原核细胞dna复制ppt课件

真核细胞DNA复制及其应用,真核细胞DNA复制与原核细胞的异同,真核细胞复制过程与原核细胞基本相同但有以下不同 1.真核细胞DNA有多个复制原点 2.真核细胞中的DNA聚合酶和是主要复制酶 3.真核细胞染色体为线性，末端具端粒结构 4.真核细胞的染色体复制涉及核小体结构。,真核细胞中的DNA聚合酶,线性DNA末端复制过程,3端的延伸 3端回折成环,3端的延伸：,嗜热四膜虫端粒G 链上带有一个13 个碱基的悬突。 ( 1)端粒酶识别端粒底物末端的TTGGGG 重复序列, 并与端粒酶RNA上的 5 -CAACCCCAA-3 模板序列配对; ( 2 )合成TTG 序列; ( 3)端粒酶移位使末端的TTGGGGTTG 重新与模板序列配对; ( 4)继续延伸端粒, 复制模板序列完TTGGGGTTG 序列的合成。,四膜虫染色体DNA复制时, 5端引物切除后, 由于端粒DNA 有一段约50 个拷贝的5-TTGGGG-3寡核苷酸链, 它突出的3端可回折成环，其3- OH 就像引物的3端能引起互补5-CCCCAA-3寡核苷酸的合成而使5端空缺填补, 并由连结酶将缺口连上, 当内切酶将拐弯处一些未成对的核苷酸切除后, 便可形成两个完整的DNA 分子.,3端回折成环：,3端再回折后，两个DNA 分子间可形成正方形平面排列的G-四联体, 中间配位结合一个一价金属离子。端粒DNA序列富含G。每个四联体含4个鸟嘌呤彼此通过氢键形成平面结构。每个鸟嘌呤来自连续的TTAGGG重复单位中的相应位点。一系列四联体可按这种方式堆叠成螺旋状。,G-四联体结构：,成环后3端的3- OH 就像引物的3端能引起互补5-CCCCAA-3寡核苷酸的合成而使5端空缺填补, 并由连结酶将缺口连上, 当内切酶将拐弯处一些未成对的核苷酸切除后, 便可形成两个完整的DNA 分子.,端粒能保护染色体末端，维持染色体末端的稳定性。 端粒酶合成端粒DNA，催化端粒延伸, 保证染色体复制完整。,抗恶性肿瘤药物 烷化剂,烷化剂（alkylating agents）又称烃化剂，是一类化学性质很活泼的化合物。它们具有活泼的烷化基团，能与细胞中DNA或蛋白质中的氨基、颈基、羟基和磷酸基等起作用，常可形成交叉联结或引起脱嘌呤作用，使DNA链断裂，在下一次复制时，又可使核碱酸对错码，造成DNA结构和功能的损害，重者可致细胞死亡。,环磷酰胺,环磷酰胺（cyclophosphamide,endoxan,cytoxan,CTX）为氮芥与磷酰胺基结合而成的化合物。,【药理作用】环磷酰胺在体外无活性，在体内经肝细胞色素P-450氧化、裂环生成中间产物醛磷酰胺（aldophosphamide）,它在肿瘤细胞内，分解出有强效的磷酰胺氮芥（phosphamide mustard）,才与DNA发生烷化，形成交叉联结，抑制肿瘤细胞的生长繁殖。环磷酰胺抗瘤谱较广，对恶性淋巴瘤疗效显著。对多发性骨髓瘤、急性淋巴细胞白血病、卵巢癌、乳腺癌等也有效。,【体内过程】口服吸收良好，1小时后血中药物达峰浓度，17%31%的药物以原形由粪排出。30%以活性型由尿排出，对肾和膀胱有刺激性。静脉注射68mg/kg后，血浆t1/2约为6.5小时。在肝及肝癌组织中分布较多。 【不良反应】环磷酰胺可口服或注射；呕吐、恶心反应较轻，静脉注射大剂量时仍多见；脱发发生率较其他烷化剂为高约30%60%，多发生于服药34周后；抑制骨髓，对粒细胞的影响更明显；对膀胱粘膜刺激可致血尿、蛋白尿；偶可影响肝功能，导致黄疸；还致凝血酶原减少；久用可致闭经或精子减少。,参考文献：,White L K, Wright W E, Shay J W. Telomerase inhibitors J . Trend Biotech, 2001, 19( 3) : 114 120. Van Steensel B, Smogorzewska A, De lang T. TRF2 protects human telomeres from endtoend fusions J . Cell, 1998, 92( 3) : 401 413. Nakamura T M, Cech T R. Reversing time: origin of telomerase J . Cell, 1998, 93( 5) : 587 590. Shore D. Telomeric chromatin: replicating and wrapping up chromosome end J . Curr Opinion Genet Der, 2001, 11( 2) : 189 198. Yu GL, Bradley JD, Attard i LD, et a.l Invivo alteration of te-lomere sequences and senescence caused by muta ted Tetra-hymena te lom erase RNAs. Nature, 1990, 344% 126 132. Griffith JD, Com eau L, Rosen field S, et a.l Mammalian telo-meres end in a large duplex loop. Cell 1999, 97% 503 514. Walne AJ, Dokal L. Advances in the understanding of dy skeratosis congenita. Br J H aem ato ,l 2009, 145% 164-172. Ca lado RT, Young NS. Te lom ere m a intenance and hum anbone m arrow fa ilure. B lood, 2008, 111% 4446 4455. A rm an iosMY, Chen JJ, C