GPC凝胶净化系统基础知识.ppt

GPC凝胶净化系统,现状,食品安全、环境保护日益受到关注。 要求仪器更快、更准、更有效。 样品前处理对于保证结果的一致与准确至关重要。,主要内容,凝胶色谱的原理 LabTech GPC Cleanup系统 GPC法规 GPC的应用,凝胶色谱的原理,凝胶色谱： Gel Permeation Chromatography Size Exclusion Chromatography 是根据溶质分子大小进行分离的色谱技术。 柱填料凝胶具有不同尺寸的孔穴，凝胶孔径与分离组分分 子大小相应，当大小不同的组分分子随流动相进入凝胶， 他们进入微孔的程度不同，大分子不能进入孔穴，而分子 越小进入微孔越深。因而保留时间不同。试样中各组分按 分子大小进行洗脱。,凝胶色谱的固定相,凝胶色谱柱的固定相种类很多， 化学组成分为三类 有溶胀性的交联高聚物类的疏水性有机凝胶。代表：交联聚苯乙烯。 水做溶剂的亲水性凝胶，如：交联葡聚糖凝胶、琼脂。 非溶胀性的无机凝胶，如多空硅胶、多孔玻璃,GPC凝胶净化净化柱固定相 EPA推荐： 多空乙烯苯二乙烯苯聚合物 Bio-Breads S-X3 200-400目 排阻极限：2000,凝胶色谱的流动相,原则： 在选择溶剂时，应该选择与仪器、净化柱兼容的溶剂及样品 溶解性相符的溶剂。 原因： 选择性仅与分子大小的差异有关。要改进分离度只能靠凝胶 的孔径大小和孔径分布的最佳化来实现。试样的分离并不依 赖于溶剂与试样间的相互作用力（与一般色谱的不同）.,什么是“凝胶净化系统”,输液泵将流动相与样品带入净化柱，试样中各组分按照分子大小顺序洗脱，大分子油脂、色素、生物碱、聚合物先淋洗出来农药等较小分子后淋洗出来，检测器检测出信号，组分收集器收集含有目标组分的洗脱液。,输液泵 进样阀 （自动进样器） GPC净化柱 馏分收集器 检测器,LabTech GPC凝胶净化系统,GPC Cleanup 600,GPC Cleanup 800,仪器特点 高性能输液泵 多波长紫外检测器 可供选择多种收集管架的馏分收集器 集进样与收集于一体的自动液体处理器 多种收集模式,GPC净化柱,填料：Bio-Beads SX-3 200-400目（EPA 3640） 30g, 50g, 60g、70g 净化柱：不锈钢柱、玻璃柱 尺寸：25*300，25*400，25*500，25*700mm（可定制）,灵活多变的GPC工作站,GPC工作示意图,L,S,M,溶剂,废液,馏分,GPC净化适用法规及推荐方法,US EPA SW-846 方法3640A FDA杀虫剂分析方法 AOAC 分析方法 DFG S19,GPC净化适用法规及推荐方法,EPA 3640： GPC净化系统测试,EPA SW-846 3640 方法进行校正 校准物： 玉米油（Corn oil） 双（2-乙基己基）邻苯二甲酸酯（bis-(2-ethylhexyl)phthalate） 甲氧滴滴涕（methoxychlor） 二萘嵌苯（Perylene） 硫,LabTech GPC Cleanup600 净化柱20*300mm Bio-Breads SX3 不锈钢柱,应用,Why “GPC”? 减少对仪器的损害和待机时间 提高准确率，确保平行性。 提高效率，并且回收率稳定 提高回收率 提高仪器的检出限 节约溶剂 节约人力,凝胶渗透色谱净化在土样有机氯测定中的应用（环境科学与技术，vol29，3）,应用领域,农产品及食品 （农残、药残） 农残：蔬菜、水果、谷物、饲料、肉类、水产品、 茶叶、蜂蜜 二氧杂环：奶类 黄曲霉素：奶类、食油,应用1 饲料中有机氯测定（农科院饲料所） 称取5.000g配合饲料若干份,分别加提取液25ml，超声提取15min，用加有5g无水硫酸钠漏斗过滤 GPC 条件： LabTech Cleanup 600 二氯甲烷环己烷=11， 流速： 5.0 ml/min 波长：258nm,标准 DDT+六六六的GPC的流出图,检测样品提取液的GPC图,检测样品溶液GC色谱图,应用2： 仪器系统： LabTech GPC Cleanup800 GPC条件： 流动相：二氯甲烷； 检测波长：254nm； 流速：3ml/min； 进样量5ml。,图1 食用油（含邻苯二甲酸二辛酯）,图2 食用油（空白）,食用油中增塑剂HPLC谱图,回收率结果(n=3),环保 多环芳烃（PHAs）：污水、土壤 多氯联苯（PCBs）：废水,应用实例： 在土壤样品中加入16种多环芳烃混合标准品，萃取浓缩后以LabTech GPC Cleanup 进行净化，对收集部分进行分析。,A: mixture of 16 PAHs B: Soil extraction,mixture of 16 PAHs and Soil extraction,HPLC谱图,经GPC净化后16种多环芳烃的回收率,土壤中应用2,土壤中有机氯GPC净化图片,“过程” 典型的GPC净化残留农药制备过程,有机样品净化、浓缩全套解决方案,Thank Y