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核磁应用培训笔记一、一维H谱实验操作流程1、新建一个实验，可以直接输入New命令，name：样品名称；PROCNO:处理号；Solvent：不代表锁场的溶剂，只影响最后打印谱图参数中溶剂项的显示； Expenriment Dirs：标准实验，不代表脉冲系列； User下，可以建立自己的标准实验；H谱的标准实验名称是：proton2、getprosol：把相关的脉冲参数保存在Acqupars表中: AcquparsPL1 3、锁场，可以直接点击Lock图表选择溶剂后锁场，或者输入命令LOCK空格溶剂名称直接锁场； 锁场的目的？4、atma：topshim5、NS输入数值6、rga7、za即zero go 的简写Notice：（1）调谐：做同一样品的不同谱图时需要重新做一次调谐。（2）当第一次匀场不好的时候，可以输入命令topshim+空格+tunea进行二次匀场，若多次匀场后仍然不能达到好的状态则需要做三维匀场。（3）同一溶剂的样品，建议在同一时段做谱，有利于匀场。（4）匀场不好的原因有以下几个方面：样品中含有顺磁性金属离子高粘度样品溶液高度太低。8、部分参数的设置（1）eda采样参数设置：可以输入命令ased进入参数设置界面；PULPROG：脉冲系列名称，zg30:30度角激发，zg：90度角激发；AQ-mod：采样模式TD：采样点数NS:采样次数DS:空扫：真正开始采样前先采集的次数，做一维谱时可设为0，二维谱空扫的次数设置非常重要。TD0，真正采样次数，NS*TD0，如TD0设为10，NS为1024，则总采样次数为1024*10SW谱宽，用默认的谱宽即可，其中SW与AQ成反比O1P，O1，中心频率，其中前者是以ppm为单位，后者是以HZ为单位。 最右边：谱宽/2+O1P（2）和脉冲系列有关的参数DE值，采样结束后等待衰减的时间。做杂核时需要更改。D1：弛豫延迟，做定量H谱时需要更改P1激发脉宽；PL1（dB）：激发功率；9、谱图处理（1）Procpars：窗口函数efp：指数函数，em、ft、pk三个命令的组合gfp：高窗函数：gm、ft、pk三个命令的组合apk：根据当前的样品来调PHC,PHC1，当谱峰有很多鼓包时使用效果不好。Notice：LB值越大信噪比越好，分辨率越差，LB值越小，分辨率越好。LB0是相对于efp函数而言的，当调节LB值为负，信噪比仍然不好时，可用gfp函数，先更改GB值，再输入GFP命令冲零也可以提高分辨率。（2）定标（3）直接输入plot命令，进入打印界面。（4）如何创建模板？ C:BrukerTopspinPlotLayouts,先另取名字创建模板，再将模板文件夹下的默认模板删除，如H谱的默认模板是：1D-Hxwp，先删除该模板，再将自己创建的模板改为默认模板的名字。二、如何做H谱的定量？与标准一维氢谱相比，需要做一下变换1、将脉冲系列zg30改为zg，2、找内标，两个峰挨的很近且基线分离，一般很难找到合适的内标物。3、调整O1P,使得O1P在两个峰之间4、NS要足够大，为了保证较好的信噪比，定量最起码要做半个小时以上。5、D15T1,D1要大于5倍的T1，首先要找最大的T1，D1的时间要足够长。三、碳谱：碳谱的标准实验为C13CPD1、getprosol2、atma3、采样参数的设置：谱宽sw一般设置为250,O1P，NS，TD0,4、rga5、zg6、tr命令：保存数据，继续采样；如tr4，保存最近4次的2倍。7、efp：apk8、ppf：对碳谱的全谱进行标峰。9、Mi+数字+PPF：表示强度低于该数值的不标峰。10、go命令，样品浓度太低的情况下，过夜采集仍然不能得到理想的谱图，第二天白天需做其他谱图，可在第二天晚上将前一天晚上采集的谱图拖动到当前窗口，重新放入样品锁场调节后可以输入GO命令进行累加采集。11、和脉冲相关的参数CPDPRG2，通常情况下用Waltz16，做氢谱、碳谱的90度脉冲没有问题，做杂核时需要更改。Notice：看到碳谱有裂分，首先要考虑是否有同分异构体，再考虑更改CPDPRG2，选择带bi的参数。四、碳谱定量实验（实验时间相对很长，需要加弛豫试剂以减短实验时间。）1、标准实验选择CBIG，newok2、将zgig30改为zgig3、DS:0加弛豫试剂后会影响锁场和匀场。五、DEPT实验（45、90、135）1、NewC13DEPT90OK2、getprosol3、修改参数：(1)改动参数NS，采样次数是普通碳谱采样次数的1/4.(2)Pulseprog查看与脉冲相关的参数，其中NS是4的倍数。(3)DS=8，NS=4，SW:谱宽，O1P.4、rga：zgNotice：（1）DEPT45，只出现季碳；DEPT135：只出现CH（2）HALT空格数字（3）SR值，从校正后的普通碳谱的处理参数中copy SR值，复制到DEPT谱图中，可将DEPT谱图中的化学位移与普通C谱的化学位移对齐。六、如何将多种谱图打印在同一张图上？方法一：1、先将全谱图调出并标好化学位移。2、选择1D+1D+1Dxwp打印模板3、在data中，点击ADD，选择实验数据现在的位置，将需要的数据拖入，点击Apply，确定。此方法的优点是可以对每一张谱图进行修改。、方法二：1、随意拖入一张谱图，输入plot2、全选中，并删除原有谱图3、在DATA里面选谱图，APPLYOK;4、在右侧选择多个谱图叠加的图标，三条重叠的折线；5、在空白处拖动鼠标，出现第一张谱图6、右击选择Edit，选择steaked，输入谱图张数。Spectra：0*5,0表示左右偏移量，5表示上下偏移量。 此方法的缺点是不能单独修改每一张谱图。七、一些补充注意事项1、BBf，探头。2、新安装仪器可以做的核有H、C、P、F、N,可以直接选择标准实验，直接调用标准模板。P31CPD,全去偶，zgpg30；P31：zg。LOCK之后可以直接输入一系列命令，点击ENTER直接完成。3、做杂核前要先确认两件事情：（1）有无脉宽和功率（2）有无标准实验；4、P的化学位移的标定：外标法。 把标准品（查找网上文献）放到P样品中测定核磁，将标准品的化学位移定位为0后看SR值，再将SR值复制粘贴到后续做的P谱图上，再标定化学位移。 标准品：85%磷酸溶液。 不锁场、不匀场，直接调谐、prosol。 不锁场实验：（1）打开BSMS键盘，将lock变成灰色。（2）sweep要变成灰色（即将（1）（2）的ON-OFF都OFF掉）（3）atma；rga；zg；八、对于没有标准实验、没有脉宽和功率的杂核如何入手做？以B11为例。1、首先查询该杂核的旋磁比、天然丰度，对于天然丰度太低的要求浓度高些，或者很难做出来。 HelpNMR GuideNMR EncyclopediaNMR ApplicationNMR penddic Table点击要做的元素查看旋磁比和天然丰度。2、先借用C谱的标准实验，新建一个实验，当旋磁比为正时标准实验选择C13CPD，当旋磁比为负时标准实验选择C13IG。点ok。3、更改参数查看Acqpar参数（都是C13的参数）getprosol（读取C的脉宽和功率）输入edsp命令把F1维中的C13改为B11,F2维不变DefaultSave再次回到Acqupars参数中NS（扫描次数）、SW(谱宽，尽量设宽些400)，O1P（先赋予0）+-200位置找峰，D1（经验值）2S，对0也适合，（事先查D1值，太大可加弛豫试剂）lock，topshim输入atmm（不能用atma，手动调谐，第一次做核时必须用手动调谐。）出现Tuning对话框，若点找不到会动的倒峰，则点击图标，放大范围，都调好后点FileSave positionExit输入atma；rga；zg，弹出rga对话框，点OK，输入密码Bruker，接着弹出zg警告halt8，efp；apk输入sref弹出警告，close（将O1P放在最佳位置）edmac（宏命令）+空格+名称（随意命名）。校准背景信号，第一段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；第二段（第一行，absf1+空格+最大值；第二行，absf2+空格+次大值；第三行，absf）；Notice：下一段的开始是上一段的结束，进入鼓包区域后区间要变小，节点值不能正好落在峰的最高点，从最左端分多段编辑到最右端。编辑好后保存。输入BL命令4、如何创建标准实验模板？ 输入wpar在user下，不能存在par上面点击write new输入实验名称，OKOKclosenew不能getprosol（90%重水10%水叠代钠标样，可以用来建立O的标准实验，也可以用来建立Na的标准实验，需要做Pt的标准实验室，可打电话让工程师过来设置，另外做其他杂核的定量需用到C13IG脉冲系列，需要请工程师调90度脉冲的脉宽和功率，请工程师来做核。）九、部分二维实验温馨提示：二维谱实验最重要的就是控温。（一）、实验一1、New建立一个新实验，标准实验选择COSYGPMFSW：用梯度场进行相关路径的选择。其中GP表示梯度；MF表示多量子粒波，SW表示方波，标准波形。多量子粒波的好处：可以从对角峰上看到单峰的性质，简化对角峰，易于解析。2、lock3、atma；topshim；getprosol，调谐的目的是为了接收线圈的频率与中心频率保持一致，提高灵敏度。DS空扫16次。Pulseprog：查看脉冲系列。TD,F2维2000左右；F1维，大于256（设高一点可以提高分辨率）。采采样模式：QF；与采样相关的参数：TD、NS、DS、SW、O1P。其中NS、DS的设置可以参考限定值。输入命令ased，可以查看与脉冲系列相关的参数，基本不需要自行修改。4、rga；zg5、谱图处理（1）输入命令xfb进行变换，其中xf表示加窗函数，b表示两个维度。（2）调进一维谱选中一维谱，右击，选择display As 2D projection。选F1+F2（3）点等高线调整图标（一个没有底边的三角弧形，中间几条平行线穿过）进行等高线调整。Level increment：1.2-1.3即可；Number of levels（等高线数）：32；FillApplyOK。或者可以输入命令clev+32可得到等高线数目。（4）校准（即定标）放大谱图进行定标。（5）去除噪音，选中噪音，输入命令proj，选择UP data rows/cols from displayok再选择最上面的calculate positive projection输入sub2（对正峰和负峰都去除噪音）（二）、实验二1、New，标准实验选择：MLEVPHSW,PH表示相位；MLEV表示自旋锁定或自旋传递；SW表示方波，形状脉冲SP；查看与脉冲系列相关的参数，其中NS=8*n，DS=16*n；TD(F2=2048，F1256)SW,O1P;D9：自旋锁定时间，默认值为0.08S，即混合时间（设短的话可能会无法调整相位）2、lock3、atma；topshim；getprosol；4、谱图处理（1）输入命令xfb变换谱图（2）调等高线（3）调相位，先调0级相位，再调1级相位。（4）校准（三）实验三1、NewNOESYPHSW适用于大分子2、NS：8*N；DS:16*N;D8混合时间，空间5，峰的强度与距离的六次方成正比。对于大分子，D8=0.10.3S；对于小分子：D8=0.60.8。Notice：分子量越大，弛豫时间越短，分子量越小，弛豫时间越长，温度越高弛豫时间越短。3、lock4、getprosol5、atma；topshim；rga；zg（四）实验四1、new，标准实验选择ROESYPHSW,PH：通过相位循环可以减掉一些峰。2、具体实验步骤与前面的实验步骤大致相同，通过查看与脉冲系列相关的参数对参数进行设置。接着LOCK,getprosol；atma；topshim；rga；zg3、Notice：输入Set命令，选中Enable automatic command spooling方框内打钩。可以针对一个样品的自动排列做多个实验。（五）实验五：J-Resolved同核实验。1、newcosy45sw（先借用）2、Pulprog：jresqf（消除化学位移，保留耦合常数）3、NS:4*N；DS：16；4、F2维（化学位移）；F1维（耦合常数） SW=20，SWH=50HZ，O1P只针对F2设定值，F1不用设。5、getprosol6、lock7、atma；topshim；rga；zg；（六）实验六H-C相关的二维谱1、New，选择标准实验：HSQCETGPSISP,ET表示采样模式为回波反回波采样；GP梯度；SI灵敏度增强；SP形状脉冲，让激发更均匀。2、输入命令eda，进行采样参数设置：NS=1*N,DS16,TD,SW谱宽(F2为H谱谱宽，F1为C谱谱宽)； 输入命令ased可进行与脉冲系列有关的参数设置，CNST2：单位为HZ,C和H直接耦合常数的平均值。GPZ2，C:20.1%，N15，8.1%，若有些杂核没有显示，则改核后可以输入命令gradratio查看3、lock4、getprosol；atma；topshim5、rga；zg（七）实验七1、NewHMBCGPND，ND表示在采样时间内不进行去耦。2、（1）采样参数设置NS=2，DS=16,O1P=?,SW=? （2）与脉冲系列相关的参数设置，CNST13，远程耦合常数，系统默认一般为8HZ,可以适当地减小，当看不到交叉峰时，可能该值设大了，也可能是因为二面角的原因。，通过耦合常数可以计算二面角的大小。3、lock4、atma；topshim；rga；zgNotice：HMBC谱图中可能存在HSQC的残余峰。（八）实验八，在HMBC二维谱中去除HSQC的残余峰。1、newHMBCGPND,Ttitle：J-Filter HMBC2、更改脉冲系列及参数 将PulprogHMBCGPL2ndqf（1）输入命令eda，更改采样参数，NS=2*N,DS=16，QF，TD(分F1，F2)，O1P（2）输入命令ased，更改与脉冲系列相关的参数，CNST6:120HZ;CNST7180HZ,在该区间内HSQC残余峰去除。CNST13，百分比根据右侧提示填写。3、getprosol4、lock5、atma；topshim；rga；zg十、完整的二维谱图处理过程 1、输入xfb，谱图变换；2、调入一维谱，选择F1+F2，ok3、clev32，修改等高线。4、校正相位（NOESY、ROESY、TOCSY、HSQC需要校正相位，其他的不需要）点相位校正图标，选几个点，ADD，先校正红线所在的位置。5、定标：先定好一维谱，读出化学位移，再点击定标图标，找出中心位置进行定标。6、去除噪音，（T1噪音的去处），左边没有信号的投影。 Projeditupdateok第一个正峰第二个负峰，输入sub2。7、可以通过选择性预测提高F1的分辨率，edpprocparsfounerME_mod选择LPfr（LP表示线性预测，fr表示向前的）NCOEF（HH相关选100，HC相关选32）。此处理的缺点是可能产生鬼峰。十一、核磁的维护（一）硬件维护1、机柜里面的滤网一般一年清洗一次2、建议每周重启电脑一次3、打开机柜需要带放静电手环4、每次严格开关机，关机开机后要做一次CF。5、90度脉冲校准正常情况下半年做一次，对新仪器可能需要三个月做一次。6、field的校准，正常情况下半年一次，对于新仪器三个月做一次。（二）磁体及软件维护1、1H 90度脉冲的校准,标样：0.1%EB in CDCL3（1）new，建立实验，选择PROTON标准实验，title：1H90cal（2）lock（3）getprosol；atma；topshim（4）更改参数输入命令eda更改采样参数，将zg30zg；NS=1，DS=0;O1P=2.6PPM(即设定在乙基的四重峰中央)。输入命令ased更改与脉冲系列相关的参数，D1=20S,RG=16; P1=10.60记录下来（脉冲作用时间）改为2；PLW1机PL1保持不变。Notice：先把原来的P1值，再将P1赋予一个比较小的时间，eg，1us先试做一个谱看看。（5）rga；zg（6）efp；apk，处理谱图，并找到四重峰，使当前窗口只出现四重峰。（7）输入命令dpl，定义打印区间。（8）回到处理参数procpars，将PH_mod中的模式改为PK（9）输入命令POPT，脉冲的功率为脉宽的优化模式。勾选第三个选项即perform automatic baseline(PARAMETER写上P1，OPTMUM中选zero，STARTVAL开始值：比原有值的三倍大一些即大于3*10.60；ENDVAL结束值：比原来的四倍大一些，即大于4*10.60+4；INC步长一般定为2，36、38等等)，填好以上各参数后，点击StaroptimlzeSaveok开始做实验若出现负值的峰，说明已经越过180度得电，点击skip current optim停止实验。结果存在TITLE里面，不用记录。在Acquars中的P1（us）得到值/4,得到的值其实是零点的值，即360度得值，除4即可得到90度的值。（10）更改prosol表，输入命令edprosol，将左右通道的pulse值改过来Saveselect all relevant ok输入密码okyesokyesok，关闭窗口。2、C13的90度脉冲，标样：ASTM。（参考讲义P48）（1）newPROCNO(处理号一定为1)C13CPD(标准实验名称)（2）getprosollock 溶剂名称atma；topshim（3）修改参数，输入命令eda修改采样参数：将zgpg30改为zgpg；NS=1;DS=0，O1P=67，O2P=3.5输入命令ased修改与脉冲系列相关的参数：RG=32或64；D1（S）=20；P1先记录下原始数值如8.8，先赋予小点的值如2us（4）输入zg命令直接采样（5）efp；apk让窗口只出C的信号，输入dpl，以下步骤与H的90度脉冲一致，可参考H的90度脉冲。Notice：测完后要到prosol表中进行更新。3、如何计算当前样品的90度脉冲值？（1）new设定好参数之后做pulsecal（2）输入命令pulsecal，enter后可以计算当前样品的90度脉宽，测完后点击close。第一次做pulsecal命令时会弹出对话框“该命令正在编译”直接close掉就可以了。4、3D匀场，标样：90%水+10%重水。（1）new，建立一个一维H谱实验（2）lock H20+D2O（3）atma；topshim gui（可以去除Y方向的匀场梯度）（4）选3DAfter：ZX-Y-XZ-YZ-Z（不做Before）Star结束后点close。（5）选一个常做的样品，做一个一维H谱，lockgetprosol；atma；topshim（6）输入wsh在filename中输入文件夹名称writecloseNotice：怎样判断匀场好不好？看DMSO、甲醇、丙酮的多重峰看TMS的卫星峰看溶剂本身的峰信号，越窄越好。5、lock field的校准方法一：锁场锁氘信号，标样用10%的EB in CDCl3（1）进样（2）lock CDCl3（3）进入BSMS键盘locklevelfield读取field值并记录下来（6704.3）点ON-OFF脱锁输入命令lopo，enter进行锁场参数的优化选溶剂，点ok输入6704.3（锁场后的值）。Notice：红线和绿线的交叉点在锁场的最中间，蝴蝶线完全对称，通过更改phase值可以使其变得对称，从交叉点出来的第一个峰都是向上的。（4）点击stanby，命令行中输入edlock，点折线图标进行保存。方法二：什么溶剂都锁不上的情况下使用该方法（1）放H20+D2O的标样进去（2）将sweep的ON-OFF关掉（3）修改采样参数，建立一个H谱zg30，NS=1，DS=0，O1P=4.7，SW=3040ppm（4）atma；rga；zg；（5）efp；apk（6）找到水峰，看水峰与4.7偏离了多少HZ，在procpars中将PH_mod改为pk；（7）输入命令gs，点实时变化谱图，打开BSMS键盘，进入locklevel里面，调节filed值，使水峰到达4.7的位置，到达4.7后点Standby，输入命令edlock，点折线图标，保存。（8）将GS界面stop掉（9）用CDCl3样品做校准。十二、一维选择性激发实验1、实验一：针对分的比较开的峰（1）新建一个实验，做一个一维谱。（2）点击积分符号，在自己想要的信号上，对其进行积分。（3）“Save as veg”右击保存图标，保存。（4）输入buttonnmr，选择select（5）点击set Gr ROESYOK输入实验名称后点OKOK：不能再更改参数，直接采样；cancel只是建立实验，还可以修改参数。本例中选cancel。（6）修改NS=8%N，DS=4*N（7）rga；zg（8）ef相位校正，一般会出现三种信号：相关信号、吸收型信号、色散信号。2、实验二：针对重叠比较严重的多重峰。 CSSF:chemical shift 化学位移，selective filter。（1）进样，采集一个一维谱（2）找到重叠峰，拷贝其中的一个化学位移：所关心的峰的中间位置。（3）新建一个实验，修改O1P为前一步骤的化学位移值。（4）更改脉冲系列（pulprog），选择sel cssfzs.2ok（5）查看参数，修改NS=2*N,DS=16，TD0=816，部分参数根据右侧提示修改。CNST2=4(此值取决于峰的重叠程度)（6）rga；zg3、实验三（1）在实验二的基础上，输入命令i，I命令表示做同样的实验。（2）更改脉冲系列，将selcssfzs.2selecssfdizs.2（2表示第二个版本，为了选择峰；带zs表示能量子激发；di自旋锁定，cosy峰为了找相关谱）（3）更改参数D9（混合时间）、NS、DS、TD0等参数。（4）rga；zgNotice：cosy、tocsy、noesy、roesy对角峰、交叉峰都有；hsqc、hmbc没有对角峰，只有交叉峰。十三、溶剂峰的压制1、只压制一个峰（1）做一个一维谱，找到要压制的峰，复制化学位移。（2）new标准实验名称为：WATERSUP,对应的脉冲系列为NOESYGPPR1dok（3）设置实验参数，D1：低功率、长时间的功率，关键设置参数D1和PL9。对于NS、DS无严格要求；PL9=60dB（该值越大，实际功率越大）；D1=2s(时间越长，频率覆盖范围越窄)；O1P的值直接粘贴步骤一复制的化学位移值，谱宽要足够大。（4）getprosol；2、压制两个峰（1）edc标准实验名称：LC1D12OK（2）O1P:压制峰1的中间位置的化学位移值（谱图的中间） O2P：压制峰2的中间位置的化学位移值。（3）getprosol（4）NS=8*N,DS=4,PL9=60（5）rga；zg3、如何压制多个峰？（1）newLC1DCWPS(标准实验名称)（2）修改参数NS、DS、SW（3）getprosol（4）输入命令L30(即压制峰的个数，如N)（5）输入命令xaua（自动采集一个一维谱），压制N个最强的峰4、水峰的压制（与压制一个峰的步骤是一样的）（1）newWATERSUBNOESGPPR1d（2）O1P的确定，NS、DS、D1、PL9（3）getprosol（4）lock（5）atma；topshim；（6）RGARG，记录RG值（7）rga；zgfpallapk（8）更改O1值（9）rga；zg（多次循环，直到水峰的压制达到好的状态）5、实验五（1）edc（new）NOESYPR1D(标准实验名称)（2）D8=0.1S;NS、DS(根据提示确定)；O1(O1P=4.7)、D11=30ms=0.03s，D1=2S;PL9=5060Db(不宜给太大的值)（3）getprosol（4）lock（5）atma；topshim；rga；zg拓展实验：输入I命令NOESYGPPR1d（加梯度场实验），更改梯度参数。Notice：加梯度场对锁场相位要求比较高。十四、Topspin软件介绍1、通过命令re、rep、rel、repl+空格+数字打开文件2、rel：打开最后一个实验名称下的实验号。 Repl：实验号下面的某一处理号。3、命令expl：按照2.1或者3.0版本的统一存放数据。4、命令.all5、E命令，选择要看的区域6、批处理：processingsenal processingFind找到实验名称nextLB0.3；efp；apk；ppf（标峰）（输入一系列命令符）excuteclose。Notice：LB增宽因子指数窗函数。7、批处理积分（intser批处理积分命令）（1）先对第一张谱图进行积分并保存（2）输入命令intser（3）选择第几个实验next（4）options（calibrate：选定某一个位置；Normalize sum of integrals归一化法）第几个峰定义几个ok，归一化值加和多少，可以自己增。8、增加一个处理号（wrp命令）Corl dram预测化学位移9、去卷积（去卷积的峰保留在999的处理号上面）AnalysisDeconvolutionokoptions（用什么函数）（use lorent zian shape）选择区域（阈值）ok10、进入topspin用户名和密码的设置 Set命令optionsadmmistrationlock topspin user interface11、电子签名：Electromic signature creation，输入命令esign12、audit跟踪文档，可以看到所有的操作13、更改layout的三种途径输入命令layoutcontrl+P处理参数中的Automationlayout14、模板保存的路径，C:BrukerTopspin3.0plotlayouts15、stack1d多个谱图叠加16、parplot参数修改17、输入命令almanao打印化学位移18、利用NMR Guide自学：NMR Guide输入关键词搜索19、Helpmanuals1D2D step-by-step basic多利用资源自学。十五、T1、T2的测定1、1H的T1 的测定（做二维时也需要控温）（1）做一个一维H谱（目的是看看匀场好不好有没有合适的谱宽和O1P） Newgetprosollockatma；topshim；NS=1;DS=0；rga；zgefp；apk12（2）输入命令Iexpno：完全拷贝当前实验的所有参数，只是实验号加1，目的是为了谱宽和O1P都不变。（3）进入采样参数栏，将zg30改为t1ir（实际是假二维）点图标（目的是将其改为二维），弹出对话框，点OK到脉冲参数里面看采样参数：NS=8*N（此参数设置是实验的关键）,DS=4，FnMODE 选undefinedTD（f1：变换等待时间，一般给10即可；f265536），SW（F2：氢谱的谱宽，不变；F1不用管）点击左侧LIST，找到VDLIST,自己定义一个VDLIST,edit（填十个点，这是个点必须包含在弛豫时间内，前面的点密集些，后面的点系数些，如0.01,0.02,0.05，0.1,0.4,0.8,1,3,5,10）其中最大值的确定是关键，要保证做出来的曲线变化要么是向上的一个平台，要么是向下的一个平台。设置好后保存回到与脉冲相关的参数上，D1(S)=10，D1值必须要大于或者等于VDLIST中设置的最大值，设置好VDLIST后rga；zg（4）数据处理更改处理参数（procpars）SIF1的一定是偶数，如16，其中SI(F1) TD(F1); SI(F2) TD(F2);输入命令xf2（表示只对f2做傅里叶变换）点击相位调节图标，将十字线放在最下方，点鼠标右键选ADD（只需选一个点）点R图标：出现氢谱，只需调节好氢谱的相位保存，退出返回处理参数propars中，将F2维中的PH_mod改为PK点Analysis中的“T1/T2”图标，进入右侧界面点第一个图标“折线FID”，弹出对话框，选spectrum，弹出下一个对话框，slice，number=1，ok点第二个图标peaks ranges：弹出对话框，选manual integration，弹出另一对话框，点ok，进入积分模式，选择峰并进行积分积分后点击“带A的保存”图标，选第三个选项Export regions to relaxation module and ret点第三个图标：relaxtion，widowsfiting funtion uxnmrt1listfile name：vdlist点数是前面设置的点数10，检查以上三项无误后输入ok，点击“”图标，全部点拟合曲线查看拟合曲线输入plot命令点击T1/T2，拉动左键。2、1H的T2的测定（自选回波）（1）做一个一维H谱（目的是看看匀场好不好有没有合适的谱宽和O1P） Newgetprosollockatma；topshim；NS=1;DS=0；rga；zgefp；apk12（2）输入命令Iexpno：完全拷贝当前实验的所有参数，只是实验号加1，目的是为了谱宽和O1P都不变。（3）修改脉冲程序，改为cpmg，将一维模式改为二维模式。（4）在与脉冲相关的参数里面查看NS、DS、Fnmode的定义（5）修改NS=8*N,DS=16,TD(F2=65536，F1=10)，Fnmode:Nodefined，SW不变。（6）在LIST中，编辑VIDLIST（表示的是循环次数）表，如：2,10,20,50,100,200,300,500,750，？（最后一个值的确定根据D2O来计算，是关键），单个循环时间=2D2O+P180保存。（7）回到采样参数中，查看和脉冲系列相关的参数，D2O稍微大于50*P2（注意单位换算），D1值的设定，表示弛豫的恢复时间，与T1有关，D15T1，本例中D1=10s；测T2实验中的关键参数有：D2ONS、DSTDS1维VVLIST的设定，最后一个循环次数由D2O决定。（8）rga；zg（9）谱图处理（与T1的处理过程类似，唯一区别是拟合出来的是循环的次数）更改处理参数（procpars）SIF1的一定是偶数，如16，其中SI(F1) TD(F1); SI(F2) TD(F2);输入命令xf2（表示只对f2做傅里叶变换）点击相位调节图标，将十字线放在最下方，点鼠标右键选ADD（只需选一个点）点R图标：出现氢谱，只需调节好氢谱的相位保存，退出返回处理参数propars中，将F2维中的PH_mod改为PK点Analysis中的“T1/T2”图标，进入右侧界面点第一个图标“折线FID”，弹出对话框，选spectrum，弹出下一个对话框，slice，number=1，ok点第二个图标peaks ranges：弹出对话框，选manual integration，弹出另一对话框，点ok，进入积分模式，选择峰并进行积分积分后点击“带A的保存”图标，选第三个选项Export regions to relaxation module and ret点第三个图标：relaxtion，widowsfiting funtion uxnmrt1listfile name：vclist点数是前面设置的点数10，检查以上三项无误后输入ok，点击“”图标，全部点拟合曲线查看拟合曲线输入plot命令点击T1/T2，拉动左键。Notice：此时得到的T2不是真正意义上的T2，而是循环次数，因此T2的实际值计算公式为：如本例中得到的值为68.365，则T2的实际值=68.37*（2D2O+P180）=68.37*（2D2O+P2）=68.37*（2*0.00105+20.80*10-6S）=151ms，注意单位换算，P180即为P2。C的T1的测定：脉冲系列选择tlirpg。十六、如何设置命令的自动排列？（1）输入set命令Adiministration，勾上Enable automatic command sppolingok（2）setmore preferences status bar prefrences change勾选需要显示的栏目Applyok最下方空白处右击并将Acquisition bar on/off关掉状态栏，关掉后再打开。十七、如何建立宏命令的图标？（1）输入edmac命令，edmc编辑宏命令，edmac+空格+宏命令名称输入efpapk.AllAbSNppf点file工具栏保存关闭（2）在菜单栏（目标栏）点右键，选择Add user defined button 出现对话框Add/modify a button with text label(文本)Add/modify a button with an anicon（图标）（3）Abs:自动积分；AbSn基线调整。十八、H-P相关谱（1）new Acetone，标准实验名称：hmbcgpnd（nd表示在采样过程中对C13不去偶）（2）更改参数：输入命令EDSP,将13C改为31PDefaultSaveClose。（3）getprosol（4）更改采样参数sw（f1）=400；ns=2*n，DS=16；NUC1，f1改为31P;O1P,O2P=-50; 更改与脉冲系列相关的参数：CNST13：8.0000(BC,关键参数)凡是带梯度的实验，异核相关相关要设好核的梯度场，输入gradratio（改核后再修改）弹出对话框，显示三个数值，依次填入梯度场中的参数设置中。（5）lock：acetone（6）atma；topshim；rga；zg（7）输入xfb处理，dev32（8）当右侧谱宽出现几万的值的时候，输入sref，回车，close，close。（9）定标Notice：Nucleus1中的nucl的OFF改为所要做的杂核。十九、变温实验（1）50以下，用塑料转子即可，若大于50时，要用陶瓷转子，做高温变温实验时，气流量要设置的大一些，并用惰性气体保护线圈。气流量要大陶瓷转子用惰性气体保护线圈。（若气流量太小，会导致样品管底部温度与上部温度不一致，导致梯度气流量大，等待时间也短。） 放样品先锁场，锁好场后调大气流量，调到气流量脱锁时，再将气流量调小到能锁场即可。