《厌氧性细菌》PPT课件.ppt

第十三章 厌氧性细菌 Anaerobic bacteria,概 述,厌氧性细菌(anaerobic bacteria)是必须在无氧环境下才能生长繁殖。 根据能否形成芽胞，可分为： 1.厌氧芽胞梭菌属 2.无芽胞厌氧菌,第十三章 厌氧性细菌 Anaerobic bacteria,厌氧芽胞梭菌 无芽胞厌氧菌 分布 自然界，人/动物的肠道 人体 正常菌群的主要构成部分 （口腔、皮肤、肠道、上呼吸道、 泌尿生殖道等） 感染源 外源性感染 内源性感染 深部伤口 机体的屏障作用受到破坏（皮肤、粘膜） 创伤 如：手术、拔牙、肠穿孔、导管、插管。 毒素食物中毒 机体整体免疫功能下降. 如:慢性消耗性疾病、癌症、烧伤、手术 化疗、放疗、长期激素免疫抑制剂治 疗、AIDS等 局部形成厌氧微环境 如：组织缺血坏死、与需氧菌共同生长 造成局部Eh下降，有利于厌氧菌生长。 正常菌群失调 如：长期使用广谱抗生素。,第十三章 厌氧性细菌 Anaerobic bacteria,第十三章 厌氧性细菌 Anaerobic bacteria,厌氧芽胞梭菌 无芽胞厌氧菌 致病性 致病性强 条件致病菌 以外毒素为主要致病物质 是内源性感染、医院内感染的 主要感染源 临床诊断 临床症状较典型 临床症状不典型 细菌学检查意义不大 细菌学检查有意义 定性/定量/药物敏感试验 免疫力 类毒素 防不胜防！涉及因素众多 /防治 抗毒素 合理使用抗生素 抗生素 全面提高患者免疫力 趋势 逐年减少 日趋增多,概述,第一节 厌氧芽胞梭菌属 Clostridium,严格厌氧 革兰染色阳性 形成芽胞，芽孢直径比菌体粗，使菌体膨胀成梭状,破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌,一、 破伤风梭菌 C. tetani,破伤风的病原菌 存在人和动物肠道，由粪便污染环境以芽胞形式长期存在 当机体受到外伤，创口被污染，或新生儿接生时使用不洁 用具切断脐带，破伤风梭菌侵入伤口发芽繁殖，释放毒素 发病后机体呈强直性痉挛、抽搐、可因窒息或呼吸衰竭死亡 称破伤风，或“脐带风”。,形态与染色,菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜 顶端芽孢形成芽胞后，使细菌呈鼓槌状 革兰染色阳性,一、生物学性状,一、 破伤风梭菌 C. tetani,芽胞染色,革兰染色,鞭毛染色,芽胞扫描电镜,培养特性和生化反应,生物学性状,严格厌氧 血平板上，爬行生长，有b溶血 不发酵糖类，不分解蛋白质,抵抗力,芽胞抵抗力很强 7580 10min仍保持活力 100 1小时可完全被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数十年,一、 破伤风梭菌 C. tetani,二、致病性与免疫性,一、 破伤风梭菌 C. tetani,致病条件,伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深(如刺伤)，有泥土或异物污染 大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织缺血 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口 该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作用完全 有赖于病菌所产生的毒素,致病条件,致病物质,破伤风溶血素(tetanolysin) 破伤风痉挛毒素(tetanospasmin),一、 破伤风梭菌 C. tetani,破伤风痉挛毒素(tetanospasmin),致病物质,多肽链（160kD） 细菌蛋白酶切割 重链(B链,100kD)-S S-轻链(A链, 55kD） 受体：神经细胞表面 经节苷脂结合 毒性作用： 封闭抑制性神经突触 阻止释放抑制性介质: g-氨基丁酸、甘氨酸,一、 破伤风梭菌 C. tetani,1.与神经系统的结合： 毒素对脑干神经和脊髓前角神经细胞有高度亲和力，结合非常牢固，一旦结合，抗毒素便不能中和毒素。 毒素重链识别神经肌肉结点处运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入细胞内形成小泡。 2.内在化作用 小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统。,破伤风痉挛毒素作用机制,一、 破伤风梭菌 C. tetani,3.膜的转位 通过重链N端的介导产生膜的转位，使轻链进入胞质溶胶。 4.胞质溶胶中作用靶的 改变 轻链发挥毒性作用，阻止抑制性神经介质-氨基丁酸的释放，使肌肉活动的兴奋与抑制失调，造成强直性痉挛。,破伤风痉挛毒素作用机制,一、 破伤风梭菌 C. tetani,破伤风痉挛毒素(tetanospasmin),致病物质,牙关紧闭,脸部苦笑,角弓反张,一、 破伤风梭菌 C. tetani,免疫性,主要依靠抗毒素的中和作用，但一般不会获得牢固的免疫力 毒性很强：致死量的毒素还不足以产生抗体 抗毒素与游离的痉挛毒素结合，可阻断毒素进入易感细胞 但抗毒素对已与神经细胞受体结合的毒素无中和保护作用 获得抗毒素的方法： 主动免疫 类毒素 被动免疫 抗毒素,一、 破伤风梭菌 C. tetani,一般不进行涂片、镜检和分离培养。 典型的症状和病史即可作出诊断。,三、微生物学检查法,一、 破伤风梭菌 C. tetani,四、防治原则,一、 破伤风梭菌 C. tetani,预防原则： 预防接种类毒素（白百破三联菌苗DPT） 正确处理创口、清创扩创不造成厌氧环境 早期、足量注射破伤风抗毒素(tetanus antitoxin,TAT) 同时注射类毒素，效果更好！,二、产气荚膜梭菌C. Perfringens,形态与染色,两端几乎平切的革兰阳性粗大杆菌 芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体 无鞭毛 在体内有明显的荚膜,产气荚膜梭菌:荚膜,一、生物学性状,培养特性和生化反应,严格厌氧 最适生长温度45，繁殖周期为8分钟 血琼脂平板上，双层溶血环,内环完全溶血 毒素 外环不完全溶血 毒素,二、产气荚膜梭菌C. Perfringens,培养特性和生化反应,代谢十分活跃，分解多种糖 牛奶培养基中，可出现“汹涌发酵”(stormy fermentation),产气荚膜梭菌,破伤风梭菌,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,根据4种主要毒素（、）的产生情况，可分为5个毒素型。 对人致病的主要为A型。,分型,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,二、致病性与免疫性,致病物质,荚膜 外毒素,致病性,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,创口 污染（芽胞细菌） 迅速繁殖， 产生多种毒素和酶 a毒素 有利于细胞侵袭 透明质酸酶 胶原酶 损伤组织、肌肉 发酵肌肉/组织中的糖类 产气，造成气肿，挤压组织和血管,所致疾病 气性坏疽,致病性,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,所致疾病 气性坏疽,致病性,局 部 全身中毒症状,组织坏死恶臭 水肿、压迫剧烈胀疼 水气夹杂触摸、捻发感,不及时治疗,毒血症（毒素和组织坏死的毒性产物吸收入血） 心率减慢，血压下降、休克，死亡率可达30%,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,所致疾病 食物中毒,致病性,食入被 A型某些菌株污染的食物 肠毒素蛋白质、不耐热、耐受消化道蛋白酶作用 主要症状：腹痛、腹泻，12天自愈,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,直接涂片镜检极有价值的快速诊断,发现G+大杆菌、有荚膜 白细胞甚少，且形态不典型毒素作用，无趋化作用） 伴有其他杂菌,动物试验,0.5ml细菌培养液 尾 静脉 小鼠 10分钟处死，37培养58小时 动物躯体膨胀 / 泡沫肝/ 肝涂片：有荚膜的粗大杆菌,创口深部取材 涂片GS染色,三、微生物学检查法,二、产气荚膜梭菌 C. Perfringens,伤口清洗、处理 切除局部坏死组织 截肢以防止病变扩散，引起全身中毒 抗生素、抗血清治疗 辅以高压氧舱口,四、防治原则,三、肉毒梭菌 C. botulinum,一、生物学性状,形态与染色,G+粗大杆菌 芽胞粗于菌体，呈网球拍状 有鞭毛，无荚膜,三、肉毒梭菌 C. botulinum,二、致病性与免疫性,致病物质 肉毒毒素(botulin),已知最毒的神经外毒素：毒性比KCN强一万倍 对人致死量0.1mg，2mg纯结晶的肉毒毒素能杀死2亿只小鼠 细菌繁殖过程中，由噬菌体编码合成 细菌死亡自溶，游离释放肉毒毒素 不耐热，煮沸1分钟即被破坏,致病性,三、肉毒梭菌 C. botulinum,作用机理,前体分子存在，可稳定存在于外环境和胃肠道 复合物进入小肠在碱性情况下解离，被吸收进入血循环,毒素经内化作用进入细胞内由细胞膜形成的小泡中， 留在神经肌肉接点处 作用于外周神经肌肉接头处，抑制外周神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹,致病性,三、肉毒梭菌 C. botulinum,肉毒毒素作用机理,三、肉毒梭菌 C. botulinum,所致疾病 食物中毒,食品被细菌芽胞污染 制备罐头时未彻底灭菌 芽胞在罐头等密封厌氧环境下发芽繁殖，产生大量外毒素 肉毒毒素（前体毒素）,食用前，又未经加热；食入后抵抗胃酸作用，达到肠道。 无毒的前体毒素经胰蛋白酶分解，解离出有毒性的肉毒毒素。,致病条件,三、肉毒梭菌 C. botulinum,所致疾病 食物中毒,单纯毒素性食物中毒，非细菌感染性 胃肠道症状很少见 主要表现为运动神经末梢麻痹，死于呼吸困难、衰竭。,致病特点,三、肉毒梭菌 C. botulinum,所致疾病 婴儿肉毒病,小于1岁婴儿(肠道尚未建立正常菌群微生态环境) (如蜂蜜-含有肉毒杆菌芽胞) 出芽繁殖、产生毒素 感染性中毒(便闭、啼哭无力等),三、肉毒梭菌 C. botulinum,三、微生物学检查法,食物 呕吐物 100 1小时 杀死非芽胞杂菌 毒素检测 芽胞 肉毒杆菌 厌氧培养 动物试验 毒力保护试验 分离细菌 毒力试验,四、防治原则,三、肉毒梭菌 C. botulinum,加强食品卫生管理和监督，提高防范意识。 尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素。,新生儿肠道中正常菌群，可因长期使用抗生素引起的伪膜性肠炎。 G粗大杆菌，有鞭毛，有芽胞。,四、艰难梭菌 C. difficile,一、生物学性状,四、艰难梭菌 C. difficile,肠道正常菌群 艰难梭菌(占小部分) 其他细菌(拮抗作用) 长期口服 广谱抗生素 耐药菌(被选择性繁殖) 敏感菌(被杀灭) 菌群失调 艰难梭菌： 大量繁殖、 产生 A毒素-肠毒素 B毒素-细胞毒素 假膜性肠炎：腹痛、腹泻，粪便排出假膜 全身中毒严重， 常致死亡,二、致病性与免疫性,四、艰难梭菌 C. difficile,四、防治原则,停止服用：氨苄青霉素、头孢菌素、氯林可霉素、 红霉素等艰梭菌耐药性抗生素 改用：万古霉素、灭滴灵等药物 并进行调节正常菌群的活菌制剂治疗,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,属人体内的正常菌群，包括革兰阳性和革兰阴性的球菌和杆菌 在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染,与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,一、主要种类、性状和在感染中的作用,1.革兰阴性厌氧杆菌 脆弱类杆菌（B. fragilis）：临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株。 韦荣菌属最重要，咽喉部主要厌氧菌，常为混合感染菌之一。,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,一、生物学性状,一、主要种类、性状和在感染中的作用,2.革兰阳性厌氧球菌 消化链球菌属：在临床厌氧菌分离株 中仅次于脆弱类杆菌，主要寄居于阴道。 丙酸杆菌：能发酵糖类产生丙酸。 痤疮丙酸杆菌（P. acnes） 双歧杆菌属：正常肠道菌群，在大肠 中起重要的调节作用。 真杆菌属,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,一、生物学性状,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,二、致病性与免疫性,致病物质,致病条件,致病性不强 无明显的致病物质,局部屏障被破坏 局部形成厌氧环境 正常菌群失调 机体免疫力下降,如：手术、拔牙、肠穿孔、导管、插管。 如： 组织缺血坏死、与需氧菌共同生长 如：长期使用广谱抗生素。 如: 慢性消耗性疾病、癌症、烧伤、手术、化疗、放疗、长期激素免疫抑制剂治疗、AIDS等,第二节 无芽胞厌氧菌 C. difficile,二、致病性与免疫性,致病特点,致病性不强无特定病型，大多为局部炎症，脓肿，组织坏死 感染部位可遍及全身 常规细菌培养呈阴性 常与需氧菌/兼性厌氧菌混合感染 分泌物/脓肿穿刺液-带血性；黑色混浊、恶臭 使用氨基糖甙类抗生素(链霉素、卡那霉素、庆大霉素)长期治疗无效,（三）所致疾病 败血症 中枢神经系统感染 脑脓肿 口腔与牙齿感染 呼吸道感染 腹部和会阴部感染 女性生殖道感染,第二节 无芽胞厌氧菌 C