山东大学生化实验报告-蛋白质浓度测定_第1页
山东大学生化实验报告-蛋白质浓度测定_第2页
山东大学生化实验报告-蛋白质浓度测定_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、蛋白质浓度的测定（folin- 酚试剂法）【实验目的】熟悉并掌握用 folin- 酚法测定蛋白质浓度的方法。【实验原理】蛋白质（或多肽）分子中含有酪氨酸或色氨酸，能与 folin- 酚试剂起氧化还原反应，生成蓝色化合物， 蓝色的深浅与蛋白质浓度成正比， 可通过绘制标准曲线，用比色法测定蛋白质浓度。【实验试剂】1.标准酪蛋白 200ug/ml2.folin-酚乙液（原液与水按1:1 比例混合，实验室已准备）3.folin-酚甲液（实验室已准备）a 液4%na2co3: 0.2%naoh=1：1b 液1%cuso4 : 2%酒石酸钾钠 =1： 1a ： b= 50：1混匀4.样品血清（稀释200

2、倍）【实验步骤】1. 准备 9 支干净的试管，按表一顺序加入试剂表一试序号123456789剂标准蛋白 /ml00.20.40.60.81000血清（稀释0000000.20.20.21200 倍） /ml水/ml10.8 0.6 0.4 0.200.8 0.8 0.82. 各试管中加入 5ml folin- 酚甲液，用旋涡摇匀器充分混合均匀， 静置水浴（37度） 10min。3. 各试管中加入 0.5ml folin- 酚乙液，用旋涡摇匀气充分混合均匀， 静置水浴（37度） 30min。4. 使用分光光度计，用 640nm 波长进行比色。【实验结果】表二 各试管中标准蛋白浓度和od值序号12

3、3456789标准蛋白04080120160200/浓度 ug/mlod =640nm00.090.1390.2060.2610.3090.1770.1770.17a、 b、 c 三支试管中液体在640nm 处 od 值的平均值为od=640nm=（0.177+0.177+0.17 ）/3=0.175如 图一 蛋白质浓度的标准曲线 ，当 od=0.175时，标准蛋白质浓度为 109.375 g/ml，则 所测 样品 血 清的 浓 度 为 109. 375 g/ml ， 经转 化 ， 样 品血 清浓 度为10.9375g/100ml图一蛋白质浓度的标准曲线2标准曲线y = 0.0016x0.35

4、0.30.25值0.2do 0.150.10.050050100150200250标准蛋白浓度 ug/ml【思考讨论】1. 结果分析，三组平行实验最终测得的 od 值理论上是一样的，但我们的实验结果中有一个数值偏离较大，给最终的实验结果带来误差。分析原因：可能是因为加样的误差造成的三个试管中卵清蛋白的浓度不同，最终影响测定结果 可能是因为没有充分混匀， 导致每个试管中的浓度不同可能是因为分光光度计自身误差造成的。2. 实验注意事项：（1） 在使用分光光度计时，拿比色皿要拿它的毛面，不可以用手接触它的光滑面，防止自己手上的油污导致测量值不准确。（2） 在比色皿中装入的液体量大约是比色皿体积的三分之二，太多容易洒出来，给测量造

人人文库> 全部分类> 生活休闲 > 科普知识

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论