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文档简介
人民卫生出版社(第8版)
组织学与胚胎学
王世鄂
。人体解剖学与组织胚胎学系
绪论一、组织学的研究内容组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。它是以显微镜观察组织切片为基本方法,又称显微解剖学。
二、内容:1、基本组织(总论):2、器官、系统(各论):
上皮组织结缔组织肌组织神经组织
人体的组成200种Cell细胞(cell)
细胞外基质
(由细胞产生的非细胞物质)组织
Tissue器官organ系统人体4种组织按一定规律组合形成器官上皮组织
EpithelialTissue
结缔组织ConnectiveTissue
肌组织
MuscularTissue神经组织
NervousTissue基本组织形态相似,功能相近的细胞群和细胞外基质构成组织基本单位,新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态基础三、组织学常用计量单位1mm=1000μm,1μm=1000nm
问题
解决方法
观察对象太小
放大
显微镜
观察对象无色,无反差
染色(HE染色)
观察对象生化成分不同
细胞化学、免疫组织化学
观察对象是活体
培养四、组织学技术(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜观察组织切片组织切片标本—载玻片———盖玻片————组织(lightmicroscope,LM)长度单位:µm分辨率:0.2µm
石蜡切片术(Paraffinsectioning)
1.LightMicroscopy
,
LM
:用显微镜观察组织切片为最常用方法。标本要求:
保持生活状态时的形态结构。
能透光。
易分辨不同结构(1)HE染色的石蜡切片制作过程:取材、固定脱水、包埋
切片、染色
封片
取材和固定:
保持生活状态时的组织结构和成分。用固定剂如酒精、甲醛、混合固定剂,二甲苯酒精固定液
脱水:上行梯度酒精脱水,防止组织收缩。自动脱水机包埋:自动包埋机包埋材料:石蜡、火棉胶。
切片:切5
7m厚切片机MicrotomeEosin伊红
酸性染料(粉红色)
与被染物质结合结合染成红色(被染物质)嗜酸性。
Hematoxylin
苏木精碱性染料(蓝色)与被染物质结合染成紫蓝色(被染物质)嗜碱性。
染色:HE染色最常用
封片:
HE染色苏木精:染色质、核糖体伊红:细胞质、细胞外基质封片
HE染色切片标本
皮肤
卵巢(2)其他制片技术:涂片、铺片、磨片等。
磨片
牙和骨等坚硬组织可磨成薄片。
涂片血细胞和分离培养的细胞可直接涂在玻片上制成。血涂片
铺片:疏松结缔组织和肠系膜等软组织可撕成薄片铺在玻片上。铺片磨片
银染法:硝酸银、氯化金等重金属盐,其微粒附着在细胞或组织结构表面,而呈棕黑色或棕黄色。小脑蒲肯野细胞(3)特殊染色方法:银染法、铁苏木精染色等激光扫描共聚焦显微镜技术共聚焦显微镜(二)电镜技术(electronmicroscope,EM)
EM的原理和LM相似,但用电子束代替光线,磁场代替玻璃透镜。
(二)电子显微镜术电子显微镜下才能看到的结构称超微结构。1.透射电镜:电子密度高:电子密度低:2.扫描电镜:
分辨率:0.2nm计量单位:nm(纳米)
透射电镜(transmissionelectronmicroscope):
观察细胞内部结构
扫描电镜(scanningelectronmicroscope):
观察组织或细胞表面的立体结构中性粒细胞(透射电镜)黑白反差结构影像影像较黑称电子密度高反之称电子密度低(三)组织化学(细胞化学)术
Histochemistry(Cytochemistry)化学、物理、生物化学、免疫学、分子生物学原理和技术组织学技术显示组织和细胞内化学成分的性质、位置、量的变化与功能的关系。(1)概念:+
一般组织化学术免疫组织化学术原位杂交术(2)分类肝细胞的ACP(酸性磷酸酶)化学反应有色沉淀1)一般组织化学技术PAS反应显示肝细胞内糖原2)免疫细胞化学技术Immunocytochemistry:
用免疫学的抗原与其抗体特异性结合的原理,显示组织细胞内的肽或蛋白质。此法特异性强,灵敏度高,在基础与临床研究中得到广泛应用。直接法间接法Ag+AbAg—Ab+标记抗体显色免疫组织化学染色免疫荧光染色3)原位杂交:InSituHybridization
原理:根据核酸DNA、RNA中的互补碱基专一配对的原理。
检测:细胞内DNA和mRNA序列片段,原位研究细胞合成多肽或蛋白质的基因转录物mRNA表达。原位杂交原理(四)4.组织培养技术
TissueCulture
将离体的细胞、组织在体外合适的条件下培养,使其生存和生长的技术。研究各种理化因素对其生长代谢的影响。条件:适宜的营养、生长因子、PH值、渗透压、O2和CO2浓度、温度等,还须严防微生物的污染。原代培养:首次培养的细胞。传代培养:细胞增殖到一定密度,需进行传代再培养。培养液:培养基+5%~10%胎牛血清孵育液化的精液涂片培养的早期胚(四)图像分析术:
(五)组织工程:TissueEngineering
组织工程是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织和器官的技术。四要素:种子细胞:生物材料支架:构建组织或器官:移植:我国的曹谊林和Vacanti等在裸鼠背上成功的制造了人耳形和狗耳形。
三、组织胚胎学在医学中的地位及学习方法
(一)地位
为什么要学习组织胚胎学?1.
组织学又叫微观解剖学(Microanatomy),是解剖学知识的进一步完善。2.
结构是功能的基础,学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.
只有了解正常结构,才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。4.
是相关临床课程基础5.
组织胚胎学学成绩不及格,必须补考、重修和留级。排卵、早期胚发生及其与女性生殖道关系模式图子宫内膜子宫肌层子宫外膜卵巢发育中的卵泡
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