芳酸及其酯类药物分析.ppt

第七章 芳酸及其酯类 药物的分析,药物分析教研室,Analysis of Aromatic carboxylic acids & esters,Contents,第一节 结构与性质,特点,均有苯环、羧酸或其酯 水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连 除了酸性基团外，各自具有本身的官能团 分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性强度各有不同,第一节 结构与性质,(一)苯甲酸类,苯甲酸 (benzoic acid),丙磺舒 (probenecid),甲芬那酸 (mefenamic acid),羟苯乙酯 (ethylparoben),(二)水杨酸类,第一节 结构与性质,水杨酸 SA (salicylic acid),阿司匹林(aspirin),对氨基水杨酸钠 (PAS-Na),双水杨酯salsalate,贝诺酯 (Benorilate),(三)其它芳酸类,氯贝丁酯(clofibrate),布洛芬(ibuprofen),第一节 结构与性质,第二节 鉴 别,(一)铁盐,紫堇色,赭色,米黄色,第二节 鉴 别,布洛芬,第二节 鉴 别,氯贝丁酯,羟肟酸铁配位化合物,第二节 鉴 别,(二)重氮化-偶合反应,贝诺酯,橙红色,(三)氧化反应,第二节 鉴 别,甲芬那酸H2SO4 深蓝色,随即变为棕绿色,(四)水解反应,第二节 鉴 别,(五)分解产物的反应,(六) UV,第二节 鉴 别,(七) IR,-COOH -OH,-COOH,Ph-C,邻位取代Ph,第二节 鉴 别,N-H O-H,N-H,Ph:C=C,芳胺,酚,第三节 特殊杂质检查,一、阿司匹林,生产工艺,ASA,副产物,SA,溶液澄清度 水杨酸 易碳化物 炽灼残渣 重金属,第三节 特殊杂质检查,1.溶液澄清度(Na2CO3溶液),醋酸苯酯,水杨酸苯酯,乙酰水杨酸苯酯,阿司匹林样品0.50g，加温热至约45C的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应该澄清。,2.水杨酸,第三节 特殊杂质检查,二、对氨基水杨酸钠,第三节 特殊杂质检查,间氨基酚,第三节 特殊杂质检查,1.双相滴定法(Ch.P),样品0.3g,合并乙醚液,HCl滴定液滴定,消耗滴定液不得超过0.30ml,第三节 特殊杂质检查,2.HPLC法(USP),色谱条件 色谱柱C18，(250mm4.6mm，10m) 流动相NaH2PO4(0.05M)-Na2HPO4(0.05M)-MeOH(含氢氧化四丁基胺1.9g)（425:425:150） 检测波长254nm 内标磺胺,间氨基酚杂质限量=10(C/W)(Ru/Rs)(%),C标准对照液浓度 WPAS-Na含量 Ru供试溶液中间氨基酚与磺胺峰相应值之比 Rs标准溶液中间氨基酚与磺胺峰相应值之比,0.25%,第三节 特殊杂质检查,样品中含有-COOH，-SO3H基团时，选用的离子对试剂应为带正电荷的有机胺盐 除离子对试剂外，还需加入磷酸盐或其它缓冲液，以控制流动相的酸度，使酸性官能团解离 样品中含有-NH2，-NH-基团或其它阳离子时，应选用烷基磺酸盐或硫酸盐作为离子化试剂 样品中若同时含有不同性质的基团时，则以上规则选择的离子对试剂均为合理,三、二氟尼柳,第三节 特殊杂质检查,色谱柱：C18 流动相：水-甲醇-乙腈-冰醋酸 检测波长：254nm 供试品溶液的色谱图中如果有杂质，各杂质的峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积。,第三节 特殊杂质检查,四、甲芬那酸,铜盐原子吸收分光光度法 有关物质HPLC,五、氯贝丁酯,对氯酚GC、HPLC 挥发性杂质GC,第四节 含量测定,一、酸碱滴定法(Acid-base titration method),苯甲酸 pKa 4.20 水杨酸 pKa 2.98 酸性较强,羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加； 分子内氢键，更增加了其极性,直接滴定,Aspirin、丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法,第四节 含量测定,1.直接滴定法,乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶 液中滴定过程易水解,中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性， 可消除滴定误差,pKa 36 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 pKa 69 的药物要用非水溶液滴定法 若SA不合格，不宜采用本法,第四节 含量测定,2.水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis),取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4,第四节 含量测定,0.5,第四节 含量测定,3.两步滴定法(Two-step titration),Aspirin片,枸橼酸 Citric acid,酒石酸 Trataric acid,水解产物 水杨酸SA HAc,第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc 第二步：水解后剩余滴定,第四节 含量测定,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4,第四节 含量测定,计算：称取10片重 1.8240g,片粉重 0.5312g,CNaOH： 0.1032mol/L,C 0.05120mol/L,标示量 0.1g V- 3.02ml V0- 20.18ml,第四节 含量测定,二、亚硝酸钠滴定法,对氨基水杨酸钠,第四节 含量测定,三、双相滴定法(Titrimetry in two phases),苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断 因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法,分出H2O层，置具塞锥形瓶 乙醚层用H2O 5ml洗涤，洗液并入锥形瓶 加乙醚20ml，继续用HCl滴定，至水层显持续的橙红色,第四节 含量测定,四、UV,1.直接UV法,2.离子交换-UV法,氯贝丁酯在226nm的波长处有最大吸收，但对氯酚等有关物质亦有吸收，干扰UV法的测定。根据氯贝丁酯为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸性解离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用UV法测定。,第四节 含量测定,3.CPC-UV法(Column Partition Chromatography),利用固定相酸碱性的不同进行分离 利用药物和固定相起化学反应而进行分离 利用生成离子对进行层析分离 单纯靠选择流动相进行分离,担体：硅藻土(Celite 545) 固定相：一定pH的缓冲水溶液 流动相：与水不相混溶的有机溶剂(洗脱前必须先用水饱和),第四节 含量测定,a.SA测定,玻棉,磷酸-硅藻土,FeCl3-尿素 -硅藻土,供试液制备 用CHCl3 50ml洗涤，弃去 (洗去ASA) 10ml冰HAc-水饱和乙醚液(110)(使紫色配位化合物被分解，SA析出) 洗脱液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，继用30mlCHCl3洗，并稀释至刻度,第四节 含量测定,测定：306nm测定供试液和SA对照品液,A供试液 A对照品液,SA与试剂生成紫色水杨酸铁配位化合物，在柱上移动慢，带窄，色泽较深 若有Fe3+洗下，黄色影响测定结果 消除干扰方法：于底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4,第四节 含量测定,b.ASA测定,供试液制备 洗脱 5,25mlCHCl3 ，弃去CHCl3 洗脱 10ml冰HA