细菌的人工培养方法及意义(平板划线)

1、第三单元 细菌的人工培养,主讲人：齐雪茹 廊坊职业技术学院动物科学系,为什么要人工培养细菌？,人工培养细菌的意义,在医学中的应用：诊断；细菌鉴定；生物制品。 在工农业生产中的应用：细菌在培养过程产生多种代谢产物，经过加工处理，可制成抗生素、维生素、氨基酸、有机溶剂、酒、酱油、味精等产品。 在基因工程中的应用：制备出胰岛素和干扰素等生物制剂。,细菌的人工培养,一、培养基 二、细菌接种技术 三、细菌生长结果观察,细菌的人工培养,一、培养基 概念: 培养基是用人工方法将多种营养物质按照各类微生物生长的需要而合成的一种混合养料。 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：,碳源、氮源、无机盐、

2、能源、生长因子、水,任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理,高压蒸汽灭菌,按物理状态不同划分,固体培养基,液体培养基,在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为1.5%-2.0%,琼脂含量一般为0.2%-0.7%,不加任何凝固剂,半固体培养基,固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏,观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定,用于增菌，大规模工业生产及在实验室进行微生物的研究,培养基的分类：,固体培养基,半固体培养基,液体培养基,按用途不同划分,基础培养基,鉴别培养基,含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物。比如 肉汤培养基。,选择培养基,利用细

3、菌代谢产物不同而使指示剂显色反应不同的原理，鉴别和鉴定细菌。如麦糠凯琼脂培养基。,营养培养基,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。如SS琼脂培养基。,在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如血琼脂培养基。,特殊培养基,如厌氧培养基。用于厌氧菌的培养。,细菌的人工培养,培养基的制备：,细菌的人工培养,二、细菌的接种技术 分离培养接种法平板划线法、平行划线法 纯种细菌接种法 固体斜面培养基接种法 液体培养基接种法 半固体培养基接种法,细菌的人工培养,平板划线分离培养

4、法,菌落,平行划线法,固体斜面接种法,（1）用左手大姆指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种和斜面试管，右手拧松棉塞、不取下。,（2）右手拿接种环，在火焰上烧灼灭菌，特别是箍处。,（3）火焰边取下两个棉塞，不能放下；烧灼管口一周。,（4）将接种环伸入试管内，冷却后，轻轻挑取少量菌体，立即将接种环抽出。,（5）火焰旁将沾有菌种的接种环迅速伸到斜面培养基的底部，由里向外画蛇形细线，线要画得细些。,（6）抽出接种环后，烧管口，塞棉塞，接种环灭菌。,液体培养基接种,固体斜面培养基接种,细菌的人工培养,三、细菌生长结果观察 固体琼脂平板上,菌落,菌苔,EMB琼脂平板上大肠菌菌落具有金属光泽,SS琼脂平板上大肠杆菌为粉红菌落,半固体培养基观察细菌动力,无运动性 有运动性,表面生长,沉淀生长,混浊生长,液体培养基上生长现象,复习思考题：,1、培养基按用途分有哪些种类？麦糠凯琼脂、SS琼脂分别属于哪类?分别用于那些菌的分离培养？