叶绿体中色素的提取和分离ppt课件

实验,叶绿体中色素的提取和分离,1,实验目的 掌握提取和分离叶绿体色素的方法，探究叶绿体中色素的种类。 实验材料,叶绿体中色素的提取和分离,新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。,2,实验原理,叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙醇或丙酮进行提取。 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此采用纸层析法进行分离。,叶绿体中色素的提取和分离,3,实验材料用具：,1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵 玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。,4,实验过程：,1、提取叶绿素的步骤 ： （1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶片 （2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等部分 （3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。 （4）磨：研磨要领是要用力压快速研磨。 （5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗和试管，最后提取液置于试管中待用，及时用棉塞（或塞子）将试管塞严 .,5,1、约5克的菠菜緑叶，剪碎，放入研钵中。,6,2、研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入10mL无水乙醇。,7,3、迅速研磨。,8,4、将研磨液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤，将过滤液收集到烧杯或试管中。,9,2、分离色素的步骤,制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角作标记，在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画一道线，每次划完尽量吹干，用提取液反复划好几次，不要弄破纸条。,10,层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中。,11,（干燥后）观察实验结果： 四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b,12,叶绿体中色素的提取和分离,实验结果,13,问题讨论：,1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？ 2、 将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞将试管塞严？ 3、 画滤液细线时重复画几次的目的是什么？,14,1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？ 二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解 2、 将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞将试管塞严？ 滤液含有丙酮，丙酮有毒，防止挥发 3、 画滤液细线时重复画几次的目的是什么？ 增加色素的含量，使分离后的色素带更加清晰,问题讨论：,15,问题讨论：,4. 为什么不能让滤液细线触及层析液？ 5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？ 。,16,问题讨论：,4. 为什么不能让滤液细线触及层析液？ 层析液会溶解色素使色素无法分离； 5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？ 滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。,17,绿叶中的色素,类胡萝卜素,（含量约1/4）,叶绿素,（含量约3/4）,胡萝卜素（橙黄色）,叶黄素（黄色）,叶绿素a（蓝绿色）,叶绿素b（黄绿色）,18,实验关键:,1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片.(如菠菜叶),2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。,3.层析时不要让滤液细线触及层析液。,19,谢谢大家!,20,随堂演练 ：,1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上到下依次为（ ） A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素,A,21,2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是 （ ）,A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类,C,22,3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现的最窄的一条色素带的颜色是 （ ）,A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色,B,23,4.提取叶绿体中的色素时要加丙酮，其原因是 （ ）,A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离,A,24,5.在叶绿体色素的提取和分离实验中，在滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ）,A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素,C,25,能力提高练习：,(1)在圆形滤纸的中央，点上叶绿体色素的提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中央向四周扩散，形成四个色素环带，排在最里圈的色素是（ ） A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色,B,26,(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离” 实验时，向研钵中加入SiO2的目的是： ， 加入CaC03的目的是 在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是 在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是 其颜色是,为使研磨充分,防止研磨过程中，叶绿素受到破坏,防止层析液挥发,叶绿素b,黄绿色,27,(3)某同学在做“叶绿体中色素的提取分离”实验时，操作情况如下所述，结果实验失败，请指出其错误所在:,将5克新鲜完整的菠菜叶，放在研钵中，加入丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。 (原因是没有去除粗叶脉和将叶剪碎，这样降低了叶绿素的提取率 ） 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地