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文档简介

骨髓细胞形态学检查,湖北医药学院附属医院血液科,P266,主要内容,为何要做? 怎么做? 标本取的是否成功? 如何看片? 如何发报告?,骨髓的组成、分布、功能 造血细胞 骨髓基质细胞 组成: 骨髓血管系统 造血微环境 神经 网状组织 分布:骨小梁间的腔隙中 功能:生成RBC(红细胞)、WBC(白细胞)、PLT(血小板) 的场所,也产生淋巴细胞、单核细胞,骨小梁,为何要做?,目的,诊断造血系统疾病,评价这些疾病疗效、判断预后。,辅助诊断某些疾病 如肿瘤的骨髓转移,脾功能亢进等,提高某些疾病的诊断率 如寄生虫、红斑狼疮细胞及细菌培养等,适应症,血细胞成分质和/或量异常.,不明原因发热,肝、脾、淋巴结肿大、骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加等。,化疗后的疗效观察,其他:染色体核型分析、微生物及寄生虫学检查等,禁忌症,由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病如血友病者、局部皮肤有炎症或局部骨髓炎者应列为禁忌。,妊娠晚期作骨髓穿刺术应慎重。,如何取得标本,1.选取部位 首选部位:髂后上棘 病人翻身困难时:髂前上棘 其他部位不成功时:胸骨 其他部位:小儿可选胫骨粗 隆;病变部位,2.穿刺抽吸,首选,骨髓腔小,易失败 常用于翻身困难,需 多部位穿刺等情况,人体骨髓造血功能 最旺盛的部位。部 位危险,在其他常 规部位穿刺不成功 时用,1,2,3,4,如何保证标本采集质量,1. 穿刺术必须严格无菌操作,2. 骨髓抽取量不宜过多(0.2ml),3. 出现干抽时,应行骨髓活检,4. 对疑难病例需多部位穿刺,5.死亡病例若需作骨穿明确诊断时应在死亡后半小时内进行,如何判断取材是否满意,抽取时:哎哟哟!疼疼疼!,抽出后:察言观色 可见到淡黄色骨髓小粒或油滴,镜下观: 涂片检查有骨髓特有的细胞(如浆细胞、网状细胞、巨核细胞等)。 含幼稚细胞,杆状核多于分叶核。,骨髓象检查,取材满意的指标:骨髓涂片上有较多的骨髓小粒、幼 粒细胞、幼红细胞和巨核细胞,并 可有少许非造血细胞,杆状核与分 叶核里粒细胞比值大雨血片中的比 值,骨髓中有核细胞数大于外周血,取材失败的判断:骨髓部分稀释:骨髓小粒/油滴少; 骨髓特有细胞少;有核细胞少;成 熟细胞和幼稚细胞比值大于3/5 骨髓完全稀释:与血片完全一样,涂片良好的指标:片膜厚薄适当、均匀,有头、体、尾 三部分,尾部呈锯齿状,上下边缘整 齐、留有一定空间,镜下见各类有核 细胞分布均匀,成熟红细胞既不重叠, 也不过度分散、皱缩(1.5cm3cm),染色良好的指标:片中无染料沉渣,细胞染色均匀、深 浅适当、色彩鲜明、颜色正确,成熟 红细胞染浅红色。,骨髓象检查,网状细胞,浆细胞,巨核细胞,如何看片?,低倍镜 油镜,1. 骨髓涂片的质量 :取材是否满意, 涂片、染色是否良好 2. 有核细胞增生情况 3. 计数全片巨核细胞数 4. 涂片边缘和尾部 :观察有无体积较大细胞 或成堆分布的异常细胞,骨髓象检查, 低倍镜(100倍)检查,低倍镜检查,判断有核细胞增生程度:通常以骨髓中有核细胞:成熟红细胞的比值来反映。 骨髓有核细胞增生程度五级估计标准 增生程度数 有核细胞: 有核细胞均数 / 常见病例 成熟红细胞 (高倍镜视野) 极度活跃 1:1 100 各种白血病 明显活跃 1:10 50100 各种白血病、增生性贫血 增生活跃 1:20 2050 正常骨髓象、某些贫血 增生减低 1:50 510 再生障碍性贫血(慢性型) 增生极度减低 1:200 5 再生障碍性贫血(急性型),骨髓增生程度分级(高倍镜),极度减低 15/HP,增生减低 520/HP,增生活跃 2050/HP,明显活跃 50100/HP,极度活跃 100/HP,观察巨核细胞,骨髓转移癌高倍镜下观,观察特殊细胞及寄生虫,骨髓转移癌油浸镜下观,黑热病,利什曼原虫,疟疾,疟原虫,丝虫病,骨髓象检查,各细胞系形态学观察 观察各细胞系的增生程度 2. 各细胞系各阶段的相对比例 3. 各种细胞(包括成熟阶段)的形态、染色是否正常 4. 非造血细胞的数量、形态以及有无血液寄生虫, 油镜(1000倍)检查,油镜检查部位选择,油浸镜检查选择区域的比较,血细胞发育 形态学演变的一般规律,如何填写报告,、填写检查报告 1.骨髓增生程度; 2.各系统之间及同一系统内各阶段细胞的比例关系; 3.单个核细胞形态有无异常; 4.有无正常骨髓片中不应该出现的异常细胞或寄生虫; 5.根据结果,提出参考意见。,正常骨髓象具备四项条件: 有核细胞增生活跃; 各系、各阶段有核细胞所占百分比基本在正常参考值范围内; 各种血细胞形态无明显异常; 无寄生虫和明显异常细胞。,正常骨髓象 有核细胞增生:活跃,粒/红比例为24:1 粒细胞系:占全部有核细胞的5060左右,其中原粒细胞1,早幼粒细胞5,分叶核杆状核,嗜碱性粒细胞1,嗜酸性粒细胞5%(多为成熟型) 红细胞系:幼红细胞占有核细胞20,其中原红细胞1,早幼红细胞5,中、晚幼红细胞各10。 巨核细胞系:在一张骨髓片上可见巨核细胞735个,主要是颗粒性和产生血小板性巨核细胞,血小板散在或成簇 淋巴细胞系:占20,小儿可占40。主要是成熟淋巴细胞 单核细胞及其他细胞:单核细胞一般5、浆细胞一般2(均多为成熟型)。其他少量的非造血细胞成分(网状细胞、内皮细胞组织嗜碱细胞等)。无异常细胞及寄生虫,填写诊断意见 肯定性诊断 符合性诊断 疑似性诊断 阴性(或排除性)诊断 描述骨髓象特征,肯定性诊断: 骨髓呈特异性变化,有特征性细胞,临床表现典型者。如各种白血病、巨幼细胞性贫血、多发性骨髓瘤、骨髓转移癌、寄生虫等。 如:目前骨髓考虑MM,请结合临床,符合性诊断: 血象、骨髓象有形态学改变,可解释临床表现,如缺铁性贫血、溶血性贫血、再障、溶贫、ITP、脾亢、粒缺、慢性白血病等。 如:目前BM呈增生性贫血,请结合骨髓细胞内外铁染色。,疑似性诊断: 骨髓象有部分变化或出现少量异常细胞,仅能提供进一步诊断的线索,临床表现不典型者。必须结合病史及其它有关临床检查才能确诊 。 如:目前BM浆细胞占5%,均为原始浆细胞,成熟红细胞呈缗钱状排列,请结合临床。,排除性诊断: 实验室检查与临床诊断不符。 少用,一般只描述骨髓细胞形态特征。 如临床疑诊原发性血小板减少性紫癜 如:全片见巨核细胞36个,产板好, 散在血小板易见。,描述骨髓象特征 骨髓象有些改变但提不出上述诊断意见,可简单描述其形态学检查的主要特点,并建议动态观察,尽可能提出进一步检查的建议。 如:目前BM中分类不明细胞占 30%, ,请结合临床。,低倍镜观察(取材 涂片 细胞增生程度 巨核细胞 特殊细胞 寄生虫) 油镜观察 骨髓有核细胞分类计数200500个 细胞系形态学观察 粒系 红系 单核系 淋巴系 浆系 其他细胞 计算结果(各细胞系百分比 粒红比值) 观察血片 填写骨髓图文结果报告单,骨髓象分析步骤示意图,要不停的学习才能进步,谢谢你的聆听!,、血细胞的生成,所有的血细胞均起源于共同的造血干细胞 具有高度自我更新的能力,以保持干细胞池数量的恒定,维持机体终身的稳定造血; 具有多向分化的能力,即可向各系列祖细胞分化,然后经过增殖、发育和成熟,成为各系细胞。 造血干细胞:包括全能干细胞(TSC)及由其分化的骨髓系干细胞和淋巴系干细胞。 受造血微环境、造血细胞生长因子和白细胞介素以及神经和体液因子的调控,其中造血微环境最重要。,多能(全能)干细胞,髓系干细胞,淋巴系干细胞,红系祖细胞,粒、单核系祖细胞,嗜酸粒祖细胞,嗜碱粒祖细胞,巨核系祖细胞,T淋巴系祖细胞,B淋巴系祖细胞,原红,早幼红,中幼红,晚幼红,网织红,红细胞,原粒,早幼粒,中幼粒,晚幼粒,杆状核,原单,幼单,单核细胞,原巨,幼巨,颗粒巨,产板巨,血小板,T原淋,T幼淋,T淋巴细胞,B原淋,B幼淋,B淋巴细胞,浆细胞,(同上中性粒细胞),分叶核,组织细胞,原免疫细胞,原浆细胞,幼浆细胞,红细胞生成素 (EPO),(同上中性粒细胞),粒单核系集落刺激因子 (GM-CSF),巨核细胞集落刺激因子 (Meg-CSF),血小板生成素(TPO),丝裂原 抗原,造血干细胞的分化及增殖示意图,胞体直径10-20 m,圆形或类圆形。胞核较大呈淡紫红色,圆形或类圆形,居中或略偏位。核染色质呈细颗粒状,排列均匀,如薄沙分布,无浓集。核仁2-5个,较小,清楚,呈淡蓝色。胞质量较少,呈透明的天蓝色或深蓝色,胞质内多无颗粒。,原粒细胞型,原粒细胞型,根据颗粒有无等特征将原粒细胞分为型和型: 型为典型的原粒细胞,胞质中无颗粒; 型除具有型的特点外,胞质中有少许颗粒。,胞体直径12-25m,较原粒细胞大,圆形或椭圆形,有时可见瘤状突起。胞核大,呈圆形椭圆形或一侧凹陷,核常偏于一侧或位于中央。核染色质开始聚集,较原粒细胞粗,核仁清晰可见。胞质内含有数量不等,大小形态不一的紫红色嗜天青颗粒。,早幼粒细胞,胞体直径10-20 m ,圆形。胞核椭圆形,一侧开始为扁平或略凹陷,其凹陷程度与假设圆形核直径之比常小于1/2,核常偏于一侧,呈紫红色。核染色质聚集呈索块状,核仁常无。胞质量多,呈淡红、淡蓝色;内含细小,大小较一致的淡紫红色中性颗粒。,中性中幼粒细胞,胞体直径15-20 m,较中性中幼粒细胞略大,圆形。胞核与中性中幼粒细胞相似。胞质内满布粗大,大小一致,橘红色的嗜酸性颗粒。,嗜酸性中幼粒细胞,胞体直径10-15 m比中性中幼粒细胞略小,圆形。胞核椭圆形,轮廓不清,核染色质较模糊。胞质及核上内含有少量粗大,大小形态不一的深紫红色嗜碱性颗粒。,嗜碱性中幼粒细胞,粒细胞胞质中四种颗粒的鉴别,中性晚幼粒细胞,胞体直径10-16 m,胞核明显凹陷呈肾形、马蹄形、半月型,其凹陷程度与假设圆形核直径之比为1/23/4。核常偏于一侧,核染色质粗糙呈小块,出现副染色质,核仁消失。,嗜酸性晚幼粒细胞,胞体直径10-16 m,胞质内充满嗜酸性颗粒,A颗粒常无。其他方面基本同中性晚幼粒细胞。,嗜碱性晚粒细胞,胞体直径10-14 m,胞核呈肾形,轮廓不清,胞质内及核上可见嗜碱性颗粒。,中性杆状核粒细胞,胞体直径10-15 m,胞核凹陷更加明显,与假设圆形核直径之比大于3/4,形态弯曲呈粗细均匀的带状。核染色质粗糙呈块状,副染色质明显、透亮,核两端钝圆呈深紫红色。,嗜酸性杆状核粒细胞,胞体直径11-16 m,胞核与中性杆状核粒细胞相似,胞质中充满嗜酸性颗粒。,嗜碱性杆状核粒细胞,胞体直径10-12 m,胞核呈模糊杆状,胞质内及核上有少许嗜碱性颗粒。,中性分叶核粒细胞,胞体直径10-14 m, 胞体呈圆形,胞核分叶状,常分为2-5叶,叶与叶之间有细丝相连或完全断开。胞质丰富,呈淡红色,浆内充满中性颗粒。分叶核粒细胞和杆状核粒细胞的另一种划分标准是核桥(即核最窄处小于最宽处的1/3)。,嗜酸性分叶核粒细胞,胞体直径11-16 m,胞体直径胞核多分为两叶,胞质内充满嗜酸性颗粒。,嗜碱性分叶核粒细胞,胞体直径10-12m,胞核可为3-4叶或分叶不明显,胞质内及核上有少许嗜碱性颗粒。,原红细胞,胞体直径15-25 m,圆形或椭圆形,边缘常有瘤状突起。胞核圆形,居中或偏于一侧,核染色质呈紫红色颗粒状,核仁1-3个。胞质少,深蓝色且不透明,有油画蓝感,核周常形成淡染区,胞质中无颗粒。,早幼红细胞,胞体直径10-18 m,圆形或椭圆形。胞核圆形,居中或稍偏位,核染色质浓集呈粗颗粒状,核仁模糊或消失。胞质量比原红细胞稍增多,为不透明蓝色或深蓝色,胞质内无颗粒。瘤状突起和核周淡染区仍可见。,中幼红细胞,胞体直径8-15 m ,圆形。胞核圆形,居中,占细胞1/2。核染色质凝聚成条索状或块状。核仁完全消失。胞质量多,无颗粒。由于血红蛋白形成增多而嗜碱性物质逐渐减少,胞质呈不同程度的嗜多色性(蓝灰色,灰红色)。,晚幼红细胞,胞体直径7-10 m ,圆形。胞核圆形,占细胞1/2以下,核染色质凝聚呈紫黑色的团块状(称为碳核),胞质量多,淡红色或灰红色,无颗粒。,成熟红细胞,胞体平均直径7.2 m,呈双凹圆盘状,无核,胞质淡红色,中央部分为淡染区。,原单核细胞,胞体直径14-25 m,圆形或不规则,有扭曲、折叠,有时可有伪足。胞核圆形,稍凹陷或不规则,可有折叠、扭曲。核染色质疏松纤细,呈细丝网状,为淡紫红色。核仁1-3个,大而清楚。胞质较其他原始细胞多,呈灰蓝色不透明毛玻璃样,其中可有空泡,颗粒无或少见。,幼单核细胞,胞体直径15-25 m ,圆形或不规则,有时可有伪足。胞核常不规则,呈扭曲、折叠状,或有凹陷切迹。核染色质开始聚集呈丝网状,核仁有或消失。胞质增多,呈灰蓝色不透明,可见空泡和细小紫红色的嗜天青颗粒。,单核细胞,胞体直径12-20 m,圆形或不规则,常可见伪足。胞核不规则,常呈肾形,马蹄形,或S形等。核染色质疏松,可呈条索状,小块状。胞质量多,呈灰蓝色半透明毛玻璃状。胞质内可见细小,分布均匀的紫红色颗粒,胞质内常有空泡。,中性中幼粒细胞和单核细胞的鉴别,原始淋巴细胞,胞体直径10-18 m,圆形或类圆形。胞核圆形或类圆形,核膜厚,核染色质细致呈颗粒状,核仁1-2个,清楚,染成淡蓝色。胞质很少,淡蓝色,无颗粒,近核处可有一透明区。,幼淋巴细胞,胞体直径10-16 m,圆形或类圆形。胞核圆形或类圆形,核仁模糊或消失,核染色质较原淋细胞粗。胞质少,淡蓝色透明,偶有少许嗜天青颗粒。,淋巴细胞,(1)大淋巴细胞:胞体直径12-15 m 。胞核椭圆形,常偏于一侧;核染色质致密均匀呈深紫红色;核仁消失。胞质较多,呈清澈的淡蓝色,常有少许嗜天青颗粒。 (2)小淋巴细胞:胞体直径6-9 m,圆形或类圆形。胞核类圆形或有小切迹;核染色质紧密呈大块状,核仁消失。胞质量极少,呈淡蓝色,常无颗粒。,原浆细胞,胞体直径12-25 m 。圆形或椭圆形。胞核圆形,占胞体的1/2以上,偏位或居中;核染色质呈粗颗粒网状,染呈紫红色;核仁25个。胞质量多,呈深蓝色、不透明,有核旁淡染区,无颗粒,可有空泡。,幼浆细胞,胞体直径12-16 m 。常呈椭圆形。胞核圆形,常偏位;核染色质较原浆细胞粗,染呈紫红色;胞质丰富,呈深蓝色、不透明,常有空泡及核旁半月形淡染区,偶有少许嗜天青颗粒。,浆细胞,胞体大小不一,

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