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1、药品微生物控制,内容,微生物的基本知识 细菌 放线菌 酵母菌 霉菌 外界因素对微生物的影响 微生物的生长规律 污染因素 洁净区控制原则,微生物的基本知识,微生物定义：所有形体微小，单细胞或个体结构为简单多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的通称。 特点：体积小,面积大;吸收多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,变异频;分布广,种类。,微生物分类,按细胞结构分： 原核微生物：细菌、放线菌、 蓝细菌、立克次氏体、支原体、衣原体、 粘细菌等 真核微生物 ：霉菌、酵母菌 非细胞型 ：病毒、类病毒,细菌,细菌基本结构 细菌分类 细菌的菌落形态 细菌的繁殖方式,细菌,细菌的基本结构(0.250微米) 细菌细胞

2、的基本结构是一般细菌共有的结构，包括细胞壁、细胞质膜、核区、细胞质。细胞壁是位于细胞最外面的一层坚韧而略具弹性的结构层，主要由肽聚糖构成，有固定外形和保护细胞等多种功能。,细菌,细菌细胞的特殊结构：包括鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等，是某些细菌在某生长阶段具有的结构。,细菌的分类 按细胞壁组成可分为: 革兰氏阴性菌革兰氏阳性菌,细菌,革兰氏染色法的原理: G菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄

3、复染后呈红色。,细菌,染色方法: 第一步：结晶紫使菌体着上紫色 第二步：碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。 第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。 第四步：沙黄复染，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌,细菌,按基本形态可分为：球形、杆状、螺旋状，也被称为球菌、杆菌、螺旋菌,细菌,菌落定义：细胞或孢子在培养基上生长繁殖，形成一个肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群体。 菌落特征 形状：圆形、假根状、不规则状、梅花状等 隆起形状：扩展、台状、低凸、凸面等 边缘情况：整齐、波状、裂口状、锯齿状 表面状态：光滑、皱褶、颗粒物、龟裂状、同心环 表面光

4、泽：闪光、金属光泽、无光泽 质地：油脂状、膜状、粘、脆等 颜色：白、红、黄、紫红、粉红、米黄、褐色等 有臭味,细菌,细菌,细菌的繁殖： 二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞,放线菌,定义 形态与结构 菌落特征 放线菌的繁殖,放线菌,定义：放线菌是介于细菌和丝状真菌之间，而又接近于细菌的一类丝状原核生物。菌落呈放射状。 放线菌实际上是细菌家族中的一员，是一类具有丝状分枝细胞的革兰氏阳性细菌，因菌落呈放射状而得名。放线菌最喜欢生活在有机质丰富的微碱性土

5、壤中，泥土所特有的泥腥味就是由放线菌产生的。,放线菌,形态与结构 根据菌丝形态和功能可分为营养菌丝、气生菌丝和孢子丝 （一）、营养菌丝：又叫初级或一级菌丝或基生菌丝，它是生长在培养基内，菌丝一般无隔膜。主要功能就是吸收营养。 （二）、气生菌丝：又叫二级菌丝，在培养基外，伸向空间，叠生于营养菌丝之上。 （三）、孢子丝：气生菌丝发育到一定程度，分化出可形成孢子的菌丝。,放线菌,菌落特征 菌落质地致密，表面较紧密的绒状或坚实、干燥、多皱，菌落较小而不蔓延。 菌落与培养基结合较紧，不易挑起。 产生孢子，有些种类的孢子含有色素，使菌落表面或背面呈现不同的颜色。 有泥土味。,放线菌,放线菌的繁殖 放线菌没

6、有有性繁殖，主要通过形成无性孢子方式进行无性繁殖，成熟的分生孢子或孢囊孢子散落在适宜环境里发芽形成新的菌丝体；另一种方式是菌丝体的无限伸长和分枝，在液体振荡培养（或工业发酵）中，放线菌每一个脱落的菌丝片段，在适宜条件下都能长成新的菌丝体，也是一种无性繁殖方式。,酵母菌,定义：酵母菌属于单细胞真菌，通常以芽殖或裂殖来进行无性繁殖，极小数种可进行有性繁殖。它们生活在含糖高的偏酸性的环境中，多为腐生型，少数为寄生型，空气中也有少数存在。,酵母菌,形态结构 1大多数为单细胞，呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。有些酵母呈丝状，称为假丝酵母，但它们的共同特点是出芽生殖。 2细胞结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、

7、液泡、线粒体、核糖体、内质网、脂类颗粒、荚膜、细胞核。,酵母菌,菌落：与细菌菌落相似，比细菌菌落大，且厚，菌落表面湿润，粘稠，易挑起，多为乳白色，少数为红色。菌落边缘整齐。有酒香味。,酵母菌,酵母菌的繁殖 无性繁殖有芽殖和裂殖两种方式，酵母菌是以形成子囊和子囊孢子的方式进行有性繁殖的,酵母菌,芽殖：酵母菌最常见的无性繁殖方式是芽殖。芽殖发生在细胞壁的预定点上，此点被称为芽痕，每个酵母细胞有一至多个芽痕。成熟的酵 母细胞长出芽体，母细胞的细胞核分裂成两个子核，一个随母细胞的细胞质进入芽体内，当芽体接近母细胞大小时，自母细胞脱落成为新个体，如此继续出芽。如果酵母菌生长旺盛，在芽体尚未自母细胞脱落前

8、，即可在芽体上又长出新的芽体，最后形成假菌丝状。,酵母菌是以形成子囊和子囊孢子的方式进行有性繁殖的。两个临近的酵母细胞各自伸出一根管状的原生质突起，随即相互接触、融合，并形成一个通道，两个细胞核在此通道内结合，形成双倍体细胞核，然后进行减数分裂，形成4个或8个细胞核。每一子核与其周围的原生质形成孢子，即为子囊孢子，形成子囊孢子的细胞称为子囊。,霉菌,定义：霉菌为“丝状真菌”的统称，即生长在培养基上是绒状、蜘蛛网状、絮状等的真菌。,霉菌,形态结构 、霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝构成，许多菌丝交织在一起称为菌丝体。 2、霉菌菌丝有两类 无隔膜菌丝：菌丝为长管状单细胞 多数为有隔膜菌丝：菌丝由横隔

9、膜分隔成成串多细胞。,霉菌,菌落特征 1菌落较疏松，菌比较粗而长（霉菌直径为2-10微米，放线菌为1-1.5微米）。 2呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状。 3比细菌、放线菌菌落大几倍到几十倍。 气味：霉味、土气味、芳香味、无味等。,霉菌,霉菌的繁殖：无性孢子直接由生殖菌丝的分化而形成，常见的有节孢子、厚垣孢子、孢囊孢子和分生孢子。有性孢子的产生不及无性孢子那么频繁和丰富，它们常常只在一些特殊的条件下产生。常见的有卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子,外界因素对微生物的影响,1.温度 2.PH值 3.氧,外界因素对微生物的影响,温度：所有微生物都有一个最适宜生长和繁殖的温度。传统上有三种主要菌属：嗜冷属、

10、嗜温菌和嗜热菌。 嗜冷菌的微生物生长和繁殖的适宜温度是010，其中包括革兰氏阴性菌。如无色杆菌属和黄色杆菌属。丛实际情况来看，它们包括与冷藏食品腐败有关的主要菌属。 嗜温菌的微生物喜欢温和的生长温度，适宜温度范围是1045，嗜温菌的例子是人的致病菌，如埃希氏杆菌属、沙门氏菌属、链球菌属等，它们的最适宜生长的温度是37或者说是人的正常体温。 嗜热菌最适宜 生长温度范围是5090，嗜热菌包括生活在温泉在的细菌，如嗜热芽孢杆菌。,外界因素对微生物的影响,PH的影响,外界因素对微生物的影响,对氧的需求,微生物的生长规律,任何生物都有出生、发育、繁殖、衰老和死亡的过程。微生物也不例外。不过，微生物的生长

11、规律和大生物有些不同，大生物通常是以一个个体为对象，而微生物的生长通常指细胞数目的增加。如果把单细胞的微生物接种到体积一定的液体营养液中，在适宜的培养条件下进行培养，这些单细胞微生物就会不断增殖，细胞数目会不断增加，如果把这种增加情况画一个对数曲线，就呈现出一定的规律，叫做单细胞微生物的生长曲线。其纵坐标为每毫升培养液中微生物细胞数目的对数，横坐标为培养时间。生长曲线代表细菌在一个新的适宜的环境中生长繁殖以至衰老死亡的全部过程的动态,微生物的生长规律,污染因素,影响生产环境洁净度的因素 :尘埃及细菌污染 大气中的尘埃：烟、灰尘、花粉、雾、皮肤屑、纤维、植物、纺织品、纸张、木头、腐植质 污染来源

12、：自然现象，风、火及灰、建筑材料、地面尘埃、有机物、植物、花粉、孢子、微生物、头发、皮肤 设备：金属粒子、氯化物,污染因素,人及工业活动：燃烧、排气、烟草、衣服、鞋、轮胎、土木工程。例如：一个200万人口的城市每天产生的尘埃数量为： 鞋的磨损为 1.5吨（大于0.5m尘埃数） 轮胎磨损为 8.0吨（大于0.5m尘埃数） 抽烟为 8.0吨（大于0.5m尘埃数）,来自人的尘埃污染：衣服、皮肤、头发、嘴、鼻子、化妆品 来自口腔的污染：大于0.5m的尘粒，咳嗽70万尘粒；喷嚏140万尘粒。 来自外部空气的污染：a、未经任何处理的外部空气5*1081*1010尘粒0.1m/m3。 微生物污染的来源：随空

13、气进入，随物料进入、随人员进入,污染因素,革兰阴性菌和革兰阳性菌的典型寄居习性,不同环境微生物量,人体带的细菌和皮屑数,人体所散发的粒子数（0.3微米）,人体各部位的正常微生物,洁净室工作原则,一、 控制的原则 1、 预防外部污染物的进入（密封） 空气过滤； 保持房间处于正压状态； 气锁（防止污染物料进入在人流、物流过程中保持一定压差）； 灭菌：湿法、干法、射线灭菌、环氧乙烷、无菌过滤。 A、 灭菌方法需要经过验证； B、 如果条件允许，最好用热力灭菌； C、 产品不会在灭菌过程中被破坏； D、 用物理参数来证实灭菌效果； E、 对灭菌方法定期进行再验证。,洁净室工作原则,2、 连续消除产生的

14、污染； 流速：输入的过滤空气的量要与房间的面积相适应，换气次数25次/h； 流型：输入的过滤空气能连续排除被污染的空气 层流：空气流、空气以相同的方向流动。,洁净室工作原则,3、 限制污染现象的发生 人员：行为要符合洁净室管理规定，例如，操作行为、动作大小等； 衣服：穿戴正确，衣服无破损、头发和胡子不得外露，分体洁净服从上向下穿，上衣在裤子里边；专用鞋和鞋套； 10万级的工作服要专用，专用鞋和鞋套；万级的洁净服要连体，紧腰；高领，专用鞋和鞋套；材料不能产生污染。100级：戴兜帽、口罩、无尘灭菌乳胶手套，穿无菌鞋或鞋套，所用材料不得产生污染，无私人衣物，每次进入洁净区均需穿新灭菌的衣服。,洁净室

15、工作原则,二、 正确的更衣方法 1、 遵守洁净室的工作规范（手机、BP、笔记本、笔均不得带入，未经处理）； 2、 私人物品不得带入； 3、 人员卫生； 4、 女同志卸妆； 5、 工作帽大小合适要盖住所有的头发； 6、 戴口罩，防止口腔污染； 7、 洁净服不得接触地面； 8、 洁净鞋或鞋套不得接触地面。,洁净室工作原则,三、无菌区工作要求 1、 工作人员及授权人员方可进入（检查人员也要履行制度）； 2、 不要快速走动，避免不必要的移动； 3、 不要在层流区附近穿过，不可避免时至少要离开1m； 4、 所有地面,洁净室工作原则,四、在洁净区工作的要求 1、 手消毒； 2、 工作时手不能接触口罩； 3

16、、 揉鼻子去更衣室，但是要换口罩及手套； 4、 操作要求站立操作； 5、 不在层流下或工作台上休息； 6、 如果站立时，手臂沿身下垂，不要双手交叉或放在臀部； 7、 休息时，坐着， 放在膝盖上，不要双手交叉或双腿交叉； 8、 不要讲话； 9、 不可通过气锁讲话。 （更衣室要有高效过滤器）,洁净室工作原则,五、 洁净室清洁的概念 1、 清洁：除去肉眼可见的污染物； 2、 净化：除去肉眼看不见的污染物； 3、 消毒：消灭表面的微生物或达到规范要求的限度； 灭菌：彻底消灭微生物。从上到下；从里到外，顺序清洁、净化或消毒灭,洁净室工作原则,五、清洁剂 1、 对人及设备无毒无腐蚀性； 2、 能溶解赃物； 3、 能降低表面张力； 六、清洁方式 1、 真空吸尘，除去大粉尘； 2、 干擦，能脱落粉子； 3、 湿擦，,洁净室工作原则,七、消毒剂的分类 1、 依据用途分类 A、 破坏细胞RNA、DNA，列如：氯化物、双氧水 B、 蛋白质变性，例如：乙醇、石炭酸 C、 裂解细菌细胞膜，例如：新洁尔灭（季胺盐类） D、 与酶结合，例如：洗必泰（醋酸） 。,洁净室工作原则,高效消毒剂： 1、 含CI或I 2、 双氧水、过氧乙酸 3、 醛类：甲醛、戊二醛 4、 臭氧 5、 环氧乙烷 中效消毒剂（除细菌及芽孢外的各种微生物） 1、 醇类：乙醇、异丙醇 2、 酚类：石炭酸 低效消毒剂（只对 细