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文档简介

细菌总论第一章 细菌的形态与结构1.细菌的大小、基本形态(1)细菌的大小单位以微米(m)表示。(2)细菌的外部形态较简单,仅有三种基本类型,即球状、杆状和螺旋状和某些其它形态。2.菌落的概念及意义(1)概念:某个细菌在适合生长的固体培养基表面或内部,在适宜条件下经过一段时间培养(多数1824h),生长繁殖成巨大数量的菌体,形成一个肉眼可见有一定形态的独立群体(2)意义:细菌培养中,作固体培养基表面划线接种以获得单个菌落,用于细菌的分离、纯化、计数和鉴定。3.细菌的基本结构和特殊结构(1)基本结构:细菌基本生命活动中所必需,细胞壁、细胞膜、细胞浆、核物质、核糖体和内含物等各种细菌都具有的结构。(2)特殊构造:与基本生命活动没有多大关系,如夹膜、鞭毛、菌毛、芽孢等并不是所有细菌都有的结构。4.比较革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁的异同特征革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌强度较坚韧较疏松肽聚糖组成聚糖、侧链、交联桥侧聚糖、侧链厚度与层次厚,2080nm,可达50层薄,510nm,仅12层,磷壁酸有无脂蛋白无有外膜无有脂多糖无有5.细菌脂多糖的组成和功能为G-菌的特有成分,位于细胞壁的最表面侧链多糖:有种、型特异性, G-菌的O抗原核心多糖:有属特异性类脂A :无种属特异性,内毒素的主要毒性成分,耐热,与致病性有关,能致动物体发热、白细胞增多,直至休克死亡。6.细菌的遗传物质细菌为原核细胞,遗传物质为双股环状DNA,处于细胞浆中,相对集中于一个区域,无核膜,无核仁,也称为核体或原核,具有细胞核功能,含有细菌的遗传基因,控制细菌的遗传与变异。 7.细菌荚膜的概念及主要功能(1)概念:某些细菌在其生活过程中可在细胞壁外周产生一层包围整个菌体、边界清楚的黏液样物质,其厚度在200nm以上,称为荚膜。(2)主要功能:抗吞噬和抗体作用 抗有害物质的损伤作用营养物质的贮存场所与废物排出之地具有抗原性。8.细菌芽胞的特点及其意义(1)特点:对高温、干燥、辐射、化学药物有强大的抵抗力含水量低、壁厚而致密,通透性差,不易着色,折光性强。芽胞内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力。不是繁殖器官,一个芽孢萌发只产生一个营养状态的细胞。(2) 意义:芽胞的抵抗力强,可在自然界中存在多年,是重要的传染源。芽胞抵抗力强,故应以杀灭芽胞(高压蒸汽灭菌技术)作为可靠的灭菌指标。第二章 细菌的生长繁殖和生态1.物质摄取的方式和特点(1)单纯扩散:无特异性,不需要载体,不需要耗能速度缓慢细胞内外溶质浓度一旦达到平衡,扩散便停止。(2)促进扩散:严格的特异性,需要载体,不需要能量可逆过程与被动扩散相同,不会使营养物质逆浓度积累。(3)主动运输:需要载体蛋白,有严格特异性,要求供应能量。逆浓度梯度,胞内基质可高于胞外10010000倍。饱和效应:如果膜外基质浓度甚高,促足使载体饱和,输送速度达到一定高度时就无法进一步提高吸收竞争:某些性质极为相似的化合物,如一种化合物过量,常可抑制对另一种化合物的吸收。(4)基团转移:物质在运输的同时受到化学修饰,需要特异性载体蛋白参与,需要能量。2.细菌的生长曲线和不同时期特点(1)细菌生长曲线:如将细菌接种在液体培养基并置于适宜的温度中,定时取样检查活菌数,可发现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标,以活菌数的对数为纵坐标,绘制出一条曲线,称为“细菌生长曲线”。(2)不同时期特点:迟缓期:菌体增大、代谢活跃、合成所需酶系统;RNA含量明显增多,DNA无变化,细菌数不增加。对数期:病原菌致病力最强;形态染色及生理均较典型;对抗菌药物敏感。稳定期:细菌形态及生理性状常有改变,染色不特异,芽孢开始形成;产生毒素等代谢产物。衰亡期 :菌体变形或自溶,染色不典型。3.培养基概念和种类(1)培养基:由人工配制而成的,含有细菌生长繁殖所需营养的基质,经灭菌后才能使用。(2)按营养组成差异:基础培养基、营养培养基; 按状态差异:固体、半固体及液体培养基; 按功能差异:鉴别、选择及厌氧培养基等。第3章 消毒、灭菌与兽医微生物实验室的生物安全1.消毒、灭菌、防腐、无菌的概念消毒:杀灭物体上的病原微生物灭菌:杀灭物体上所有的微生物防腐:阻止或抑制物品上微生物的生长繁殖无菌:不存在活的微生物。以无菌法进行的操作称为无菌技术或无菌操作。2.热力灭菌法 高温能使蛋白质变性或凝固,酶失去活性;高温能直接破坏核酸,使DNA解链并断裂。 热力灭菌法有干热灭菌法和湿热灭菌法,在同一温度下,后者优于前者。因为,在湿热状态下,蛋白质易凝固(含水),此外,湿热的穿透力强。1)干热灭菌法:火焰、热空气(160,2h)2)湿热灭菌法:煮沸法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法 间歇灭菌:在常压下进行,100维持15min30min,然后降温至30左右,保温过夜,使芽孢萌发为营养体,接着第二次蒸煮,连续三次,可达灭菌目的。各种培养基的灭菌要求因其组分不同而有所不同。3.辐射灭菌法可见光、阳光、紫外线、红外线、微波、X射线等 紫外线的作用特点:杀灭作用强,但穿透力差,只能用于物体表面消毒和杀菌,如无菌室等。紫外线对细菌、病毒、酶、毒素和抗体等都有灭活作用,也可引起微生物发生变异。4.抗生素 某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素。主要来源于放线菌(链霉素)、少数来源于霉菌(青霉素)和细菌(多黏菌素)。主要作用是干扰细菌的代谢过程。其作用类型为干扰细胞壁合成、损伤细胞膜、影响菌体蛋白质合成、影响核酸合成。5.细菌素 是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质,仅作用于与它同种不同菌株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌。如大肠杆菌产生的大肠杆菌素,除作用于某些大肠杆菌外,还可作用于沙门氏菌、巴氏杆菌等其它的肠杆菌科细菌。类型有3种:1)多肽细菌素:革兰氏阳性菌产生2)蛋白质细菌素:革兰氏阴性菌产生3)颗粒细菌素:铜绿杆菌等产生6. 一类动物病原微生物:口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒等。 二类动物病原微生物:猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、兔瘟病毒、炭疽芽孢杆菌。 三类动物病原微生物:常见的病原微生物,危害低于前二者,但种类多。 四类动物病原微生物:危险性小、低致病力,如弱毒株。第四章 细菌的感染与致病机理1.致病性与毒力的概念(1) 致病性:一定种类的病原菌在一定的条件下,能使某种动物机引起感染的能力。(2) 毒力:病原菌致病力的强弱程度。2.经典的柯赫法则的内容。(是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据)第一,特殊的病原菌应在同一疾病中查见,在健康者不存在;第二,此病原菌能被分离培养而得到纯种;第三,此纯培养物接种易感动物,能导致同样病症;第四,自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。(基因水平的柯赫法则):第一,应在致病菌株中检出某些基因或其产物,而无毒力菌株中无。第二,如毒力基因被损坏,则菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒力菌株。第三,将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达。第四,在接种动物检测到这个基因产物的抗体,或产生免疫保护。该法则也适用于细菌以外的微生物,如病毒。3.LD50的概念。即半数致死量,能使实验动物在感染后一定时限内发生半数死亡的活微生物量或毒素量。4.内化作用及其意义(1)内化作用:某些细菌黏附于细胞表面之后,能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程。(2)意义:宿主细胞为进入其内的细菌提供了一个增殖的小环境和庇护所,使细菌逃避宿主免疫机制的。也可随吞噬细胞的游走而扩散至其他部位,造成广泛病变。5.外毒素与内毒素的区别。区别要点外毒素内毒素来源革兰阳性菌与部分革兰阴性菌革兰阴性菌存在部分从活菌分泌出,少数菌崩解后释放细胞壁组分,菌裂解后释放化学成分蛋白质脂多糖稳定性60-80 ,30min被破坏160 ,2-4h才被破坏毒性作用强,对组织器官有选择性毒害效应,引起特殊临床表现较弱,各菌的毒性效应大致相同,引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等抗原性强,刺激机体产生抗毒素;甲醛液处理脱毒形成类毒素弱,刺激机体产生的中和抗体作用弱;甲醛处理不形成类毒素6. 细菌耐药性又称抗药性,系指细菌对于抗菌药物作用的耐受性,耐药性一旦产生,药物的化疗作用就明显下降。耐药性根据其发生原因可分为获得耐药性和天然耐药性。7.细菌耐药性的检测方法1)细菌耐药表型检测:判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS(美国临床实验室标准化委员会)标准,通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。2)耐药基因检测3)特殊耐药菌检测8.细菌毒力减弱的方法 长期体外连续传代培养,高于最适温度下培养,含有特殊气体(50%CO2)或特殊化学物质的培养基条件下培养,通过非易感动物,通过基因工程的方法,如切除毒力基因。9.细菌毒力增强的方法回归易感动物是增强细菌毒力的最佳方法(本动物或试验动物)。长期保存的菌种或长期人工条件培养细菌、病毒,其毒力往往降低,需通过回归动物恢复其毒力。第五章 细菌的遗传变异1.质粒主要特征(1)主要特征:质粒并非细菌生存所必不可少的遗传物质;质粒可以转移,质粒的传递是细菌遗传物质转移的一个重要方式;质粒可自行失去或经人工处理而丢失;质粒可以独立复制,随宿主菌分裂传到子代菌体 ;人工改造的的质粒已经成为重要的分子生物学工具。2.细菌基因转移和重组的主要方式(1)转化 (2)转导 (3)接合 (4)原生质体融合 (5)转染3.研究细菌遗传变异实际意义(1)疾病诊断:在临床细菌学检查中,要作出正确的诊断,不但要熟悉细菌的典型特性,还要了解细菌的变异规律。(2)疾病预防和治疗:由于抗生素的广泛使用,某些可发生变异而形成耐药性。在治疗用药时,应选择敏感抗菌药物,并应防止耐药菌株的扩散。(3)基因工程:用人工方法将所需要的某一供体生物的DNA大分子提取出来,用工具酶切割,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一易生长、繁殖的受体细胞中,让外源遗传物质在其中正常的复制和表达,获得新产物。4.接合概念接合:两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程。原生质体融合及基本操作过程(1)原生质体融合:使遗传性状不同的两细菌的原生质体发生融合,并进而发生遗传重组,以产生同时带有双亲性状的、遗传性稳定的融合子的过程。(2)主要步骤:选择亲株制备原生质体原生质体融合原生质体再生筛选优良性状的融合子6.转染概念,细菌与真核细胞的转染的异同(1)转染:受体菌从噬菌体获得而非从其他供体菌提取DNA的过程。(2)细菌的转染:由外来DNA引起生物体遗传性状改变的过程,噬菌体常常可感染细菌并将其DNA注入细菌体内,也可引起细菌遗传性状的改变;真核细胞的转染:通过感染方式将外来DNA引入宿主细胞,并导致宿主细胞遗传性状改变的过程。第六章 细菌的分类及命名1.细菌为原核生物。细菌有古细菌(早期进化过程的产物)和细菌。2.细菌分类的主要单元是:属、种、菌株。 属:是具有共性的若干种的组合,应与其他属有明显的差异。 种:是微生物学分类的最基本单元。是一群性质相似的菌株,与其他菌株有明显的差异。凡16SrRNA序列同源性大于97%的细菌,可确定为同一种。菌株:是不同来源的某一种细菌的纯培养物。同一种细菌可以有许多菌株,其主要性状应完全相同,次要性状可稍有差异。3.细菌分类:根据细菌各自的特征,并按照亲缘关系分类,以不同等级编排系统。分类有两种: 细菌的生理生化分类法,包括有传统分类法和数值分类法。 细菌核酸、蛋白质结构的同源程度进行分类法,称种系分

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