临床遗传 课件

Génétiqueclinique

1Génétiqueclinique

Lagénétiquecliniqueestunepartiedelagénétiquemédicalequiconcernelesmaladiesgénétiquesdespatientsindividuelsetleursfamilles,oulascienceetlapratique(l’art)dudiagnostic,dutraitmentetdelapréventiondemaladiesgénétiques.

GénétiquecliniqueI.DiagnosticdesmaladiesgénétiquesII.TraitmentdesmaladiesgénétiquesIII.PréventiondesmaladiesgénétiquesI.Diagnosticdesmaladiesgénétiques1.Façondudiagnosticdesmaladiesgénétiques2.Catégoriedudiagnosticdesmaladiesgénétiques3.Diagnosticgéniquedesmaladiesgénétiques

1.Façondudiagnosticdesmaladiesgénétiques(1)Examenclinique:

L’examenphysiqueestlabasedediagnosticdetouteslesmaladiesincluantlesmaladiesgénétiques.

i.Unelanguescrotalequidépasse,ledoigtincurvéetlecinquièmedoigtclinodactyliesontlessignescaractéristiquesdusyndromedeDown.ii.LagynécomastieindiquelesyndromedeKlinefelter.iii.LesignedeGowersindiqueunedystrophiemusculairedeDuchenne.(2)L’analysedel’arbregénéalogique:L’analysedel’arbregénéalogiqueestimportanteengénétiqueclinique.Elleestunoutilleplusutilepourlesmédicins,quandelleestobtenueetinterprétéeconvenablement.EllecontribueàobtenirundiagnosticcorrectEllecontribueàdéterminerlepronosticprécisEllecontribueàfaireundiagnosticprésymptomatiqueetàlapréventiondelamaladiegénétique(3)TestauLaboratoire:i.L’analysechromosomiqueii.L’observationhistopathologiqueiii.L’analysebiochimiqueiv.L’analysed’ADNIndicationpourL’analysechrosomomique1)Caractéristiquedysmorphiquesuggèreunsyndromechromosomique2)Leretardmentalinexplicable3)Etudefamilialedesanomalieschromosomiquesdestructure4)Anomaliescongénitalesmultiples5)Mortdufoetusinexplicable6)Femmeaveclapetitetailleinexplicable7)Avortementrépété8)Infertilitéprimaire9)Developmentsexuelambigu10)Cancerhématologique11)Suspectécontigudesmaladiesgéniques(Syndromedemicrodélétion)(1)Diagnosticclinique:Lediagnosticcliniqueousymptomatiqueestunprocessusquipermetd’identifierlanaturedelamaladieparl’examencliniqueetlestestsaulaboratoire.Lediagnosticdifférentielconclutlacorrectiondel’hétérogénéitédesmaladiesgénétiques.2.CATEGORIEDEDIAGNOSTICDESMALADIESGENETIQUESDiagnosticprécliniquedequelquesmaladiesautosomiquesdominantesAnomalies Examencliniqueettestlaboratoire1)Polyposeducôlon Sigmoidoscopie2)Hypercholestérolémiefamiliale Testdelipiddusang,ophthalmoscopie3)MaladiedeHuntington LogueurdeCAGréptée4)Dystrophiemyotonique Électromyogramme,examen ophthalmique5)MaladiedureinpolycystiqueadultUltrasonogrammedurein,6)MaladiedeVonHippel-LindauScannercrânienetabdominal,(hémangiomerétinal) (hémangioblastomecérébelleux)(tumeurdurein)7)Porphyrieaiguë Métabolismporphyrique(2)Diagnosticprécliniquei.Indicationdediagnosticprénatal(i)Undesparentsestunporteurdetranslocationbalancée(ii)Lamèrea35ansouplus(iii)Antécédentd’anomaliechromosomiqueoudemalfomationcongénitalechezunenfantouunfoetus(iv)Avortementsspontanésrépétés(v)Hydramnios(vi)Lamèreestporteused’ungènedéfectueuxrécessifliéauchromosomeX(vii)Mariageconsanguinavecdesanomaliesgénétique(viii)Expositionauxtératogènes(3)Diagnosticprénatalii.Techniquespourlediagnosticprénatal(i)AmniocentèsteL’amniocentèseesthabituellementréaliséeàl’hôpital.Lejourestàenviron16semainesdeladatedesdernièresmenstruationquandilya180mldeliquideetleratiodecellulevivantànon-vivantarriveaumaximum.Souslaconditionaseptiqueetlalocalisationduplacentaavecéchographie,uneponctiondanslacavitéamnoitiqueparl’abdomenmaternelestréaliséeet10-20mlduliquideestretiré.Diagrammed’aminiocentèseScannerultrasoniqueSeringueUtérusFluideamniotiqueVessieFoetusPlacentaLedosagedel’alpha-foetoprotéine(AFP)dansle

liquideamniotiqueestnécessairequandilaunrisquedudéfautdefermeturedutubeneural,c’est-à-direquel’alpha-foetoprotéinedans

lesérummaternel(MSAFP)estélévée.Lescellulesdansleliquideamniotiquesontutilespourdéterminerlesexefoetaletlecaryotype,etmesurerl’enzymefoetaleetl’analysed’ADNdufoetus.L’amniocentèseprésenteunpetitrisquedeprovoquerunefaussecouche,estiméàenviron1%.(ii)Choriocentèse(CVS)LaCVSestfaiteaux8-10semainesdelagestation.L’analysechromosomiquefoetalepeutêtreréaliséedirectmentdansles24heuresdelachoriocentèse.Labiopsieesthabituellementréaliséesouslasurveillancedel’échographieparvoietransabdominale.Diagrammedechoriocentèse(CVS)ScannerultrasoniqueCathéterVessieSeringueVagineStopVillositéschorialesFoetusUtérusMurabdominal

5-30mgdetissuestobtenuchaquefoisquipeuxêtreutilisépourladéterminationdesexe,decaryotype,destestsbiochimiqueset

del’analysed’ADN.L’analysed’ADNoulestestsbiochimiquesontbesoind’undélaide1-2semainesavecCVS,laculturedescellulesn’estpasnécessairehabituellementavec15-20mgdel’échantillon.S’ilestnécessairedeterminerlagrossesseaprèslestests,l’interruptionestpossibleau

premiertrimestre,donclaCVSesthabituellementpréféréàl’amniocentèse.TESTSDULIQUIDEAMNIOTIQUEetSESCELLULES1.LiquideamnoitiqueTestsbiochimiquesvariés2.Cellulesdansliquideamniotique1)Lesexedufoetus*2)Lecaryotypefoetal*3)Lamesuredesenzymesfoetales**4)Lediagnosticd’ADNdufoetus***CVS(choriocentèse)estsupérieuràl’amniocentèse**CVSesthabituellmentsupérieuràl’amniocentèse(iii)CordocentèseLacordocentèseestuneméthodeutiliséepourobtenirsouslasurveillancedel’échographieunéchantillonàpartirducordonombilicalparlavoietransabdominaleenutilisantuneseringuefineoupourlatransfusiondansl’utérus.Lepourcentagederisquedepertefoetalerelatifàlaprocédureestenviron1%.

Lesindicationsd’obtenirunéchantillondesangfoetalsontl’echecdelaculturedescellulesamniotiques,l’hydropsfoetalinexplicable,leretarddudévelopementfoetalsévère,etpendantlatransfusiondansl’untérus.(iv)FoetoscopieLafoetoscopieestunetechniquepermettantdevisualiserdirectementlefoetus.Letempsoptimalpourlafoetoscopieest18-20semainesdegestation.Letauxdepertefoetaledûàlaprocédureestenviron3%.

Lafoetoscopieestutilepourfairelabiopsiedelapeauoudufoiefoetal.(v)AmniographieL’opacificationdecavitéamniotiqueavecinjectiondecolorantsolubledansdel’eaupermetl’observationdufoetusparcontraste.Unepartiedumatérielcontrastéestavaléparlefoetusetletubegastro-intestinaldufoetusestmontré.Cettetechniqueestutiliséeavecsucèesdanslediagnosticdel’achondrogenesis,del’atrésiegastro-intestinalvariéeetl’herniediaphragmatique.(vi)ÉchographieBeaucoupdemalformationscongénitalespeuventêtrediagnostiquéesparunmédecinéchographeavecexpérience.L’anencéphaliepeutêtredetectédès10à12semainesdegestation,maisletempsoptimalpourdétecterlamajoritéd’anomaliesest16-18semaines.(vii)RadiographieLefoetuspeutêtreobservéparlesrayonsXde10semainesdegestation.Quelquefois,laradiographieestutiliséepourlediagnosticprénataldeladysplasiesquelettiqueetletempsoptimald’observationestà20semaines.(viii)L’analysedusérumetdel’urinematernelL’AFPélévéedanslesérummaternelestobservédans79%desfoetusaveclespinabifidaet88%desfoetusavecl’anencéphalie.

Unautreéchantillonestobtenusilaconcentrationd’AFPestélevée.L’échographieetl’amniocentèsesontindiguéessiledeuxièmedosageconfirmeuneconcentrationélevéedel’AFP.

L’analysedel’urinematernelleaunevaleurdiagnostiquequandils’agitdesanomaliesdumétabolisme:unmétaboliteanormalouunequantitéanormaledemétabolitenormalestproduitparlefoetus,éliminéparleplacentaetexcrétéparlereinmaternel,etilspeuventêtredétectésdansl’urinematernelleàlafindedeuxièmetrimestre.3.Diagnosticdesanomaliesgénétiquesindicationspourl’analysedel’ADN1)LesmaladiesmonogéniqueetmitochondrialeaveclesmutationsconnuesdugèneconcernéquiauneliaisondemarqueurdeRFLP.2)Maladiesmultifactoriellesavecl’allèleconnudugèneconcernéouaveclemarqueurliéRFLP.3)Tissudelatumeur.4)Mort-néaveclasuspiciondemaladiemétabolique,dontlegèneaétéclonéouquiaunmarqueurliédeRFLP.(1)Détectiondesanomaliesdesgènes:délétion,insertion,etréarrangement

Ex:Diagnosticgéniqueetdétectiondeporteurdansunefamilledel’HémophilieA:DélétionpartielledétectéeparRFLP1.DélétionpartielledugènedefacteurⅧ:Unefamilledel’hémophilieAdontl’anomalieresponsableestunedélétionpartielledugènedefacteurⅧ,l’indicationestdedétecterlesporteurs.3.DiagnosticdesanomaliesgénétiquesHémophilieAPorteuse(GènesdutacteurVIIIexaminés)Nonporteuse(GènesdutacteurVIIIexaminés)FemellenonexaminésDiagnosticgéniqueetdétectionduporteurdansunefamilledel’hémophiliecauséparunedéletionpartielleparRFLP2.L’analysedeRFLP:(1)BclI/lasondeB(unfragmentd’ADNc,digéréavecEcoRI,environ4.7kb,incluslesexons14-25etunepartiedel’exon26).(2)SstI/lasondeA(unfragmentd’ADNc,digéréavecKpnI,d’environ1.7kb,inclusleslesexons1-12).LegènehumaindefacteurVIIIetsadelétionpartielle3.Résultat:

II2III2III3III914.5————4.4——————1.2——————(2)Détectiondesmutationsponctuelles:i.ASOEx:Diagnosticprénataldansunefamilledeb-thalassémieparASO

1.Mutationponctuelle:UnefamilleChinoisequiadéjàunenfantatteintdeb-thalassémiesévèreàcausedelasubstitutionA→Gàlaboîte《TATA》dugènedeb-globine.Ilsattendentundeuxièmeenfant.Lediagnosticprénatalestindiqué.2.ASOhybridizationASOs:WT5’-GCTGGGCATAAAAGTCAG-3’ MT5’-GCTGGGCATAGAAGTCAG-3’UnesubstitutionAGàlaboîte“TATA”dugène-globinechezunbébéchinoisde14moisavec-thalassémiesévére

3.Résultats:L’analyseamontréquel’ADNdescellulesdeliquideamniotiqueavaitungènedeb-globinemutéetungènenormal,etlefoetusestidentifiécommeporteurdeb-thalassémie.Leconseilgénétiqueestoffertauxparents.Ex:DiagnosticdugèneetdétectiondeshétéroplasmiesasymptomatiquedansdesfamillesparPCR/ASO1.Mutationponctuelle:Troisfamillesatteintesaveclamyopathiemitochondriale,l’encéphalopathieetl’acidoselactiquedontlatransitionde3243A→GdegènetRNALeuestresponsable.2.PCR/ASOslot-blothybridization:Amorces:P1:5’-CTACTATACTCAATTGATCC-3’(n+2881-2900)P25’-GCCTGCGGCGTATTCGATGA-3’(n+3960-3941)ASOs:WT5’-ATGGCAGAGCCCGGT-3’ MT5’-TACCGTCCCGGGCCA-3’3.Résultat:DiagnosticdugèneetdétectiondeshététoplasmiesasymptomatipuesdanstroisfamillesparPCR/AS0FamilleAMTWTFamilleBMTWTFamilleCMTWTEx:Diagnosticprénataldel’anémiefalciformeparRFLPintragénique1.Mutationponctuelle:Lamutationresponsibledel’anémiefalciformeestunesubstitutionA→Taucodon6dugèneb-globine;LesmutationschangentlecodonGAG(Glu)àGTG(Val).LamutationsupprimelesitederestrictionMstⅡ.2.L’analysedeRFLP:Lasonded’ADNcdugèneb-globine/MstⅡLegènenormaldeb-globineestliéaufragmentde1.15kbetlegènedeb-globinefalciformeaufragmentde1.35kb.ii.RFLPDiagrammedelamutationfalciformeGAGGTGguisupprimeunsitedurestrictionMSTIISéquencedétectéeparlasondeChromosomespaire11Séquencedel’enzymeaerecognitionderestrictionMstIIDiagnosticprénatald’anémiefalciformeutiliséPFLPintragéniqueGAGGèneglobine

AGAGGèneglobine

s3.Résultat:L’étatexactdufoetuspeutêtrepreditsurlaprésenceouabsencedusitederestrictionMstⅡ.i.Lebutpratiqued’undiagnosticgénétiqueauniveaud’ADNestd’identifierl’anomaliedugènemutéetsuitlesgénérationsdanslafamille.L’identificationdugènemutépeutêtreaccomplieavecl’utilisationdepolymorphismed’ADNquipeutdifférencierlesdeuxallèlesd’ungèneparl’analysedeliaisonavecunmarqueurd’ADNintragéniqueouextragéniquemalgréledéfautdegènespécifique.ii.Lepolymorphismed’ADNn’estpaslamutationquicauselamaladie,maisc’estlavariationnormaled’ADNhumainequimarquelegènenormaletmutéauxdeuxchromosomeshomologues.Environ5%decesvariationspeuventêtreidentifiéesparl’analyseRFLP.(3)DétectiondugènemutéEx:DiagnosticprénataldelaphénylcétonurieparRFLP1.Led’éfautmoléculairedugènemutantinconnuDeuxfamillesayantunenfantatteintdePKUsontindiquéesdudiagnosticprénatal.Ledéfautmoléculairedugènedephénylalaninehydroxylasemutéestinconnu.2.L’analyseRFLP:Famille1:HindⅢ/phPAH247Famille2:EcoRI,BamHI/phPAH247phPAH247estunplasmidecontenantunADNccompletdePAHhumaine.(3)DétectiondugènemutéFamille1:Ilindiquequelesdeuxallèlesmutésdesparentssontliésaufragment4.0kb.LefoetusaeulemêmegénotypecommeleprobosantdePKU.Aprèsl’accouchement,PKUestconfirméchezcetenfant.2)Famille2:Touslesparentsetleproposantsonthétérozygotesdesfragments8.3kbet6.5kb,indiquantl’allèlemutédePAHestliéaufragment8.3kbdansunparentet6.5kbchezl’autreparent.L’ADNdescellulescultivéesduliquideamnoitique(No.5)esthomozygotesaufragment6.5kb,indiquantquelefoetusestunporteurdePKU.Ceciestconfirméaprèslanaissance.DiagnosticprénataldePKUparl’analyseRFLPFamille2Famille13.Résultat:Ex:Diagnosticprésymptomatique(détectiondeshétérozygotes)dansunefamilledelamaladiedeHuntingtonparRFLP1.Ungènemutéindéfiniliéaumarqueurd’ADNpolymorphique:Legène(IT15)delamaladiedeHuntingtonestclonéen1993,dixansaprèsleseffortsparlesétudesd’unesériedemarqueursd’ADN.LepremiermarqueurliéG8aétérapportéparGusellaetalen1983.PolymorphismedeG8peutêtreutilisépouridentifierl’allèleliéaugèneHDpourlediagnosticprésymptômatique.2.L’analyseRFLP:HindⅢ/lasondeG8Haplotype siteldeFragmentdeSite2deFragmentdemoléculaireHindⅢrestriction(kb)HindⅢrestriction(kb)A - 17.5 + 3.7B - 17.5 - 4.9C + 15.0 + 3.7D + 15.0 - 4.9Diagnosticprésymptômatique(détectiondeshétérozygotes)dansunefamilledelamaladiedeHuntiagtonparRFLP3.Résultats:1.ThérapiederoutinedesmaladiesgénétiquesLacombinaisondel’applicationdestrois“R”s:(1)Restriction(2)Remplacement(3)Removal(Elimination)2.ThérapiegéniquedesmaladiesgénétiquesLetransfertdegènenormalparvecteurrecombinant.II.TraitmentdesmaladiesgénétiquesThérapiederoutine

desmaladiesgénétiques(1)Restrictiondesagentsenvironmentauxpotentiellementtoxiquei.Restrictiondecertarinsaliments(i)LarestrictiondesalimentsrichesenphényalaninedanslaPKUpeutprévenirledéveloppementduretardmentalsévère.(ii)Larestrictiondesprotéineschezlesenfantsavecdéfautsducycledel’uréeestunsupplémentimportantdelathérapieplusspéciale.ii.Restrictiondecertainesremèdesettoxines(i)IndividusavecladéficiencedeG6PDdoiventéviterlesagentsoxydantscommelesremèdesantimalariauxetcertainesantibiotiques.(ii)Dansladéficiencedea1-antitrypsine,lafuméedecigaretteestundangerparticulieretpeutaccélérerladestructiondetissuepulmonaireetledéveloppementdel’emphysèmesévère.(2)Remplacementdesproduitsdéficientsoudesorganes:i.Remplacementdesproduits(i)RemplacementdufacteurⅧaétélathérapieréussiedansl’hémophilieA.(ii)Remplacementdel’a1-antitrypsinepeutarriverauniveausuffisantdansleliquidealvéolairepourneutraliserl’élastase.ii.Remplacementdel’organepartransplantation(i)Transplantationdureindanslacystinosepeutcorrigerleproblèmeleplussévèreassociéaveccettemaladie.(ii)Transplantationhépatiquechezlespatientsavechypercholestérolémiefamilialehomozygoteaboutitlaréversiondudéfautmétabolique.(iii)Transplantationdelamoelleosseusedanslamaladiedel’immunodéficiencecombinéesévèreestcurativechezquelquepatients.(3)Éliminationdesproduitstoxiquesoulesorganesaurisquededétériorationi.Éliminationdesproduitstoxiques(i)ÉliminationdebronzedanslamaladiedeWilsonparlachélationavecpénicillamineestuntraitmentefficacepourpréveniroumêmeinverserlesdétériorationshépatiquesetneurologiques.(ii)Éliminationdeferdansl’hémochromatosepeutprévenirladétériorationdufoie,ducoeur,dupancréasetdesautresorganes.ii.ÉliminationdesorganesaurisquededétériorationDanslapolyposefamilialeducôlon,ilya100%derisquedeladégénérationmalignedupolypemultiple.Lacolectomiepeutprévenirlecancerducôlon.2.ThérapiegéniquedesmaladiesgénétiqueLanaturealesméthodspourintroduiredel’ADNétrangerdanslescellulesanimalesaumodedesvirusvariés.Quandlastructureetlecycledelaviedesvirusintégrantseraélucidéetlatechnologiedel’ADNrecombinantdeveloppé,lathérapiegéniquevaêtreréalisable.2.Thérapiegéniquedesmaladiesgénétique(1)Lesstratégiespourlathérapiegénique(2)Lecycledelavied’unrétrovirus(3)Letransfertgéniqueavecdesvecteursrétrovirauxrecombinants(4)Lespremièresessaiscliniquesencourageantdelathérapiegénique(1)Lesstratégiespourlathérapiegéniquei.Remplacementdugène:Ilconcernel’éliminationd’ungènemutéetleremplacementparungènefonctionnelnormal.ii.CorrectiondugèneIlestnécessairedecorrigerspécifiquementlaséquencedugènemutésansaucunechangeadditionnelledanslegénomecible.iii.TransfertdugèneC’estunmoyendetransférerungènenormaldanslescellulesdéfectives.Ilestpossiblederestaurerunefonctiongénétiqueparintroduirl’informationnon-cibléemaisfonctionnellegénétiquedanslessitesnonspécifiquedegénomesansélimineroucorrigerlegènemuténonfonctionnel.(2)Cycledelavied’unrétrovirusi.Lecycledelavied’unrétroviruscommencequandlevirussejointàsonrécepteuretentreunecelluleetinjectesonmatérielgénétique(ARN)etlesprotéinesdanslecytoplasme.ii.L’ARNrétroviraltypiqueconcernetroisrégionscodantes:gag,poletenv,spécifiant,respectivement,lesprotéinesdelacoeurdevirus,l’enzymedelatranscriptaseinverseetlesconstitutionsdelavestedevirus.L’ARNrétroviraltypiqueaaussitroisdomainesnoncodantes-deuxappeléeslong-terminalrepeats(LTRs),uneautreappleéepsi(ψ

).Diagrammed’unrétrovirusattaquantunecelluleRétrovirusTranscriptaseréverseLiaisonCoreProtéined’enveloppeRécepteurCellulenon-infectéeiii.Danslecytoplasme,latranscriptaseinverseconvertitl’ARNrétroviralenl’ADN(leprovirus),dontlesLTRsinfluencel’activitédesgènesvirauxetfacilitel’insertiondel’ADNviraldansl’ADNdelacellulehumaine.iv.L’ADNviralintégrédirigelatranscriptiondesgènesdevirus,formantl’ARNetlesprotéinesdevirus.Alaprésencedudomaineψ,lesprotéinesdevirusenveloppentl’ARNdevirus,etl’emballedanslesparticulesviralesquibourgeonnedelacellule.(3)Transfertgéniqueavecdesvecteursrétrovirauxrecombinantsi.Constructiond’unprovirusportantlegènethérapeutique:Touslesgènesdevirussontenlevésdurétrovirusetremplacésavecungènethérapeutique,formantun

provirusthérapeutiqueψ(+).ii.Insertionduprovirusthérapeutiquedanslescellules“fabricatrices”:(i)Lesfonctionsdereplicationduprovirusthérapeutiquesontoffertparlescellulesfabricatricesderétrovirusquicontiennentleprovirusψ

(-)assistant.Psiestcrucialàl’inclusiond’ARNdanslesparticulesvirales;SansPsi,lesvirusportantl’ARNassistantnepeuventpasformer.(ii)L’introductionduprovirusthérapeutiquedanslescellulesfabricatricesaboutitàl’intégrationduprovirusetlasynthèsedel’ARNviral.Leprovirusthérapeutiquenepeutpasproduirelesprotéinesviralesquisontnécessairespouremballerl’ARNdanslesparticulesviralesparcequ’iln’apasdegènesdevirus.Lesprotéinesmanquéessontoffertesparleprovirusassistantψ(-).(iii)Danslescellulesfabricatrices,l’ARNthérapeutiqueaveclesprotéinesviralestraduitesdel’ARNviralassistantformentlesvecteursthérapeutiquessécurisantsquiportentl’ARNthérapeutiqueetn’apaslesgènesduvirus.iii.Transductiondescellulesciblespourl’implantationaveclesvecteursthérapeutiquessécurisants:Lescellulesciblessontincubéesaveclesvecteursthérapeutiques.Legènethérapeutiquevaproduirelaprotéinethérapeutique.Lesvecteursthérapeutiquesnepeuventpassereproduire.(4)Lesessaiscliniquesencourageants

delathérapiegéniquei.Thérapiegéniqued’ADApourSCID:Lathérapiegéniqued’adénosinedéaminase(ADA)pourl’immunodéficiencecombinésévèreestlepremieressaicliniqueavecsuccèsdelathérapiegéniqueauxÉtatUnis,dirigéparDr.R.M.BleasedansNIH.Lepremiercasestunefillede4ans,elleareçuunperfusionintraveineuxdeslymphocytesTportantlegèned’ADAenSept.1990.Thérapiegéniquepourladéficiencedel’adénosinedéaminaseADAVecteurderétrovirusADARecombinaisonExpressiondesgènesintroduitsADApeutsurmonterladéficienceADATransfusiondanslepatientdeladéficienceADASélectiondescellulesADADNAchromosomiqueIntégrationàdonnercertainescellulesADAExpansiondanslacultureInfectionLymphocytesTcollectéesdepatientADAii.ThérapiegéniquedufacteurⅨpourl’hémophilieB:(i)LathérapiegéniquedufacteurⅨpourl’hémophilieBestlepremieressaicliniqueavecsuccèsdelathérapiegéniqueenChine,quiestdirigéparProf.J.L.Hsuehdansl’InstituteGénétiquedel’UniversitéeFudan.(ii)LeprotocoleacommencéenDec,1991.UnvecteurrétroviralcontenantungènedufacteurⅨestutilisépourtransférerlegènedansdesfibroblastesdelapeauenculture.LesfibroblastesautologuesquisecrètentlefacteurⅨontétéinjectésouslacuticuledupatient.Deuxpatientsontreçul’essaiclinique.III.PréventiondesanomaliesgénétiquesPréventionprimaire:Lapréventionprimaireconcernelapréventiondel’apparition,leconseilgénétiqueetleguideduplanningfamilial.Préventionsecondaire:Lapréventionsecondaireconcernelapréventiondesindividusporteursdelamaladie,lediagnosticleplustôtpossible,etletraitementleplusprécocepossible.1.Conseilgénétique2.Dépistagegénétique3.Régistreetobservationpost-hospitalièregénétique4.Soingénétique1.ConseilGénétiqueDéfinition:Unprocessuséducatifquiidentifieetassistelescouplesavecunrisquepotentielpoursesdescendancesdansladécisionduplanningfamilial.Ceprocessuschercheautantquepossiblepourlescouplesd’avoirunenfantnormal.Ils’agitd’unedécisionpersonnelledescouplesd’avoirunenfant.

-Comprendrelesfaitsmédicaux,incluantlediagnostic,l’évolutionprobabledelamaladieetletraitmentconvenable;-Apprécierlemodedetransmissiondelamaladieetlerisquederécurrencechezlesprochesparents;-Comprendrelesalternativespourtraiterlerisquederécurrence.-Choisirl’actionapropriéeaurisque,aubutfamilial,auxstandardséthiquesetreligieuxetprendreunedécisionadéquate.-Faireunesurveillancelameilleurepossibledelamaladiechezlesmembresatteintset/ouaurisquederécurrence.

Préparationpourleconseilgénétique:-Evaluerlediagnostic-Rassemblerlesdossiersmédicaux-Etablirl’histoirefamiliale-Estimerlerisquederécurrence-Discuteraveclesmembresd’unprogrammegénétiquepourcompléterlapréparationEtapesduconseilgénétique:-Lacompréhensiondel’histoirenaturelledelamaladie.-Lacompréhensiondelagénétiqueapplicable:Ilestimportantdefairecomprendrelecouplelemoded’héréditédelamaladiedansleursituationparticulière.-Lacompréhensiondesrisquesentermedeprobabilité.-Lacompréhensiondeschoixapplicablespoureux.Neplusavoird’enfantTenterlachanceL’adoptionDiagnosticprénatalDivorceInséminationartificielle-Aiderlecoupleàlaréalisationdeleurchoix.Leconseildoitassurerquelesfamillesreçoiventl’aidenécessairepourréaliserlebut.(1)Estimationdesrisquesderécurrencedesmaladieshéréditairesi.Lerisquederécurrencedesmaladieschromosomiquesii.Lerisquederécurrencedesmaladiesmonogéniques.(i)Génotypesducoupledécouvert(ii)Génotypesducouplenon-découvertiii.Lerisquederécurrencedesmaladiesmultifactoriellesi.Risquederécurrencedesanomalieschromosomique(i)lesparentsnormaux:Laplupartdesanomalieschromosomiquessontsporadique.Lesparentsontlecaryotypenormalengénéral.Lerisquederécurrencepeutêtreestiméparl’incidencedemaladiedanslapopulation.(ii)lesparentsporteursdetranslocationsbalancésoudemosaïquescachés:Pourunepetitepartiedepatientsatteintsdemaladieschromosomiques,undesesparentsestporteurdetranslocationbalancéphénotypiquementnormaloudemosaïquecaché.Lerisquederécurrenceestélevéetdoitêtreestiméd’aprèslasituationconcrète.(iii)lesparentsatteintseuxmême:Lesparentsatteintsdemal