.62.1)5.6(4.021.4)100无转移2.5(1.82.9)5.1(2.315.9)94.7-,G-CSF治疗门诊病人化疗后WBC减少5,表5不同化疗方案患者的中位白细胞计数（G/L）-治疗前治疗后有效率(%)-EPI2.4(1.82.9)6.7(2.315.2)THP2.5(1.62.9)5.1(3.512.9)蒽环类ADM2.7(1.52.8)5.0(3.09.4)82.7HCPT2.5(2.12.7)4.7(2.815.9)TAXOL2.4(1.22.9)6.5(4.631.5)植物硷类NVB2.2(2.02.8)4.6(1.321.4)85其他2.5(1.82.7)5.8(3.78.4)-p0.05-,G-CSF治疗门诊病人化疗后白细胞减少6,结论1.G-CSF100ugsc.X5天对不同门诊化疗的肿瘤病人均有较好的花费/效益比；2.升血治疗效果不佳的部分门诊病人,均为晚期复治者,必要时应预防性应用G-CSF;3.G-CSF主要不良反应为骨痛，可用芬必得等治疗或预防。,流式细胞仪,通过检测单个细胞的可见光和荧光特性，对细胞进行分群。临床应用1.DNA倍型分析：DNA异倍体的肿瘤预后差；2.红细胞分析：阵发性夜间血红蛋白尿，急性白血病；3.白细胞分析：HIV感染的免疫监测（病变进展时，CD4+淋巴细胞减少），白血病，淋巴瘤分型；4.血小板分析,外周血淋巴细胞亚型,-细胞表面抗原淋巴细胞亚型正常值(X+/-s%)-CD3+总T细胞72.85+/-8.51CD3+HLA-DR-静止总T细胞67.1+/-11.69CD3+HLA-DR+活化总T细胞3.05+/-1.34CD4+Th细胞37.11+/-6.95CD4+HLA-DR+活化CD4+细胞CD4+CD29+T辅助细胞诱导亚群16.92+/-5.35CD8+Ts细胞28.49+/-7.00CD8+HLA-DR+活化CD8+细胞CD4+CD45RA+T抑制细胞亚群20.51+/-3.64CD8+CD28-T抑制细胞15.99+/-5.13CD8+CD28+细胞毒T细胞13.22+/-4.18CD28+T细胞受体共同刺激分子49.59+/-9.30CD29+整合素b1链57.63+/-8.87CD4+/CD8+1.41+/-0.56CD3-CD16+56+NK细胞15.35+/-5.87CD19+B细胞10.77+/-4.52-,免疫组化与生物治疗,免疫组化技术是利用已知的特异性抗体活抗原，通过化学反应，是标记于结合后的特异性抗体上的显示剂显示颜色（如酶/金属离子、同位素等），借助显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察颜色变化，从而在抗原抗体接合部位确定组织/细胞结构的一门新兴的组化技术。,免疫组化特点,1.特异性强：如角蛋白显示上皮成分，LCA显示淋巴细胞成分；2.敏感性高；3.定位准确：形态与功能相结合,免疫组化临床应用,1.提高病例诊断的准确型；2.激素受体和生长因子的检测用于提示预后和治疗；3.癌基因蛋白检测与预后相关：C-erbB-2（乳腺癌）；C-myc(SCLC,宫颈癌）；P21(大肠癌，肝癌）；P53(SCLC,大肠癌）；4.评价肿瘤细胞增殖程度；5.发现微小转移灶：如骨髓免疫组化可使检出率提高20%左右；6.分期：检测肿瘤是否突破基底膜原位或浸润癌；7.指导治疗：P-糖蛋白。,肿瘤标志物检测,肺癌:CEA,SCC,Cyfra-211,NSE(SCLC)胃癌:CEA,CA199,CA724肝癌:AFP,FER,CEA大肠癌:CEA,CA199,TPA胰腺癌:CA199,CA242,CEA乳腺癌:CA153,CA125,CEA,TPA卵巢癌:CA125,AFP,b-HCG,CEA子宫癌:SCC,CEA,FER前列腺癌:TPSA,FPSA鼻咽癌:EA-IgA,VCA-IgA,生物治疗的应用原则,1.生物治疗的目的是调整自身免疫功能，应在手术、化疗、放疗使病人的肿瘤负荷明显减轻后开始生物治疗，体内的肿瘤细胞数应少于106，最多不超过108；2.当病人机体的免疫状态较好时，可较好的发挥生物治疗中主动免疫的抗癌机制，不能把生物治疗作为其他常规抗肿瘤治疗失败后的一种补救治疗措施，应使生物治疗在综合治疗中发挥其作用；3.当病人的免疫功能明显受抑时，应选用特异性或非特异性抗肿瘤免疫效应细胞、细胞因子、某些单克隆抗体等，以过继免疫方式发挥生物治疗的抗癌作用；4.生物治疗的疗效出现时间偏迟，常于治疗后数月才见到肿瘤缩小或消失，停止治疗后，仍可见肿瘤继续缩小；5.生物治疗联合放化疗应注意选择适当时机。,影响恶性肿瘤生物治疗疗效的因素1,1.尽可能降低肿瘤负荷;2.状态与机体免疫功能相关,影响生物治疗方法的选择:TAK/TIL细胞输注与细胞因子应用;3.治疗时机:手术与生物治疗(IL-2不仅可活化CTL细胞，还有促进伤口愈合作用）；化疗与生物治疗（序贯给药和同时应用优于间断或交替给药）;4.治疗方法:联合生物治疗优于单药;生物化疗优于单用生物治疗;5.剂量强度和总量,影响恶性肿瘤生物治疗疗效的因素2,给药途径：局部注射（包括瘤内注射）、sc,im,ivgtt免疫指标的检