巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.ppt

第十章 巴比妥及苯并二氮杂卓类 镇静催眠药物的分析,第一节 巴比妥类药物的分析,一、巴比妥类药物基本结构与主要性质,环状丙二酰脲类化合物,(一)基本结构,母核部分环状丙二酰脲基团决定巴比妥类药物的共性。 取代基部分区别各种巴比妥类药物。,1,3-二酰亚胺基团,5,5-取代的巴比妥类药物,1,5,5-取代的巴比妥类药物,5,5-取代的硫代巴比妥类药物,典型药物,(Phenylbarbital),(barbital),亚硝基化反应 甲醛-硫酸反应,(Secobarbital),戊巴比妥,(Pentobarbital),仲戊基,使碘、溴或高锰酸钾褪色,(thiopental sodium),仲戊基,PbS,(二)主要性质,性状白色结晶或结晶性粉末 溶解度微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂,钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂,1.弱酸性 (pKa:7.38.4),发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离，与碱成盐。,一 级 电 离,二级电离,烯醇互变,2.水解反应,具氨臭味，可使红石蕊试纸变蓝,其Na盐室温下就可以发生反应,3.与金属离子反应,(1)与银盐的反应,碳酸钠的目的是为形成钠盐而溶解。,吡啶,紫色溶液,紫色,吡啶,绿色,(2)与铜盐的反应,（3）与钴盐的反应,反应条件： 无水：所用试剂均应不含水分 有机碱：异丙胺,(4)与汞盐的反应,巴比妥类药物+汞盐白色（可溶于氨试液）,4.香草醛反应(Vanillin),戊巴比妥鉴别： 取戊巴比妥10mg，加香草醛约10mg和硫酸2ml，混合后在水浴上加热2min，显棕红色。放冷，小心加入乙醇5ml，即显紫色并变成蓝色。,5.紫外吸收光谱特征,240nm,255nm,A.H2SO4液(0.05mol/L,未电离) B.pH9.9缓冲液(一级电离) C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离),1,5,5-三取代巴比妥类药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。,巴比妥类药物的紫外吸收光谱 特征和其电离的程度有关,硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收,7.显微结晶,药物本身晶形,反应产物晶形,6.薄层色谱行为特征,(一)丙二酰脲类的鉴别试验,取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。 取供试品约50mg，加吡啶溶液(110)5 ml，溶解后，加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。,二、鉴别试验,苯巴比妥 Ch.P.（2010） 【鉴别】（1）本品显丙二酰脲类的鉴别反应 （附录）,1. 与银盐的反应：取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10m1，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。,附录 一般鉴别试验 丙二酰脲类反应,2. 与铜盐的反应：取供试品约50mg，加吡啶溶液（110）5m1，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜4g，水90ml溶解后，加吡啶30m1，即得）1m1，即显紫色或生成紫色沉淀。,(二)测定熔点,直接测定巴比妥类药物的mp 测定衍生物的mp 巴比妥类药物的钠盐 水溶液酸化，析出游离巴比妥类药物，沉淀、过滤、干燥，测mp,苯巴比妥钠的鉴别 ChP（2010） 取本品约0.5 g，加水5 ml溶解后，加稍过量稀盐酸，即析出白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用水洗净，在105干燥后，依法测定，熔点为174-178。,(三)利用特殊取代基或元素的鉴别试验,利用不饱和取代基的鉴别试验(司可巴比妥钠) 利用芳环取代基的鉴别试验(苯巴比妥钠) 硫色素反应(硫代巴比妥类),1.不饱和取代基（司可巴比妥钠的鉴别）,（3）与甲醛-硫酸反应,无此现象,玫瑰红,接界面,紫红色,橙黄,橙红,（1）硝化反应 含芳香取代基的巴比妥类药物，如苯巴比妥或其钠盐，与硝酸钾和硫酸共热，可发生硝化反应，生成黄色硝基化合物。,（2）与亚硝酸钠-硫酸反应,2. 苯环取代基的反应（苯巴比妥的鉴别）,3.硫元素的反应（硫代巴比妥类的鉴别）,NaOH,S2- + Pb2+PbS黑,三、特殊杂质试验,1. 酸度 2. 乙醇溶液的澄清度 3. 中性或碱性物质 提取重量法,四、含量测定,(一) 银量法,(二) 溴量法,eg:司可巴比妥钠测定 分子量260.27,取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。,原理：加成反应 测定对象：司可巴比妥 滴定类型：氧化还原滴定 注意事项 （1）操作中要防止溴和碘的逸失 （2）平行条件进行空白试验可减少溴和碘逸失 带来的误差。,(定量过量),(三)酸碱滴定法,1. 在水醇混合溶剂中的滴定法 溶剂：水醇 作用：增强溶解度、避免弱酸盐产物的水解 滴定剂：NaOH 指示剂：麝香草酚酞 终点颜色：淡蓝色,2.在胶束水溶液中进行的滴定,正胶束,溴化十六烷基三甲基苄铵 Cetyltrimethylbenzylammonium bromide，CTMA 氯化四癸基二甲基苄铵 Tetradecyldimethylbenzylammonium chloride，TDBA,3. 非水溶液滴定法 原理：巴比妥类药物在非水溶液中的酸性增强，当用碱性滴定液滴定时，终点较为明显。 溶剂：二甲基甲酰胺 滴定剂：甲醇钠（钾） 指示剂：麝香草酚蓝,(四) 紫外分光光度法,直接测定的UV法 提取分离后的UV法,USP法测定苯巴比妥含量：,巴比妥类药物适量，加水使其溶解后，加酸酸化，用三氯甲烷提取巴比妥类药物，三氯甲烷提取液加入pH7.27.5的缓冲液，振摇，分离弃去水相缓冲液层，再用氢氧化钠自三氯甲烷中提取巴比妥类药物，调节碱提取液的pH值，然后选用相应的吸收波长进行测定。,(五) HPLC法 适用于复方制剂中巴比妥类药物的分析。,本节小结,1掌握巴比妥类药物的化学结构与分析方法间的关系,熟悉具有代表性的常用巴比妥类药物。 2掌握巴比妥类药物的化学性质与常用鉴别试验方法及其原理。（一般鉴别与专属鉴别） 3熟悉巴比妥类药物常用含量测定的方法及其原理。着重掌握银量法、溴量法。,练习题 巴比妥类药物具有的特性为： 弱碱性 弱酸性 C. 易与重金属离子络合 D. 易水解 E. 具有紫外特征吸收,2. 硫喷妥钠与铜盐的鉴别反应生成物为: A. 紫色 B. 绿色 C. 蓝色 D. 黄色 E. 紫堇色,3.巴比妥类药物的鉴别方法有 A、与钡盐反应生成白色化合物 B、与镁盐反应生成红色化合物 C、与银盐反应生成白色沉淀 D、与铜盐反应生成有色产物 E、与氢氧化钠反应生成白色沉淀,4. 凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，如司可巴比妥钠，中国药典采用的方法是: A. 酸量法 B. 碱量法 C. 银量法 D. 溴量法 E. 比色法,5. 与NaNO2H2SO4反应生成橙黄至橙红色产物的药物是: A. 苯巴比妥 B. 司可巴比妥 C. 巴比妥 D. 硫喷妥钠 E. 硫酸奎宁,6. 中国药典（2010年版）采用AgNO3滴定液（0.1 mol/L）滴定法测定苯巴比妥的含量时，指示终点的方法应是: A. K2CrO4溶液 B. 荧光黄指示液 C. Fe(III)盐指示液 D. 电位法指示终点法 E. 永停滴定法,7. 中国药典（2010年版）采用银量法测定苯巴比妥片剂时，应选用的试剂有: A. 甲醇 B. AgNO3 C. 3无水碳酸钠溶液 D. 终点指示液 E. KSCN,第二节 苯并二氮杂卓类药物的分析,一、结构特征与典型药物,地西泮,卓,奥沙西泮,理化性质,（1）二氮杂卓环为七元环，环上氮原子具有强碱性， 苯基的取代使碱性降低，可进行非水滴定法测定； （2）UV吸收，用于含量测定； （3）环比较稳定，在强酸性下水解，形成相应的二苯 甲酮衍生物，可用于鉴别和比色测定。 （氯氮卓水解生成芳伯胺基）。 （4）本品多为游离碱，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇 和氯仿中。,(一) 化学鉴别试验 1. 沉淀反应 氯氮卓 橙红色沉淀 阿普唑仑 盐酸氟西泮 KBiI4 也生成橙红色沉淀 氯硝西泮 放置后，沉淀颜色变深， 因此可以相互区别。,二、鉴别试验,阿普唑仑 + 遇硅钨酸 白色沉淀，药典中也用于鉴别。,2.水解后呈芳伯胺反应 氯氮卓和奥沙西泮，其反应如下：,3.硫酸-荧光反应 本类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显不同颜色的荧光。例如：,地西泮 黄绿色 黄色 氯氮卓 黄色 紫色 艾司唑仑 + H2SO4 亮绿色 + 稀硫酸 天蓝色 硝西泮 淡蓝色 蓝绿色 奥沙西泮 淡黄绿色,4.氯化物的反应 本类药物多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，显氯化物反应。Ch.P用于地西泮和三唑仑药物的鉴别。 5. 氯化铜焰色反应 分子结构中含有氯元素的药物，在铜网上燃烧 发出CuCl2绿色火焰。此反应药典未用于本类药物鉴别。,（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱 药物名称 溶 剂 浓度（g/ml） max（nm） A 地西泮 0.5%硫酸甲醇溶液 5 242 约0.51 282 约0.23 366 氯氮卓 盐酸溶液(91000) 7 245,308 阿普唑仑 盐酸溶液(91000) 12 264 盐酸氟西泮 硫酸甲醇(136) 10 2392,2842 比值1.952.50 3622 氯硝西泮 0.5%硫酸甲醇溶液 10 2392,3072 奥沙西泮 乙醇 10 229, 3152(较弱) 红外吸收光谱:已用于地西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、盐酸氟西 泮、氯硝西泮和奥沙西泮的鉴别。,（三）TLC法 1.常用的五种苯并二氮杂卓类药物的TLC法 按常规法点样10l于硅胶G薄层板上，以苯-丙酮 （3 ：2）为展开剂,饱和15min，用上行法展开15cm， 挥发溶剂，用稀硫酸喷雾，于105干燥30min，置紫 外灯下检视荧光斑点。,2.酸水解产物的TLC法 利用苯并二氮杂卓类药物经酸水解产生的二苯 甲酮衍生物进行鉴别。由于不同的苯并二氮杂卓类 药物水解后可能会获得相同的二苯甲酮衍生物，因 此本法的专属性较差。,（一）非水溶液滴定法 基本原理,三 含量测定,当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。,BH+A-,+,HClO4,BH+ClO4,+,HA,游离碱类盐,被置换出的弱酸,因此，要根据不同情况采用相应测定条件。,非水碱量法 1. 基本原理：某些有机碱在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定（滴定突跃不明显，难以判断滴定终点），在酸性