2013年最新高中生物精品教学课件：DNA的粗提取与鉴定(2)(人教版选修1).ppt

1、5.1 DNA的粗提取和鉴定，1，基础知识，(1)提取DNA的方法，1。提取生物大分子的基本思维方式，选择某种程度的物理或化学方法，分离其他物理或化学性质的生物大分子，2。DNA提取的基本思考，DNA提取，其他成分去除，利用DNA DNA和蛋白质等成分在浓度不同的NaCl溶液中溶解不同。利用牙齿特征选择合适的盐浓度，DNA就会完全溶解，杂质沉淀。或溶解其他成分，DNA析出，3 .DNA等大分子的理化性质，DNA不溶于酒精溶液，DNA不溶于酶、高温、耐洗涤剂，DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。进一步分离DNA和蛋白质。DNA不溶于酒精溶液。DNA不影响酶、高温、耐洗涤剂、蛋白质

2、水解蛋白和DNA。高温的大部分蛋白质不能忍受6080，DNA是80以上的变性，洗涤剂溶解细胞膜，去除脂质和蛋白质，但对DNA没有影响。试剂：(2)在DNA DNA中，二苯胺用蓝色、沸水染色。现象：(1)实验物质的选择；(2)破细胞，获得含DNA的滤液；(3)滤液中杂质的去除(精炼)；(4)DNA沉淀和鉴定鱼卵；猪肝；鸡血；哺乳动物的红细胞；液体培养基中培养的大肠杆菌可以选择任何含有DNA的生物物质DNA含量比较高的组织。从核DNA的数量来看，猪的38万亿，鸡的78万亿，哺乳动物的0万亿，猕猴桃的58万亿，洋葱的16万亿，豌豆的14万亿，菠菜的12万亿，大肠杆菌的1万亿。请选择一个动植物材料。没

3、有哺乳动物的血细胞核和细胞器。液体培养基中大肠杆菌的DNA杨怡减少。鱼卵是减数分裂的产物。(b)碎细胞，含有DNA的过滤器，1，动物细胞，2，植物细胞，易碎，细胞膜应溶解。鸡血细胞溶液：加入一定量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌，过滤后收集过滤器。想想为什么放蒸馏水做鸡，蒸馏水是对鸡血细胞的低渗透液体，水分牙齿大量进入血细胞，使血细胞牙齿膨胀。加入混合作用，加速鸡血细胞细胞膜，核膜破裂释放DNA，加入洗涤剂和盐，充分搅拌，研磨，过滤后收集研磨液，洗涤剂和盐的作用分别是什么？洗涤剂离子洗涤剂溶解细胞膜，有助于DNA释放食盐NaCl，DNA溶解在研磨液中，研磨，粉碎细胞壁，释放细胞核内的DNA。缺乏研磨会减

4、少提取的DNA的杨怡，看不到丝绸沉淀物，用二苯胺看不到蓝色等。，为了纯化提取的DNA，需要进一步处理过滤器。过滤器/研磨液中可能含有什么成分？答：可能含有核蛋白、多糖、RNA等杂质。研磨的目的是什么，如果不充分研磨，会对实验结果产生什么影响？1 .DNA的溶解性，2 .DNA中的酶、高温、耐洗涤剂、(3)去除过滤器中的杂质，方案2和方案3的原理有何不同？情景2:利用蛋白酶分解杂质蛋白质，将提取的DNA与蛋白质分离。案例3:利用DNA和蛋白质进行高温耐受性不同，将蛋白质变性、DNA分离、(4) DNA的析出和鉴定、滤液体积等冷却酒精溶液(体积分数95)、23min停止，在溶液中以白色丝粗提取的D

5、NA用玻璃棒向一个方向混合。2.DNA的鉴定，在两个试管中分别加入2mol/L NaCl溶液5ml。其中，在一个试管中放入DNA线，分别混合4毫升二苯胺试剂，然后放入沸水中加热5min，冷却，比较两个试管中溶液的颜色变化，观察现象。溶解史溶液加入蓝色，柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝。溶解DNA，将2mol/L的NaCl溶液稀释为0.14mol/L，使DNA最大限度地释放，在没有蓝色的情况下提取的DNA含量低，或者在实验工作中可能发生错误。再准备，4，评估专题结果，(1)是否提取DNA，练习，1，说明提取DNA的实验工作中主要步骤的目的。答：提取DNA的第一步是选择DNA含量高的生物材料。否则，在

6、实验中，在一定程度上丢失会使检测变得困难。第二阶段是DNA的释放和溶解。牙齿阶段是实验成功与否的关键。应该尽可能溶解细胞内的所有DNA。第三步是根据DNA的纯化，即DNA的溶解特性、酶和耐高温性的不同特性，尽可能地分离DNA和杂质。最后一步是鉴定检查整个实验结果的DNA。2，你认为从细胞中提取某些蛋白质和提取DNA一样容易吗？答：蛋白质提取比DNA提取难。这是因为与DNA相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更加敏感，很容易被停用。另外，由于蛋白质的空间结构多样，理化性质不同，蛋白质提取没有统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性摸索提取条件，设计特定的方法。2 .实验中NaCl的物质浓度对2 molL和0.14 molL牙齿DNA有何影响？1 .在DNA粗提取实验过程中，将蒸馏水两次放在烧杯中的作用是()。A .血液稀释，样品清洗B .血细胞破裂，NaCl浓度降低，DNA