高三生物选修一淀粉酶的固定化

淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测固定化酶分离纯化后固定在非水溶性载体上、可投放到反应溶液中使用又能被收回的酶。水溶性酶 非水溶性载体非水溶性酶（固定化酶）固定化技术多糖、蛋白质、玻璃、陶瓷、聚酯、聚胺、尼龙、 树脂、淀粉、明胶、胶原、吸附法 包埋法共价交联法共价偶联法载体结合法优点 （ 1）提高酶稳定性；（ 2）可反复或连续使用；成本降低（ 3）易于和反应产物分开；产物溶液无酶残留，简化提纯工艺；提高产物质量（ 4）酶反应过程可严格控制；缺点 固定化时酶活性有损失淀粉糊精 淀粉酶 淀粉酶来源来源固定固定产物检测产物检测最适最适 pH最适温度最适温度枯草杆菌枯草杆菌石英砂石英砂碘碘 碘化钾碘化钾5.5 7.550 75实验步骤实验步骤 用用 50ml小烧杯称取小烧杯称取 5g石英砂，加入石英砂，加入 4ml 淀粉酶溶液，缓慢搅拌淀粉酶溶液，缓慢搅拌 30分钟，使分钟，使 淀粉酶淀粉酶固定到石英砂上，放入注射器中。固定到石英砂上，放入注射器中。实验 6 -淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 怎样使石英砂不从注射器中漏出？怎样使石英砂不从注射器中漏出？ 夹子、滤纸片夹子、滤纸片 用用 10倍蒸馏水清洗注射器倍蒸馏水清洗注射器最后一次清洗时取其上清液最后一次清洗时取其上清液 2滴加到点样板上滴加到点样板上，同时滴加，同时滴加 1%淀粉溶液混匀，再加入淀粉溶液混匀，再加入 KI-I2溶液溶液，若溶液变为蓝色，说明未固定到石英砂上的，若溶液变为蓝色，说明未固定到石英砂上的 淀粉酶已完全除去；淀粉酶已完全除去； 怎样保证注射器中不含游离的酶？怎样确定？怎样保证注射器中不含游离的酶？怎样确定？ 将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上，用滴管加淀粉溶液，使淀粉溶液约以，用滴管加淀粉溶液，使淀粉溶液约以0.3ml/min的流速过柱。的流速过柱。 在流出在流出 1 2mL反应液后接收约反应液后接收约 0.5mL流出液，流出液，加入加入 1-2滴滴 KI-I2溶液，观察颜色。溶液，观察颜色。用水稀释淀粉滤液用水稀释淀粉滤液 1倍后再观察颜色。倍后再观察颜色。实验后，用实验后，用 10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱，放置在倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱，放置在4 冰箱中，几天后再重复上述实验，看是否有相冰箱中，几天后再重复上述实验，看是否有相同的结果。同的结果。 样品样品 水水 淀粉溶淀粉溶液液淀粉滤淀粉滤液液KI-I2溶液溶液稀释稀释 1倍倍结果结果 对照对照 + - - + - 碘色碘色 样品样品 1 - + - + - 蓝色蓝色 样品样品 2 - - + + - 红色红色 样品样品 3 - - + + + 浅红浅红实验结果实验结果1流出流出 5mL后，接收后，接收 0.5mL流出液，加入流出液，加入 1 2滴滴 KI-I2溶液，溶液呈溶液，溶液呈 红红 色。色。2几天后，再重复上述实验，几天后，再重复上述实验， 与几天前与几天前的相比，结果相同的相比，结果相同 。实验结论实验结论淀粉被淀粉被 -