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文档简介
细胞生物学实验,生命科学学院 项黎新、董伟仁688940) ,油镜和测微尺的使用及细胞形态观察 叶绿体分离及荧光镜检(密度梯度离心法) 线粒体的分离及活性染色(差速离心法) 细胞化学(Feulgen反应) 细胞融合 小鼠染色体标本制作及观察 植物细胞骨架的制作及观察 自主实验,实验内容安排,实验报告(70%) 平时表现(30%),考试成绩,课程特点与期望,没想象中简单 努力思考、多动脑 会分析、会设计、会解决,实验一 油镜和测微尺的使用 及细胞形态观察,一、实验目的 掌握油镜和测微尺的使用方法,学会用显微尺观察和测量细胞,并按比例绘制细胞大小示意图。,二、实验用品,器材:普通光学显微镜,台尺,目尺; 材料:兔脊神经节(示高尔基体),鼠肝(示线粒体)等 ; 试剂:香柏油,二甲苯 。,显微镜,组成: 光学系统:物镜、目镜和照明装置 机械装置:镜座、镜臂、载物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等 物镜镜头: 40/0.70 (40物镜放大倍数;0.70镜口率) 160/0.17 (160镜筒长度;0.17盖玻片厚度),显微镜使用原则,先低后高 先近后远 先粗后细,油镜的使用,先用低倍镜观察标本,把油镜下所要观察的移至视野中心,再换高倍镜观察(用细调调节器调节)。 旋离高倍镜,在标本上滴一滴香柏油,换油镜镜头,继续调节细调即可观察。,观察完毕后,旋离油镜镜头,下降载物台,先用干擦镜纸擦12次,把大部分的香柏油擦掉;再用二甲苯湿润的擦镜纸擦23次;最后用干擦镜纸擦12次。同样方法擦清标本。注意擦镜头时要顺镜头直径方向擦,不要沿着镜头的圆周擦。,三、实验原理(测微尺的使用),测微尺由目尺和台尺组成。目尺是一块圆形玻璃片,上面刻有等距离的刻度,分成50100格。实际刻度因不同物镜的放大倍数以及镜筒长度而不同,需要台尺校定。台尺则是一块特制的载玻片,中央封着一把刻度标尺,其每个刻度为0.01mm (10m)。,link,每个大格又可分为10个小格,每小格的实际长度为0.01mm,总长0.1mm,镜台测微尺,总长1mm,共分为10格,四、实验步骤,用台尺标定目尺(10倍或40倍物镜):将目尺装入目镜,有刻度面朝下。再将台尺固定在载物台上,小心移动台尺和转动目尺,使两尺最左边的直线愈合,然后由左向右找出两尺另一重合的直线。记录两次重合线间目尺和台尺的格数,按公式计算出目尺每格的长度( m):,台尺格数 目尺格数 取下台尺,换上标本观测。,10 m,目尺每格长度(m),观察各种切片标本,注意细胞的形态结构、核的形态及数量。 用目尺测量细胞及核的大小(横距、宽距及厚度),每一类被测物测3个数据,最后取平均值。 按比例画出细胞大小的示意图。,思考题:,低倍镜的镜口率为什么不能过大? 为什么光
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