微生物检验(完整版)

微生物检验（完整版） 名解 微生物：是一群个体微小 结构简单 肉眼不能看见的微小生物的总称 种：亲缘关系较近的微生物群体 在进化发育阶段上有一定的共同形态和生理特征 微生物学：生物学的一个分支 是研究微生物在一定条件下的形态结构 生理生化遗传变异 特性及微生物的进化 分类 生态等生命活动规律以及微生物之间 与人类 动植物 自然界互 相关系的一门科学 抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的 能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的 微量生物活性物质 细菌素：是某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质 条件致病菌：正常菌群在宿主体内具有相对稳定性 一般不致病 消毒：指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法 灭菌：指杀灭物体上所有的微生物的方法 防腐：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法 无菌：指没有货的微生物的存在 质粒：是细菌染色体外的遗传物质 也是环状闭合的双联 DNA 分子 比染色体小 存在于细 胞质中 可自主复制 突变：是指细菌遗传物质的机构发生突然而稳定的改变 所致的变异现象可遗传给后代 基因转移：外源性物质由供体菌转入受体细胞内的过程 基因重组：供体菌的基因进入受体菌细胞 并在其中自行复制与表达 或矛受体菌 DNA 整合 在一起的过程 病毒：是一类个体微小 结构简单 只含一种核酸 只能在活的易感细胞内以复制方式增殖的 非细胞型微生物 复制周期：病毒的增殖被人为分成吸附 穿入 脱壳 生物合成 装配 成熟与释放七个步骤的 完整过程 缺陷病毒：是指因病毒基因组不完整或因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒 顿挫感染：病毒进入宿主细胞 若细胞缺乏病毒复制所需的酶 能量和必要成分等 则病毒无 法合成自身成分不能够装配和释放子代病毒的现象 干扰现象：两种病毒感染同一种细胞时 可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象 人工自动免疫：是将疫苗等免疫原接种于人体 刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答 使 机体获得特异性免疫力 人工被动免疫：是指注射含某种病毒特异性中和抗体的免疫血清等一系列细胞因子 是机体 立即获得特异性免疫 干扰素：是由病毒或干扰素诱生剂作用于中性粒细胞 成纤维细胞或免疫细胞产生的一种糖 蛋白 致病性：一定种类的病原微生物 在一定的条件下能在特殊的宿主体内引起特定疾病的能力 半数致死量：在规定时间内 通过一定途径 能使一定体重或年龄的某种动物半数死亡或感 染需要的最小病原体数量或毒素量 急性感染：发作突然 病程较短 一般是数天或数周 局部感染：病原体侵入机体后 局限就在一定部位生长繁殖引起病变的一种感染类型 毒血症：致病菌侵入宿主体后 只在机体局部生长繁殖 病菌不进入血液循环 但其产生的外 毒素入血 引起特殊的毒性症状 败血症：致病菌侵入血流后 在其中大量繁殖并产生毒性产物 引起全身性毒性症状 内毒素血症：革兰阴性菌侵入血流 并在其中大量繁殖 崩解后释放出大量毒素 也可有病灶 内大量革兰阴性菌死亡 释放的内毒素入血所致 培养基：是指人工方法配制的适合细菌生长繁殖的营养基质 CFU：菌落形成单位 细胞病变效应（CPE）：是指某些病毒感染组织细胞后 正常生长的梭形细胞变圆 变性 坏 死 溶解及从培养瓶壁脱落 细胞堆积形成葡萄状 包涵体：某些病毒感染细胞后 可在细胞核或细胞质中形成包涵体 医院感染：是指住院患者在医院内获得的感染 包括在住院期间发生的感染和在医院内获得 出院后发生的感染 但不包括在入院前已开始或住院时已存在的感染 填空 根据微生物的大小、结构和组成不同可分为三大类型：非细胞型微生物 原核细胞型微 生物 真核细胞型微生物 微生物的分类等级与其他生物相同 依次为：界、门、纲、目、科、种、属 其中种是 最基本的分类 细菌的基本机构是由各种细菌共有的节后 由外向内依次为：细胞壁、细胞膜、细胞质 和核质等 细菌 L 型的只要生物学特性：多形性 普通培养不声张 可返祖 可致病 细菌的繁殖方式：二分裂繁殖 以 2 的 N 次方数量增长 细菌的生长曲线：迟缓期 对数期 稳定期 衰亡期 细菌产生的色素有两类：水溶性色素 脂溶性色素 进行水的卫生微生物学检验时 一般以 大肠埃希菌 作为水被粪便污染的重要指标 通过测 定 大肠菌群数来判定水源被污染的程度 目前 我国规定生活饮用水的的标准是：1ml 水肿 的细菌总数不超过 100cfu 空气中的细菌一般以 甲链 作为指示菌 热力灭菌法又分为：干热灭菌法（包括焚烧 烧灼 干烤法）和湿热灭菌法（主要高压 蒸汽灭菌法 间歇灭菌法 巴士消毒法 煮沸法） 热力灭菌法的原理是：高温加热 影响消毒剂的因素：消毒剂 微生物的种类和数量 温度与酸碱度 环境中化学拮抗物质 的存在 噬菌体的结构：由头部 尾部两部分组成 头部外壳为蛋白质 内含核酸；尾部由尾领 尾鞘 尾髓 尾板 尾词和尾丝组成 真菌的变异三种表现形式：真菌形态、机构变异 真菌菌落变异 真菌抗药性变异 外毒素：具有菌种特异性 毒性作用较强 具有组织选择性 良好的免疫原性 不耐热 易 被酸和蛋白水解酶灭活 细菌全身感染在临床上常见的有下列情况几种情况：毒血症 菌血症 败血症 脓毒血症 内毒素血症 按培养基的物理性状可分为 3 类：液体培养基 半固体培养基 固体培养基 培养基的制备程序：调配 溶化 矫正 PH 过滤澄清 分装 细菌在液体培养基的生长现象：浑浊 沉淀 菌膜 细菌菌落一般分为下列 3 种类型：光滑型 粗糙型 黏液型 HCV 的生物学特性：具有 包膜的单正链 RNA 病毒 球形 对氯仿、甲醛、乙醚等有机溶 剂敏感 问答 1.微生物的特点 A，个体微小，结构简单 B，比表面积大，吸收多，转化快， C，繁殖快，代谢强 D，适应强，易变异，易人工培养 E，种类多，分布广，观察和研究手段特殊 2.微生物命名 国际上多采用拉丁文林奈双命名法，又属名和种名组成，a，属名在前，名词，首字母大写； b，种名在后，形容词，均用小写；两者用斜体表示。 3 科赫法则： a，在同样的疾病中可发现同一病原菌 b，这种病原菌可在体外获得纯培养 c，将纯培养接 种的易感动物可发生相同疾病 d，从人工感染的实验动物体内可重新分离到该菌的纯培养。 4 微生物检验的基本条件 a，研究感染性疾病的病原体特征 b，研究标本的采集，运送，保存和处理等方法，提高病原微生物的检出率 c，选择各种感染性疾病的病原体的最佳检验方法，探讨各种病原微生物的鉴定程序， 为临床提供快速，准确的病原学诊断 d，执行国际标准操作程序和方法，进行抗微生物药物敏感性试验，为临床合理用药提 供依据 e，研究医院感染的特点，发生因素，实验室检测和控制措施，对医院感染进行监控 f，各种微生物检验快速诊断和药敏试验的自动化，微量化设备的使用 g，正确进行检验结果分析，实验方法及临床意义的评价 h，对医院环境，医疗器械等进行卫生微生物调查分析以及院内消毒，灭菌的质量监测， 已达到卫生学要求 5.微生物学检验的原则 a，确保临床标本可靠 b，全面了解机体正常菌群 c，微生物学定性，定量和定位分析 d，保证检验质量，快速，准确提供信息 e，加强与临床联系，了解患者临床信息，以选择 合理的检验方法。 6.细菌细胞壁的主要功能 a，维持细菌的固有形态和抵抗低渗作用 b，物质交换作用 c，屏障作用 d，免疫作用 e，致病作用 f，鞭毛运动的支点 7.细菌细胞膜的主要功能 a，选择性通透作用，控制细胞内外物质的转运与交换 b，参与细胞的呼吸，与能量的产生，储存和利用有关 c，细胞生物合成的重要场所，其膜上的合成酶与细胞壁，荚膜和鞭毛的合成有关 d，分泌细菌胞外酶 8.细菌鞭毛的作用和意义 a，鞭毛是细菌的运动器官 b，与细菌致病性相关 c，与细菌鉴定，分类及分型有关 9.细菌的生长繁殖的条件 a，充足的营养物质 b，适宜的酸碱度 c，合适的温度 d，必要的气体环境 10.细菌生长曲线的四期 a，迟缓期：是细菌进入新环境后的适应阶段此期的细菌几乎不繁殖，但代谢活跃，体积增 大，积极合成各种酶，辅酶及代谢产物，为其后繁殖做准备 b，对数期：对数期细菌的生物学特性较典型，对外界因素的作用也较敏感，所以这个时期 的细菌常用作观察研究细菌的大小形态染色性对抗菌药物的敏感性等 c，稳定期：该期的细菌形态，生理特性常有变异，细菌的芽孢也多在该期形成 d，衰亡期：细菌繁殖速度越来越慢，死亡速度越来越快，活菌数越来越少，死菌数超过了 活菌数；此期的细菌形态显著改变，出现多形态的衰退型甚至菌体自溶，生理代谢活动也 趋于停滞，这些变化可影响对细菌的鉴定 11.正常菌群在人体中的作用 a，生物拮抗作用 b，营养作用 c，免疫作用 d，抑癌作用 12.条件治病菌的特点： a，寄居部位改变 b，免疫功能下降 c，菌群失调 d，种类，数量的改变 13.紫外线的杀菌机制： 细菌 DNA 吸收紫外线以后，同一股 DNA 上相邻的胸腺嘧啶通过共价键结合成二聚体，改 变了 DNA 的分子构型，从而干扰 DNA 的复制，导致细菌变异甚至死亡。 14.常用消毒剂的杀菌机制： a 使菌体蛋白质变性或凝固 b 影响细菌的酶系统和代谢活性 c 损伤菌体细胞膜或改变细胞膜的通透性 d 改变核酸类型抑制核酸合成 15.影响消毒剂作用的因素： a，消毒剂：消毒剂的性质，浓度和作用时间不同 b，微生物的种类和数量 c，温度与酸碱度 d，环境中化学拮抗物质的存在 17.质粒的特征： a，具有自我复制的能力 b，可决定细菌的某些遗传性状 c，可从宿主细胞中消失 d，具有转移性 e，相容性和不相容性 18.真菌性中毒的特点： 真菌中毒与一般细菌性或病毒感染不同。真菌是在粮食中产生毒素，受环境条件的影响， 所以发病有地区性和季节性，但没有传染性，不引起流行。 19.干扰现象发生的原因： a，某一病毒作用于宿主细胞，诱导其产生抑制病毒复制的蛋白质，称为干扰素。 b，第一种病毒破坏了宿主细胞的表面受体或改变了宿主细胞的代谢途径等影响另一种病毒 的复制过程。 c，缺陷病毒的干扰。 20.干扰素的作用特点： a，具有广谱抗病作用，但只是有抑病毒作用而无杀病毒作用 b，抗病毒作用有相对的属性特异性，一般在同种细胞中活性最高 c，具有调整免疫功能和抑制肿瘤细胞生长的作用。 21.干扰素抗病毒机制： 干扰素无直接杀伤病毒作用 其抗病毒作用是通过与宿主细胞膜受体结合触发宿主细胞的信 号传递 发生一系列生化反应 诱导基因转录 并翻译出抗病毒蛋白 由抗病毒蛋白发挥抗病 毒作用 22.外毒素的主要特点； a，具有菌种特异性 b，毒性作用极强 c，毒性作用具有组织选择性 d，具有良好的免疫原性 e，多数外毒素不耐热 f，外毒素都是蛋白质 23.内毒素的主要特点； a，产生于革兰阴性细菌； b 化学性质是脂多糖； c 对理化因素稳定； d 毒性作用相对较弱，且对组织无选择性； e 内毒素不能被甲醛溶液脱去毒性成为类毒素； 24.革兰染色的染色原理： a，渗透学说：革兰阳性菌结构致密，肽聚糖层厚，含脂质少，脱色时乙醇不宜渗入，反而 使细胞壁脱水，通透性下降，胞内结晶紫与碘的复合物不宜渗出；革兰阴性菌结构疏松， 肽聚糖层薄，含脂质多，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增加，胞内结晶紫与碘的复合物 易被乙醇溶解溢出而脱色。 b，化学学说：革兰阳性菌含大量的核糖核酸镁盐可与结晶紫，碘牢固结合，而不易被乙醇 脱色；革兰阴性菌体内含核糖核酸镁盐少，故易被脱色。 c，等电点学说：革兰阳性菌的等电点比革兰阴性菌的低，在相同的 ph 条件下，革兰阳性 菌比革兰阴性菌所带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料结合牢固，而不易脱色。 25.革兰染色法的影响因素； a 操作因素：脱色是影响革兰染色的关键步骤，脱色时间的长短直接影响染色结果的准确 性；涂片太厚太薄会使菌体分散不均；干燥时菌体过分受热会导致菌体变形排列失常， b 染色因素：陈旧染液会因蒸发化学沉淀等因素而降低实际浓度，一般新制作的染液应先 用已知的革兰阳性菌和革兰阴性菌进行对照实验以确定染液质量。操作时涂片上积水过多， 可稀释染液而影响染色效果 c 细菌因素：放置不同时间的细菌标本或培养物，染色结果会有所差异。 26.培养基按其物理性状可以分为： a，液体培养基：常用于增菌培养或纯培养后观察细菌的生长现象。 b，半固体培养基：用于保存菌种及观察细菌的动力 c，固体培养基：该培养基倾注至培养皿中制成平板，用于细菌的分离纯化鉴定及药敏试验， 注入试管中则可制成斜面而用于菌种的保存。 27.细菌在培养基中的生长现象： a，液体培养基：混浊，沉淀，菌膜 b，半固体培养基：有鞭毛的细菌在半固体培养基中可沿穿刺线扩散生长，穿刺线四周呈羽 毛状或云雾状，无鞭毛的细菌只能沿穿刺线生长，穿刺线四周的培养基透明澄清 c，固体培养基：细菌经分离培养后，在培养基上可形成菌落（光滑型，粗糙型，黏液型） 28.真菌检验时采集标本的注意事项： a，标本来源要适宜， b，用药前采集标本 c，采集标本量要充足 d，严格无菌操作 e 采集的标本立即送检 29.病毒组织细胞分离培养的优缺点及适用范围 a，原代细胞：优点，单个细胞贴壁生长，有接触抑制。缺点，原代细胞对病毒敏感，但只 能传 23 代即衰退，适用范围，原代细胞用于正粘病毒，副粘病