版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察,一、实验目的 1、观察染色体在减数分裂中的行为和变化,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解; 2、掌握动、植物减数分裂的制片技术。,二、实验原理,减数分裂是性母细胞在配子形成过程中一种特殊的细胞分裂方式。在减数分裂过程中染色体只复制一次,而细胞却连续分裂两次,因此一个二倍体的性母细胞便形成为四个单倍体的性细胞。 高等植物花粉母细胞经减数分裂产生四个小孢子,染色体数目已减半为n。小孢子进一步发育为花粉粒。,减数分裂过程,1、间期(前间期) 2、减数第一分裂 3、中间期 4、减数第二分裂,前期I 中期I 后期I 末期I,前期II 中期
2、II 后期II 末期II,在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定液杀死固定,使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理,在显微镜下进行观察,可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程,研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。,三、实验用品,实验材料:玉米(Zea mays 2n=20)雄花序或小麦、 蚕豆(Vicia faba 2n=12)花蕾、 蝗虫(grasshopper 初级精母细胞2n=22+X) 精巢 仪器物品:显微镜、水浴锅、镊子、解剖针 实验药品:卡诺氏固定液、70%乙醇、改良品红或醋酸洋红。,四、实验操作流程,取材 固定 剥离花药 染色 压片 镜检,1.取材: 选取适当大小的花蕾,是观察
3、花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。 玉米:抽雄前两周(大喇叭口期),雄穗尖端露出以前7-10d时,先以手指挤摸穗尖的外部,觉得松软时在雄花序所在部位用刀片纵向划一切口,用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗颖长4mm左右,花药长23mm。每小穗中有两朵小花,各有花药3个 。通常从一个分枝上从幼嫩的部位向较为成熟的区域混合制片。 小麦:孕穗期以后,旗叶抽出1 2cm,取出穗子。 时间一般在上午9时10时,不同材料间稍有差异。,玉米大喇叭口期,玉米小穗,玉米雄花序,小麦孕穗期,小麦的小花,实验中注意观察:每一分枝是中上部还是下部小穗发育最早?,2固定: 取下的材料应立即放入固定
4、液中杀死固定。 一般采用卡诺氏固定液,无水酒精:冰醋酸3:1,一般固定424h。可用95 乙醇代替无水乙醇。 如需长期保存,可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。 注意:固定液时应现配现用,固定时不要在阳光下暴晒。,3、剥离花药 取出保存的花序,吸去小穗过多保存液,置于载玻片中央,挑出花药,4染色:,在剥离的材料上滴加1滴染液,在室温下 染色1015min。,5.压片 盖上盖玻片,在盖玻片上垫12层吸水纸,用一只手稳住载玻片和盖片防止滑动,另一只手用解剖针的针柄敲击盖片,6.镜检观察 先用低倍镜观察,找到一个好的分裂相,再转用高倍镜观 察。要求能够分辨减数分裂的各个时期,特别是能够
5、独立 辨认第一次减数分裂前期的各个时期 7.观察永久制片 在显微镜下观察,并与自己的制片比较,掌握各个时 期的特点。 注意: 怎样区分各个时期?,五、实验结果与分析,1绘出自己所制作片子的分裂相(3个以上时期), 说明其时期和特点。 2. 分析自己制片操作过程中出现的问题及可能原因。,注意事项,爱护显微镜。 一次取材不要太多。 用过的载玻片必须刷洗干净,用过的盖玻片丢入垃圾桶,不得直接冲入水池。,减数分裂前期 I,细线期,偶线期,偶线期,粗线期,双线期,终变期,中期,后期,后期,前期II,中期II,后期II,末期II,四分体,小孢子,玉米减数分裂中期I,玉米减数分裂中期 II,M1 中期与M2
6、中期的比较,前期 I,细线期,偶线期,粗线期,双线期,终变期,中期 I,后期 I,末期 I,前期 II,中期 II,后期 II,末期 II,取材及固定 捕捉雄性蝗虫,直接投入到卡诺固定液中固定24小时,然后转到70的酒精中保存。,雌雄虫辨别(外观) 雄性蝗虫虫个体小,雌虫较大; 雌性蝗虫尾部有产卵瓣,雄虫无。,解剖取出精巢:先将蝗虫翅膀剪去,在翅基部的后方,相当于腹部背侧的前端,用解剖剪将其体壁剪开,上方两侧的黄色团块就是精巢。精巢由许多排列在一起的精小管组成。将精巢取出置于一洁净的培养皿内,用蒸馏水洗涤干净。用解剖针将精巢轻轻分离开,即可看到大量的精细小管。,取12根精小管放在干净的载玻片上,用吸水纸将上面的水吸净,在精小管位置上滴加一滴改良苯酚品红染液,在室温下染色10-15min。,附:显微镜操作和使用,开关显微镜,移动显微镜。 调节目镜间距和目镜微调,使两个眼睛视野相同和清晰,防止眼睛疲劳。 先低倍镜,后高倍镜观察,高倍镜下
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 合同zao的法律认定
- 合同法第115条内容
- 统考版2025届高考历史一轮复习课后限时集训39新文化运动与马克思主义的传播含解析新人教版
- 2024年山东客运从业资格证应用能力考试
- 2024最高额质押反担保合同
- 2024购房合同能否更名以及如何更名
- 专题10.人物描写及其作用-2023年三升四语文暑期阅读专项提升(统编版)
- 四年级读书卡完整版
- 三年级语文上册第五单元测试卷-基础知识与综合能力篇 含答案 部编版
- 2024成品柴油买卖合同
- 科普知识讲座(火箭)PPT精选课件
- 高三一模动员主题班会-课件(PPT演示)
- 车辙的形成原因及预防措施
- 风电场升压站建筑工程主要施工方案
- 第五讲新闻评论的结构与节奏
- 从PK-PD看抗菌药物的合理应用
- 加热炉施工方案
- 意象对话放松引导词2[生活经验]
- 高速公路安全生产标准化指南1
- 学科融合课题研究实施方案
- 生物质压块机使用说明书
评论
0/150
提交评论