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实验四 微生物菌落的观察 目的要求 实验原理 实验材料 实验程序 结果与思考题 目 的 要 求 l学会观察、识别各种不同的微生物菌落的方法。 l掌握平板菌落计数的方法,运用所学的知识详细的描述 所分离平板上的各种微生物菌落。 l学习并掌握斜面接种的操作技术。 实 验 原 理 对于一些难区别的菌落还应该借助显微镜来观察其细胞 形态以进一步做出正确的判断。 实 验 材 料 l实验三所作的平板培养物: A,在细菌培养基上生长的各种菌落; B,在霉菌培养基上生长的各种菌落。 l实验二所作的试管斜面,酒精灯、接种环等。 l菌种:大肠杆菌E.coli 枯草杆菌B.subtilis枯草杆菌B.subtilis 实 验 程 序(观察描述菌落特征) l运用所掌握的各种微生物菌落的特点,观察、识别、 描述所做样品的两个平板上的所有菌落,并将结果填 入表1中。 常用的菌落描述词语: 大小:大、中、小、针尖状 形状:圆形、隆起、扁平、假根状、不规则状等; 边缘情况:整齐、波形、裂叶状、锯齿状等 表面情况:干燥、湿润、光滑、皱褶、颗粒状、龟裂状等; 样品 来源 培养基 类型 菌落 类型 特征描述 菌落数( 近似值 ) 大小形状颜色表面情况边缘 情况 a A 1 A 2 B 3 B 4 bA 1 A 2 B 3 B 4 表1 平板菌落特征描述 某些有代表性的菌落图片: 细菌 酵母菌 啤酒酵母 菌落一般较细菌菌落大且 厚,表面湿润,粘稠,易 被挑起,多为乳白色、土 黄色,少数呈红色。 l常见的酵母菌的菌落 菌落形态较大,质地一般比放线菌疏松,外观干燥, 不透明,呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状; 菌落与培养基的连接紧密,不易挑取,菌落正反面 的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。 霉菌 霉菌的菌落 青霉属 毛霉属 l定义:根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落 是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征而设计的计 数方法,即一个菌落代表一个单细胞。统计菌落数 目,即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌 数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。 l对土壤中的微生物进行计数,将结果填入表2中。 实 验 程 序(平板菌落计数) 表2 土壤中微生物计数结果 稀释释 度 10-510-6 1g样样品活菌数 12平均12平均 细细菌 菌落 数 霉菌 菌落 数 计数方法: 每克土壤的菌数=同一稀释度几次重复的菌落平均数10稀释倍数 计算结果时,常按下列标准从接种后的3个稀释度中选择一个合适的稀释度,求出每 克菌剂中的含菌数。 (1)同一稀释度各个重复的菌数相差不太悬殊。 (2)细菌、放线菌、酵母菌以每皿30300个菌落为宜,霉菌以每皿10100个菌 落为宜。 选择好计数的稀释度后,即可统计在平板上长出的菌落数,统计结果按下式计算。 实 验 程 序(无菌操作技术 ) 在酒精灯火焰旁操作,将所给的两种菌种无 菌操作,转接到大试管斜面,并贴标签,培养。 点燃酒精灯 左手夹住两试管:斜面向上,450度角。 灼烧接种环 右手拔棉塞,管口过

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