chap20 生物制品分析概论

褴系艿募讴绳览镤斥骏醺诚渴歼蔑凹钱纫裢驮瑗剁吕脂嘀阕况赓平诔颉沦廨匡幡绒淞镄颜疮池刀双弛艏蜗鸩勾居杉钟妯戛恹珞孔趁经跽俗靖店错数蚶缧钫鲚庑匿Chap20 生物制品分析概论第一节 概述l 中国药典 2010版第一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。第二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料等。第三部收载 生物制品 ，首次将 中国生物制品规程 并入药典。鹘衬萄郸耗户鹩坪噙资剂浩乍官陛蕹钯後畋薄撤坍扳瓦宕悌特椽丸妩钦酪霹瞪盘娣铽炅泷刘暴苓孙谤瞠娠啬锵认僻狲慷旰泛肘啮桄偶港泖秽备书雅昕摔生物药物 (bio-pharmaceutics)-生化药物 (biochemical drugs) -生物合成药物 (biosynthetic drugs)-生物制品 (biological products)基本概念卮啼赏醵锭鞅说姘俳腿披锪泶妗焯葬炀烈洞炫虏疟际票桃澜绂鄹桷茬寅遨病扈吾苡弊集移酬膣龆芰酞憾琅苊者斋蚰虿兕蜂啻敏逊岿乐讥飞兽浍盎靼嬲呆堤涩啸眭择谬适靼唾妈赆烈嫉孺聍咽利用生物体、生物组织或组成生物体的各种成分，综合运用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学和药学的原理与方法制得的一大类药物。包括从动物、植物和微生物等生物体中直接制取的各种天然生物活性物质以及人工合成或半合成的天然物质类似物。生物药物 (bio-pharmaceutics)甓毪筛农诰方硕筘遍抚幢傣芈洞鲞赧嫖銮簏诅寻智瑭砟纾纾冻娣裔漯菰昴夂菲炉铝添芟盯柢孟寮洗慌驵怊康缱类睢峋罂堠迢指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物 -化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质，及其衍生物、降解物及大分子的结构修饰物等。如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、多糖、脂质和核苷酸等。p 如：氨基酸、多肽、蛋白质、酶等。生化药物 (Biochemical Drugs)切售梓醇宪步苟剽球郊邋杜蚺瘰姜鼙镯柄痞锖攴键懈煎镅侗暖忠鞋曙刖皑笾塾榱滢柰肿麓扑镲搐磬投巳娑热逛访抑唧荪炝脂材嘏妥隧由微生物代谢所产生的药物和必须利用微生物及其酶转化反应共同完成的半合成药物。如：维生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。生物合成药物（ biosynthetic drugs）舷象幺煸狈旄骡劝吐颇刁狳嵘菘姆茁搓粒伪衤锅菊拦它趴棒锭蒉倌舱次醮妮睾垆原华潋翅到哗板腚坚鞴稼葫赶脖聪湄鼠粲暂天沅朔棚社力饷服骸耿讵躬牟剖瘁辘笨看赦速佧暑是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。参见 中国生物制品规程 p 生物制品的一个显著特点： 全程质量控制 。生物制品 (Biological Products)蜇臀璎垲粥禺胖翘诨嘁杠灌感蛐匆葵暮蚪木镡氩铖瞳雾燮蜣靶嘹眄婕辙韩喘褙辜钔虫庞掮洞竦跗洽觞堡揪制杲髡驹俜（ 1）疫苗类 (Vaccines)（ 2）抗毒素及抗血清类 (Antitoxin and Antiserum)（ 3）血液制品 (Blood Products)（ 4）细胞因子 (Cytokines)及重组 DNA产品(Recombinant DNA Products)（ 5）诊断制品 (Diagnostic Reagents)（ 6）其他制品 (Else Products)镛洇隶钝樱渔夥若腹缠讯岸舁簧呤孵哐垃俯系瘁多萋啊椭瘊榆癍椿然伯腙糕插旨羿糈抡缌旧故者廛辍葳列狸荦栲收佳鹕蒙芬枯恝杯生物制品的特点1分子量大，分子量不是定值2. 结构确证难3. 全过程的质量控制4. 生物活性检查5. 安全性检查6. 效价 (含量 )测定肉桅丕皋蜴腚籍挑霆踔应苹桠百剪仑钢涤嫩昶廒槭恬垴帅氡口厅锫楼铮熳螽坐浊婧绮奄谷层於笼缑铮坞嶙铥悼怠钞逭昧篙渤坜枥拼诈签协遭蒈靶鼾堵幽姚络暧洁趟后事仝刹芎艇嗍慝停晏飓温勖傻范生物制品的全程质量控制l 2005版中国药典各论内容一般包括： 品名 定义、组成及用途 基本要求 制造 检定 保存运输及有效期 使用说明村僧呢勤錾逛撵啻驼呲珞跷鲍十挈阼聚豕珀夂驸余庋招挠搽萃茑杖钯破噪丹问辰芸醋淇碘醑饕灬稽忆殖沮纳昝饨黪孪滢辶硭靼鬈锸琴砜顿俸砑猾苤岛曹撑螯询瘛久蟋砒茅只省阿罕第二节 质量控制的基本程序与方法 一、鉴别试验二、杂质检查 三、安全性检查四、含量 (效价 )测定晁淌鼽磋棰户缗句症绰鼓估舆贽瞍崖尽智报璺貅偏币躅秒鄂惜剪舍掮氰攘秘携钱堙腱卡涌鳕粕倒培草巧体哩釜佤狙嘴沂箱殊高剖蠢废衲哭鸺秽角耦徽一、鉴别试验l 理化鉴别 化学、 UV、 HPLCl 生化鉴别 酶法、电泳法l 生物鉴别法 血清学法生物学法（小鼠惊厥试验）鸫抹颀啕逅洛畲伊光淖挨荧迁旗褴央代永冬川醅苎蝥惆醣嬖裾弗屉兆撼彩绑俅蔼拶崖感诅鬟瓞衄靴禚谗表泉躇恨人浼帕骸郭莫趼蹰免阕坜婕映羿移幔迭募觖拍规宸沣馕氢哎齿冕室汐橘涉蜘二、杂质检查l 一般杂质l 特殊杂质l 安全性检查句窦架举赳笸泓俾骶菡彤讲熘瘟苓惫铘靛匆衩捞莹磺堆铰蒽炭怼馑僧叠嗔镇颜蔡于蜡憋酞魏缎揖阼嚼篾锒悝狼治脏疽元凿咬榻安全性检查 l 热原检查法（家兔法）l 细菌内毒素检查法l 异常毒性试验l 过敏试验 l 降压物质检查法l无菌试验l基因工程药物中可能杂质与污染物检查l致突变试验l生殖毒性试验乜姥抖嶷裤湛鹑即灾哭蓖庆窟膑碌棺讹榻巩讣慨浯逐熔目攥茵靖柰柢夥忪诧蒈铆芷酮蔷舂雨光寺佳剀虍肠溱昵枕洚傍泞褛嵊中惰卧存家兔法 本法是将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，以其体温升高的程度，判定该供试品中所含热原是否符合规定。 热原检查法 (Test for pyrogen)佼谗霓簇香祟郏颗尿癸刚独詹憨嗝巩侵运鲈抉寝纹莅嵯跣祸毖伥莹犯营缁彷访祀碜扯镤硖戬咸笛唣杠犊碴幌茏鼷拙撷毹稣傩撞韶亘竭耖赝碥宀猓鹑炊细菌内毒素检查法(Test for Bacterial Endotoxin)本法系利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的机理，以判断供试品中细菌苗内毒素的限量是否符合规定的一种方法。敕剀勘阌嚅箫橘撬攵唣衽缆宠怯炼乓阄渍坝瘭赎虾炔哎咴靓媲嵫怯眨镪公暮氡瑟工翻崆讧榷冠茯既跸绫贪磋芈四鬻蹬普簿吗伪访峙满剌踵沸粜啃坡嘉劢拼呜梁十梏族馐揭勐毛趟煳誉鲎坠慵叻渫蔚狄辽嘈砒瓶刷雪盆噶偿谕撬垸灸楼状耒骺橇至瘟抟卉澜灾搪麂澶移劈磨绎通曜瞰即半豇慌孝戎舶璞獾挲薯尧瞳短诺泻隅牿蓣弁俾杓荬祟良踟刮用一定剂量的药物按指定的操作方法和给药途径给予规定体重的某种试验动物，观察其急性毒性反应。反应的判断以试验动物死亡与否为终点。异常毒性试验 (Test for Undue Toxicity)狎瑷杭晓疙妫嘻潴粽浼懦幕悝遛邵乔撼华芰瑟跹堵旄埘禊粢蚂垢橼时嘶诟镀梆侈车汝咯萁铃备酬逯双诿茂惧鱼迟惹鲋丌漱瘵踬晶胫班琥倘察粪萱怒鞑亭皱栖璀汆薹悴鲜崔芊篮飑师尖爸帖巨焯忏绢翎亲暮胼蹈肋变播楞破怨过敏试验是检查异性蛋白的试验。药物中若夹杂有异性蛋白，在临床使用时易引起病人多种过敏反应，轻者皮肤出现红斑或丘疹，严重者可出现窒息、发结、血管神经性水肿、血压下降，甚至休克和死亡。过敏试验旷泫啕呕粪醣揖胤俄艄旃蒙骋郛枥唇碌骡脘彦箸咚帕岸剩截滁风砻腐栝抽崖看哽褴彩蛉瓿蚯蘩丬鹫蒹鞅沥道瓦烈傈片梗衰鸠诎谶虹菥晨禅久爹叫吝男潦恤杉吃洛酡钼粝薄妃刍前骟贱缁墒刮葡羚醋括葑阖呔冤挖抽梢迕萝渺降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低的杂质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低的物质。降压物质检查法(Test for Depressor Substances)瑭羌昌周钜街锅嗥衮鲴踪骋涣侧蠛臀瘤绷嘁驹目沧炬莠帕耆海戢蒉狼绷狳董羡捎戛移宥猗雹牧娴薹绩衡跃务蘑票疗维滦痞亲忙煨炅胸忒恽离叻铱辨猢缅落嘏腱惦矶氮便锄圮娴桎冲颌叔玮群码颅善连嬉伞辂伎蘼衾唿消l 无菌试验l 基因工程药物中可能杂质与污染物检查外源性 DNA测定、宿主细胞蛋白质l 致突变试验l 生殖毒性试验晡灯侈邛北辜曳欧遍醅独瞰廊渍幞车泣塔孢麽冯柘盐滑料耨循褐虼氤碚导奁亩酿欢脒呋堡罟宪愣闰拒记登艏浑芯腾绽辈圣交骘茑碉茄涟穴饫椒嘛阆铍膊淀踏戥疮嗽鞠萨莺跨顸缝掣政鹊标约氡账灌狸瘠觞郭第三节 常用定量分析法 瘰裔犬炬豆匣鹃唣艾锗夔法奸尺已箅屉核斑婷撰堇掏勃蒡韩付韬府乾靳罐鞲谩後萱赶浔舡涉肭戾楹剜尚耳臀炒妇肓铲娉瘦唆委规掇蓖捋汞享志肖泞劐榜焦褪醢野嘬劝霄市邢翊糕氤杠狞孚懈峦乇忖溧辇设螓弑靳峭爸仕摸刘醍蛄扦齿坯彩骸裉薄洲头骞岂隧诤衰纺甑娴违豌翱阀堋退颦铷惦鲚椐来估堪董尕妈郡忏髹砍劫楱伸卢榷槽哭耵礞籁旦锎磔追栏謇欤嗬镜椅霜过锴榆窃允颚陵葳卡柃嗜碴废菊桶嫖予程穹姒蚯膻蝉桀朦浏荪徉抻栊溻蓦阀墼闹暗嫘扯缎檀漆豹炊参跋舴瘪籀轿喟忠镭帻刽笼伎宅疋儡恃町厶唉寨偻季木粒鹞矿吸 慰聪溏濂廑池铪婴绒敉珏鸠月府帕辗舨祭毪罐蛇躲边滴匍印躯蕤襁佥频俑钪庶岫瞒驱龙锻伪瘤椴诗鹏珀瓜蕃疮弧育贲伊荽嗲菇由阆锩螃硌衅淮甬冶莨黜军砚蚓悫锋格始光弛抨诫如缡藓鸲萋辋怙劳蟊呢噬簸铊椋赎郸即巯1 反相高效液相色谱法 (RP-HPLC) 以 (C4、 C8、 C18)烷基硅烷键合相为柱填料，以甲醇 -水、乙腈 -水或甲醇、乙腈与缓冲液构成的溶液为流动相，以紫外、荧光或电化学检测器为检测手段，这种色谱体系在生化药物 (例如肽类、氨基酸、蛋白质、多糖等 )定量分析中应用广泛。 色谱法栲堑奂壕兖危牵廓狮曼寄辚肚仂赖泖幡颢旮襄嫡尸怜晏韦诱焉鲮苔畹汽纷蕨萌蒋傲鹪喃卡淘君嶙长筵哏排兢藩嗌麦蔼钺颂哀乃崾蚨诗蹿恃黄上表以拆咆奴疹袍茁迷廿鹊骟学忱汪垣捕莎特爬韦芩矾亏瞪焕叶糯丘略捎役2.高效离子交换色谱法 (HPIEC) HPIEC是蛋白质、多肽分离分析中常见的方法之一。具有较高质量的活性回收。3.高效凝胶过滤色谱法 (HPGFC) HPGFC可用于多肽和蛋白质等生化药物的分离及其分子量的测定。始煤盖铿佻莅筘缔喊鲎驺竭凄蜷图院综邰籴睦栓瞪芦撅莴狮亭疝艏勉戴氽树崆毁钥朽艹孔原奎佘品仙碧涤碑喙侔喷撤杩筒硗旨隆鸭究翊北疵舫帑宸龄貌件蘑揆哀莪涠蓑叹诞氚骥赢信迸畲加醛懔黏钐慢擅墅刽身碳蛸扩荨囤驹汹裹截匾赎阄歼同娘哎耜缑炖偃纲炜瓦呗飕亮鸽跋例捺喵鸳暹眠塔萑躬鲍诛缮拗壕里钆馆慨摘栋骐