免疫组化与细胞形态学研究ppt课件

免疫组化与细胞形态学研究免疫组织细胞化学（理论 10学时、实验 30学时）理论 30分实验 70分出勤率 10笔 记 10开卷考试 10实验表现 20实验结果 30实验报告 20总成绩 100分参考书：主要内容第一节 免疫组织化学的定义第二节 免疫组织化学中的免疫化学第三节 组织细胞的处理第四节 免疫组织化学染色的原理和方法第五节 免疫组织化学技术的实际应用组织学 :体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。a. 最常用的染料是 苏木素 (Hematoxylin, H)和 伊红 (Eosin, E)。* 苏木素是 碱性 染料， 蓝紫色 ，可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为 酸性 ，具有 嗜碱性 (Basophilic)。石蜡切片* 伊红是 酸性染料 ， 粉红色 。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。 被伊红着色的结构本身为 碱性 ，具有 嗜酸性(Acidophilic)。* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有 嗜中性 (Neutrophilic)。肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝 (一种蓝色染料 )染成紫红色b. 如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有 异染性 (Metachromasia)。c. 如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有 嗜银性 (Argyrophilic)。H&E染色的中等动静脉d. 不同的染色方法，其结果不同。醛复红染色的中等动静脉网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。第一节 免疫组织化学的定义一、组织化学（ Histochemistry）是建立在组织和细胞内化学成分不同的基础上，运用 染色 的方法区分出胞质、胞核和细胞外基质，从而显示出组织和细胞的形态。第一节 免疫组织化学的定义通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示微细结构的位置，然后用显微镜观察。一、组织化学（ Histochemistry）组织化学 源于 组织学 、 细胞学 和 生物化学 ，又不同于这些学科。第一节 免疫组织化学的定义一、组织化学（ Histochemistry）组织学 、 细胞学： 研究形态结构组织化学 ：化学组成含量，酶的存在及活性第一节 免疫组织化学的定义组织化学 源于 组织学 、 细胞学 和 生物化学 ，又不同于这些学科。一、组织化学（ Histochemistry）第一节 免疫组织化学的定义生物化学： 破坏细胞，定位性差组织化学 ：原位显示，定位性强组织化学 源于 组织学 、 细胞学 和 生物化学 ，又不同于这些学科。组织化学二、免疫组织化学 （ Immunohistochemistry， ICC）第一节 免疫组织化学的定义免 疫 学免疫组织化学立足于 组织和细胞内 的某些化学物质或结构成分能够作为 抗原 ，用相应的 特异性抗体 孵育组织切片，抗体与切片中的相应抗原特异性结合，形成抗原抗体复合物，在显微镜下观察此复合物存在的位置和数量，确定出抗原在组织和细胞中的 定位和定量 。二、免疫组织化学 （ Immunohistochemistry， ICC）第一节 免疫组织化学的定义二、免疫组织化学 （ Immunohistochemistry， ICC）第一节 免疫组织化学的定义抗原 抗原抗体复合物 镜 检标记的特异性抗体定义： 免疫组织化学又称免疫细胞化学。它是组织化学的分支，它是用标记的特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行组织和细胞原位检测的技术。二、免疫组织化学 （ Immunohistochemistry， ICC）第一节 免疫组织化学的定义三、 免疫组织化学 的发展简史第一节 免疫组织化学的定义1941 年 Coons 实用 免疫荧光 技术。60 年代 Nakane建立 酶标抗体 技术。1981 年 Hsu 建立了 ABC 法。90 年代分子杂交、原位杂交、原位 PCR法迅速发展2000 年各种免疫组化技术更加成熟，成为生命科学工作者必须掌握的基本技术之一。A cell-labeling technique called DiOlistics,invented by postdoctoral fellows Wen-Biao Gan, PhD, and Jaime Grutzendler, PhD, and faculty members Rachel O.L. Wong, PhD, and Jeff W. Lichtman, MD, PhD - distinguishes individual cells in the brain using seven different colors. Styl