《脱落细胞检验》课件VIP

脱落细胞检验脱落细胞检验是现代医学诊断中的重要手段，通过收集、处理和分析从人体各器官脱落的细胞，可以早期发现多种疾病特别是肿瘤性病变。本课程将系统介绍脱落细胞学的基础理论、标本采集方法、制片技术、染色方法以及各系统脱落细胞检验的临床应用，帮助学习者掌握这一重要诊断技术的理论与实践。课程目标掌握基本理论理解脱落细胞学的基本概念、历史发展及理论基础，掌握正常与异常细胞的形态学特征及鉴别要点。熟悉标本处理掌握各系统脱落细胞标本的采集、保存、运送及处理技术，确保标本质量满足诊断要求。培养诊断能力通过大量典型案例学习，培养对常见良、恶性细胞变化的识别能力，提高细胞学诊断的准确性。了解新技术应用脱落细胞学的定义1基本概念脱落细胞学是研究从人体各器官表面自然脱落或通过特定方法采集的细胞形态学特征，以及通过这些特征来诊断疾病的学科。这些细胞可能来自体表、内腔器官的黏膜表面或器官内腔。2研究对象主要研究对象包括上皮性细胞、间质细胞、血液细胞及其他特殊类型细胞。通过观察这些细胞的形态特征、排列方式、染色性等变化来判断病理状态。诊断目的脱落细胞检验的历史1早期探索(19世纪)1838年，JohannesMüller首次描述了恶性肿瘤细胞的形态特征。1847年，Pouchet首次对阴道脱落细胞进行系统研究，为细胞学诊断奠定了基础。2技术确立(20世纪初)1917年，GeorgesPapanicolaou开始研究阴道脱落细胞，并在1928年提出通过阴道脱落细胞可以诊断宫颈癌。1943年，他与HerbertTraut合作发表了里程碑式论文，确立了宫颈细胞学检查在癌症筛查中的地位。3广泛应用(20世纪中期)1945年后，Papanicolaou染色法被广泛应用于各系统脱落细胞检查。1950-1970年代，细胞学检查在全球范围内逐渐普及，成为肿瘤筛查的重要手段。4现代发展(20世纪末至今)1990年代起，液基细胞学技术出现并迅速发展。21世纪以来，免疫细胞化学、分子生物学技术与细胞学结合，大大提高了诊断的特异性和敏感性。脱落细胞检验的优势微创无痛多数脱落细胞采集方法简单、无创或微创，患者痛苦小，接受度高。相比组织活检，减少了并发症风险，适合大规模筛查和随访检查。操作简便标本采集无需复杂设备和特殊环境，可在门诊进行。检验过程相对简单，成本低，周期短，可以快速获得初步诊断结果，有利于临床决策。早期发现对早期病变尤其是恶性肿瘤的早期发现具有重要价值。例如宫颈癌筛查中，可发现肉眼不可见的上皮内病变，为早期干预创造条件。普适性强几乎适用于所有体表和腔道黏膜，包括呼吸道、消化道、泌尿生殖道等多系统。对于难以获取组织的部位，如呼吸道深部、胆管等，脱落细胞检查尤为重要。脱落细胞检验的局限性诊断局限仅能提供细胞学诊断，无法判断组织结构和侵袭性，对某些疾病如早期浸润癌可能难以鉴别。细胞形态学判断具有一定主观性，需要经验丰富的细胞病理医师。取材不全采集到的细胞可能不代表病变的全貌，特别是深部病变或生长不均匀的病变。某些部位的细胞采集困难或数量不足，影响诊断准确性。假阴性风险由于取材不全、细胞保存不良或制片质量问题，可能出现假阴性结果。某些良恶性病变的细胞形态相似，增加鉴别难度。技术要求对标本采集、固定、处理和染色等各环节的技术要求高，任何环节的失误都可能影响最终诊断。要求医师具备丰富的细胞形态学知识和经验。细胞学基础知识细胞的基本结构典型的细胞由细胞膜、细胞质和细胞核三部分组成。细胞膜是细胞的屏障，调控物质出入；细胞质包含多种细胞器，负责细胞的代谢活动；细胞核含有DNA，控制细胞的遗传信息和生命活动。细胞的类型人体细胞可分为上皮细胞、间质细胞、血液细胞等。上皮细胞覆盖于体表和器官表面，是脱落细胞检查的主要对象；间质细胞位于组织间质中；血液细胞主要包括红细胞、白细胞和血小板。细胞的生命活动细胞不断进行新陈代谢、生长、分裂、分化和凋亡等活动。在病理状态下，细胞的生命活动会发生变化，表现为形态和功能的异常，这是脱落细胞学诊断的基础。正常细胞的形态特征鳞状上皮细胞来源于表皮、口腔、食管等部位。形态呈多角形或圆形，胞质丰富透明，核小而圆，染色质细腻均匀。可分为基底细胞、旁基底细胞、中层细胞和表层细胞等不同分化阶段。柱状上皮细胞存在于呼吸道、消化道和生殖道等处。呈柱状或立方形，细胞极性明显，基底部有椭圆形核，顶端常有纤毛或微绒毛。胞质透明或略带嗜酸性，核染色质均匀。血液和间质细胞在各类脱落细胞标本中常可见到。中性粒细胞核多叶，胞质含特异性颗粒；淋巴细胞圆形，胞核圆而大，胞质稀少；巨噬细胞体积大，胞质丰富，常含吞噬物质。细胞周期G1期（间期1）细胞分裂后的生长期，细胞体积增大，合成RNA和蛋白质，为DNA复制做准备1S期（合成期）DNA复制阶段，染色体数量加倍2G2期（间期2）为有丝分裂做最后准备，合成分裂所需蛋白质3M期（有丝分裂期）细胞分裂为两个子细胞，包括前期、中期、后期和末期4G0期（静止期）部分细胞暂时或永久退出细胞周期，不再分裂5细胞周期是细胞从一次分裂完成到下一次分裂完成所经历的全过程。正常细胞周期受到严格调控，而恶性细胞常表现为调控机制失调，导致无限增殖。在脱落细胞学中，观察细胞核的形态变化可以判断细胞所处的周期阶段及其异常。细胞病变的基本类型1恶性病变核质比例显著增大，核染色质增粗、分布不均2上皮内病变细胞极性部分或完全丧失，核异型性明显3化生一种成熟上皮转变为另一种类型的上皮4增生细胞数量增多但形态正常或轻度改变5炎症炎性细胞浸润，上皮细胞反应性变化细胞病变是指细胞在各种致病因素作用下发生的形态和功能改变。在脱落细胞学检查中，通过观察细胞的大小、形态、排列、染色性等特征，可以判断病变的性质和程度。理解细胞病变的基本类型是准确进行细胞学诊断的关键。标本采集概述制定采集计划根据临床表现和可能的病变部位，确定适当的标本类型和采集方法。考虑患者的身体状况和检查的可行性。准备采集工具根据采集部位选择合适的工具，如刷子、拭子、穿刺针等。准备固定液、载玻片和标本容器。执行标准操作按照标准操作程序进行标本采集，确保获取足够的目标细胞。避免污染和细胞损伤。正确处理保存采集后立即进行固定或制片，防止细胞自溶和变形。标本容器正确标记，记录相关临床信息。标本采集的一般原则1充分准备采集前明确检查目的，了解患者病史和检查部位的解剖特点。向患者解释检查的必要性和过程，获得知情同意。准备所需的器材和固定液，确保标本容器已正确标记。2精准取材准确定位病变部位，优先采集可疑病变区域的细胞。采集时动作应轻柔而有效，避免对组织造成过度损伤。确保采集到足够数量的目标细胞，必要时可多点取材或重复取材。3及时处理采集后立即进行固定或制片，避免细胞干燥和变形。不同类型标本使用适当的固定液，固定时间要适当。标本和申请单要一一对应，避免混淆。4完整记录详细记录患者临床资料、取材部位、可疑诊断等信息。标注标本类型、采集时间和固定方式。特殊情况应予以说明，如既往治疗史、妊娠状态等。呼吸道标本采集痰液标本最简便的呼吸道脱落细胞采集方法。要求患者晨起深呼吸后咳出深部痰液，连续采集3天效果最佳。痰液应立即固定在95%酒精或痰液固定液中。适用于中央型肺癌的初筛和随访。支气管刷检通过纤维支气管镜将细胞刷伸入可疑病变部位轻刷，然后将刷头在载玻片上轻轻滚动涂抹。可直接制片喷固或置于固定液中。对于可见的支气管内病变，诊断阳性率可达90%以上。支气管灌洗通过支气管镜向目标部位注入少量生理盐水后回收，收集的灌洗液经离心沉淀后制片。适用于周围型病变和弥漫性病变，可获取较广范围的细胞。消化道标本采集1食管刷检通过内镜引导特制刷子摩擦可疑病变部位2胃刷检针对胃内可见病变进行定点刷取取材3胆道刷检经ERCP导入细胞刷对胆管狭窄处刷取4结肠刷检结肠镜检查同时进行可疑区域细胞采集消化道脱落细胞检查主要依赖内镜技术辅助进行。采集前患者需要进行相应的肠道准备。各部位采集的细胞应立即固定或制片，避免消化酶对细胞的破坏。消化道刷检与活检联合应用可提高恶性病变的检出率，尤其对于表浅病变和黏膜下病变具有互补作用。泌尿生殖系统标本采集尿液标本首选晨尿或随机尿的中段尿，采集前应清洗外生殖器。24小时内三次留取的尿液标本可提高检出率。尿液应在2小时内处理，或加入适当的保存液。膀胱冲洗液通过导尿管注入生理盐水后回收，可获得较多的膀胱上皮细胞。对于膀胱上皮内癌和原位癌的检出具有优势。冲洗液应立即离心处理或加入固定液。宫颈/阴道细胞采集使用宫颈刷和拭子分别从宫颈管和宫颈外口采集细胞。患者应在非月经期进行检查，检前24小时避免性生活和阴道用药。立即进行固定或液基制片。前列腺按摩液通过直肠指诊按摩前列腺，收集从尿道口流出的前列腺液。适用于前列腺炎和前列腺癌的辅助诊断。标本应立即制片并固定。体腔积液标本采集胸腔积液通过胸腔穿刺获取，采集时应严格无菌操作。初次穿刺的积液最有诊断价值。建议采集20-50ml积液，使用肝素或EDTA防凝。标本应在1小时内处理，避免细胞溶解和变形。腹腔积液经腹腔穿刺采集，穿刺点通常选在左下腹或脐下区域。采集的积液应注意观察颜色和性状。标本处理与胸腔积液相同，可添加适量抗凝剂防止凝固。心包积液在超声引导下进行心包穿刺获取。由于量少且风险高，每次穿刺都应注重细胞学检查。处理时应轻柔，避免细胞破坏。恶性心包积液常见于肺癌和乳腺癌转移。脑脊液通过腰椎穿刺获取，通常采集3-5ml。标本极易变质，应立即处理或加入等量95%酒精固定。细胞离心前应计数，离心时转速不宜过高，以防细胞损伤。标本固定的重要性防止自溶细胞离开机体后，内含的消化酶会导致自溶，固定剂可迅速灭活这些酶，防止细胞结构破坏。自溶会导致细胞核模糊、染色质结构不清，严重影响诊断判断。保存形态固定剂能使细胞蛋白质变性沉淀，保持细胞原有的形态和结构关系。良好的固定可保存细胞核的精细结构，使染色质分布模式清晰可见，这对鉴别良恶性至关重要。抑制微生物抑制标本中微生物的生长，防止细胞被细菌和真菌破坏。这对于含有大量微生物的标本（如痰液、尿液）尤为重要，可防止细菌过度生长掩盖真实细胞学改变。增强染色效果适当的固定可增强随后的染色效果，使细胞内不同结构的染色性差异增强。这有助于区分细胞核、细胞质及各种细胞器的特征，提高形态学分析的准确性。常用固定液介绍固定液类型主要成分适用标本特点95%乙醇95%乙醇涂片标本、小型组织固定快速，保存核染色质结构良好，Papanicolaou染色效果佳10%福尔马林甲醛水溶液组织块、细胞块渗透性好，可长期保存，但可能导致核染色质收缩Saccomano液50%乙醇+2%聚乙二醇痰液、支气管冲洗液保存完整性好，可保存液体标本数周CytoRich含甲醛和乙醇的混合液液基细胞学标本溶解红细胞和黏液，保存上皮细胞形态Carnoy液乙醇+氯仿+冰醋酸富含黏液的标本溶解黏液效果好，固定速度快ThinPrep液甲醇为基础的保存液液基细胞学标本专用于ThinPrep液基细胞学系统，保存时间长选择合适的固定液对于保证脱落细胞标本的质量至关重要。不同类型的标本和检测目的可能需要不同的固定液。固定时间也是影响标本质量的关键因素，固定不足或过度固定都会影响细胞形态和染色效果。标本运送和保存1直接涂片标本涂片后立即用95%乙醇固定或细胞固定喷雾喷固，固定时间至少15分钟。固定后的涂片可在室温下保存数日，需防止灰尘污染和机械损伤。长期保存应放入盒中，避免阳光直射。2液体标本尿液、体腔积液等液体标本应在采集后2小时内处理。如不能立即处理，可加入等量的95%乙醇或专用保存液，在4℃冷藏可保存24-48小时。标本容器应密封，防止泄漏和污染。3液基细胞学标本采集工具直接放入专用保存液中，密封后可在室温下保存数周至数月。运送过程中应避免剧烈震动和极端温度。每个容器应清晰标记患者信息和采集日期。4运送要求标本运送应使用专用运送箱，确保标本不会倾倒或破损。附带完整的申请单，包含患者信息、临床诊断和采集部位等关键信息。特殊标本（如脑脊液）应标记"急诊"，优先处理。涂片制作技术脱落细胞学检查的质量很大程度上取决于涂片制作的技术。良好的涂片应该细胞分布均匀，不重叠，背景清晰，细胞形态保存完好。根据不同类型的标本和检查目的，可选择直接涂片法、离心沉淀涂片法、液基细胞学技术或细胞块技术等不同方法。掌握标准化的涂片制作技术对提高细胞学诊断的准确性至关重要。直接涂片法材料准备清洁干燥的载玻片、铅笔（标记）、采集工具（刷子、拭子等）、95%乙醇固定液或喷雾固定剂、防尘盒。载玻片应提前标记患者信息和部位，使用铅笔在磨砂端标记。标本采集使用适当的工具从目标部位采集细胞。确保采集到足够数量的目标细胞，必要时可多点取材。采集后立即进行涂片，避免标本干燥。涂片技术将采集的细胞轻轻均匀地涂抹在载玻片上。拭子类标本可采用旋转涂抹法；刷子类标本可采用轻轻滚动法；液体标本可直接滴加少量于载玻片上。固定处理涂片完成后立即固定，不要等待干燥。可将载玻片浸入95%乙醇中至少15分钟，或使用专用细胞固定喷雾从20-30厘米距离均匀喷洒。离心沉淀涂片法预处理液体标本（如尿液、胸腔积液）先进行宏观观察，记录颜色、浑浊度等特征。必要时加入抗凝剂防止凝固。若标本量大，可取10-50ml进行处理；若有沉淀物，应充分混匀。离心分离将液体标本置于离心管中，以1000-1500rpm离心5-10分钟。离心力不宜过大，以免损伤细胞结构。离心后小心倒出上清液，保留底部沉淀物。涂片制作用吸管吸取少量沉淀物，滴于载玻片上。可用另一载玻片以45°角轻轻推匀，形成均匀薄层。也可使用旋涂法，将细胞均匀分布于圆形区域内。固定染色涂片制作后立即固定，可使用95%乙醇浸泡15-30分钟，或使用细胞固定喷雾。固定后进行常规Papanicolaou染色或其他适当染色。细胞块技术基本原理细胞块技术是将液体标本中的细胞富集、凝固成类似组织块的标本，然后按常规组织学方法进行切片和染色。这种方法可以最大限度地保留细胞团或细胞之间的关系，便于观察细胞的排列方式和结构特征。制作方法常用方法包括：①血浆-凝血酶法：加入血浆和凝血酶使细胞沉淀物凝固；②琼脂包埋法：将沉淀物与融化的琼脂混合后冷却凝固；③组织胶法：使用专用组织胶将细胞凝聚。凝固后的细胞块经固定、脱水、透明、石蜡包埋后进行切片。应用优势细胞块技术可以获得多张连续切片，便于进行多种特殊染色和免疫组化检查。对于细胞量少、分散的标本特别有价值。这种方法能更好地保存细胞形态和抗原性，提高诊断的特异性和敏感性，尤其适用于体腔积液和穿刺标本。液基细胞学技术样本采集使用专用采集器具（如宫颈刷、拭子等）收集细胞。与传统方法不同，采集后的工具不是直接涂抹在载玻片上，而是放入含有保存液的专用容器中，使细胞充分释放到保存液中。样本处理标本送检后，通过专用仪器进行处理。处理过程包括均质化（分散细胞团），过滤（去除黏液、血液和碎片），离心富集（浓缩细胞）等步骤，最终将细胞均匀地转移到载玻片上。制片染色制片方式有两种主流系统：ThinPrep（薄层过滤转移法）和SurePath（密度梯度离心法）。制成的薄层细胞涂片经固定后进行Papanicolaou染色或其他特殊染色，形成单层细胞分布。技术优势液基细胞学与传统涂片相比具有多项优势：背景清晰（去除血液和炎性渗出物），细胞分布均匀不重叠，保存完整度高，可制作多张同质涂片，便于进行辅助检查如HPV检测、免疫细胞化学等。常规染色方法Papanicolaou染色最常用的细胞学染色方法，可显示细胞核和细胞质的精细结构。细胞核呈蓝色或紫色，角化细胞质呈橙色至橙红色，非角化细胞质呈蓝绿色或粉红色。特别适合观察上皮细胞的成熟度和异型性。H-E染色组织学和细胞学中的基础染色方法。苏木精染核呈蓝紫色，伊红染细胞质呈粉红色。操作简便，可显示细胞的基本形态特征，但对细胞质内结构的显示不如Papanicolaou染色清晰。Giemsa染色常用于血液细胞和微生物的显示。细胞核呈红紫色，细胞质呈浅蓝色，显示细胞质内颗粒的能力强。特别适用于淋巴细胞、浆细胞等血液系统细胞的观察和某些微生物的识别。Papanicolaou染色法核染色使用苏木精染液进行核染色，时间通常为5-10分钟。染色后细胞核呈蓝色或蓝紫色，染色质结构清晰可见。后用自来水冲洗，进行"蓝化"处理，使蓝色稳定。细胞质染色I使用OG-6（橙G）染液染色2-4分钟。这一步骤主要染角化细胞，使其呈橙色至橙红色。染色后用95%酒精洗去多余染料。细胞质染色II使用EA-50或EA-65染液染色3-5分钟。EA染液含光绿和伊红成分，可将非角化上皮细胞染成蓝绿色或粉红色，红细胞染成粉红色。染色后再次用95%酒精洗去多余染料。脱水透明封片通过梯度酒精（80%、95%、无水酒精）脱水，二甲苯透明，最后用中性树胶封片。完成的切片可长期保存，染色效果稳定。H-E染色法标本准备固定后的涂片或细胞块切片首先需要脱蜡（如果是石蜡切片）和水化。由无水酒精至梯度酒精（95%、70%），最后到蒸馏水，使细胞充分吸水，便于后续染色。核染色将水化后的切片浸入苏木精染液中3-5分钟。苏木精是碱性染料，可与细胞核内的DNA/RNA等酸性成分结合，使细胞核呈蓝紫色。染后用流水冲洗5-10分钟，进行"蓝化"处理。细胞质染色将切片浸入伊红Y染液中1-3分钟。伊红是酸性染料，可与细胞质内的碱性蛋白质结合，使细胞质呈粉红色。染色后用蒸馏水短暂冲洗，去除多余染料。封片处理染色后的切片经梯度酒精（70%、95%、无水酒精）脱水，二甲苯透明，最后用中性树胶封片。完成的切片可长期保存观察。特殊染色方法1PAS染色过碘酸-希夫染色可显示细胞内的多糖、黏蛋白和糖蛋白。这些物质与染料结合后呈洋红色。常用于识别真菌（如白色念珠菌），鉴别黏液细胞和腺癌细胞中的黏液，也可显示基底膜和刷状缘等结构。2Alcian蓝染色特异性染色酸性黏多糖，如透明质酸和硫酸软骨素等。这些物质染色后呈鲜蓝色。常用于鉴别黏液性腺癌和显示细胞外基质的酸性黏多糖成分。与PAS染色联合使用可区分不同类型的黏液。3Giemsa染色主要用于血液细胞和骨髓细胞的染色，也可用于显示某些微生物。细胞核呈紫红色，细胞质呈浅蓝色，嗜酸性颗粒呈橙红色，嗜碱性颗粒呈深紫色。对幽门螺杆菌、衣原体等病原体有较好的显示效果。4Gomori's银染色显示细胞内网状纤维和某些微生物。银染料会与组织中的还原性物质反应，形成黑色的银沉淀。常用于显示肝细胞周围的网状纤维，以及某些真菌（如隐球菌、曲霉菌）和原虫。免疫细胞化学染色基本原理免疫细胞化学染色基于抗原-抗体特异性结合的原理，通过标记的抗体检测细胞内特定抗原的存在和分布。标记物通常为酶（如辣根过氧化物酶）或荧光染料，与底物反应后产生有色产物或荧光信号，显示抗原的位置和含量。技术方法常用方法包括直接法（一步法）和间接法（两步或多步法）。直接法使用带标记的特异性抗体直接与抗原结合；间接法先使用未标记的特异性抗体（一抗）与抗原结合，再用标记的次级抗体（二抗）与一抗结合，形成抗原-一抗-二抗复合物。临床应用在脱落细胞学中，免疫细胞化学染色主要用于：①鉴别良恶性（如p53、Ki-67等增殖标志物）；②确定肿瘤起源和类型（如CK7/CK20、TTF-1、ER/PR等）；③判断预后和治疗反应（如HER2、EGFR等）；④检测特定感染（如HPV、CMV等）。细胞学诊断系统描述性报告系统最传统的报告方式，直接描述所见细胞的形态特征和病理改变，给出诊断意见。优点是描述详细全面，缺点是主观性较强，医师间可能存在较大差异。1分级系统将细胞学改变按严重程度分为不同等级，如Papanicolaou分级法（I-V级）、Bethesda系统等。优点是简明直观，易于临床理解，缺点是可能过度简化复杂的病理变化。2数值评分系统对多个形态学参数（如核大小、染色质、核仁等）进行量化评分，总分反映病变严重程度。优点是客观性较强，缺点是操作复杂，不同评分系统结果可能不一致。3标准化术语系统如TBS（TheBethesdaSystem）系统，使用统一的术语描述细胞学发现，并给出明确的诊断建议。优点是规范统一，便于沟通和质量控制，目前已在多个领域推广应用。4TheBethesdaSystem(TBS)系统1高度鳞状上皮内病变(HSIL)高度异型细胞占主导，提示重度病变2低度鳞状上皮内病变(LSIL)轻度细胞异型性，常见HPV相关改变3非典型鳞状细胞(ASC)细胞异常但不足以诊断SIL4反应性改变炎症、修复等良性细胞改变5正常/阴性无异常发现或仅见良性变化TBS系统最初于1988年制定，用于规范宫颈细胞学报告，后经1991年和2001年两次修订。该系统包括三个主要部分：①标本是否满足评估要求；②一般分类（正常或异常）；③描述性诊断。TBS强调用清晰的术语传达细胞学家对临床医师的信息，并提供适当的随访和处理建议。目前TBS系统已扩展应用于其他系统如甲状腺、尿路等脱落细胞学检查。呼吸道脱落细胞学检查检查指征长期咳嗽、咯血、胸痛或胸闷；影像学检查发现肺部阴影；肺癌高危人群筛查；肺癌患者的治疗效果评估和随访。呼吸道脱落细胞学检查是肺癌等呼吸道恶性肿瘤诊断的重要手段。标本类型痰液：最简便无创的方法，适用于中央型肺癌；支气管刷检：通过纤维支气管镜取材，对可视病变敏感性高；支气管灌洗液：适用于弥漫性病变；经支气管肺活检：结合细胞学和组织学检查。临床意义可早期发现中央型肺癌和某些弥漫性肺部疾病；帮助鉴别肺炎、结核和肿瘤等疾病；指导后续诊断性检查如活检部位的选择；评估癌症治疗效果和随访中的复发情况。结果解读阴性：未见异型细胞；非特异性炎症：见炎性细胞浸润和上皮反应性变化；可疑：见可疑但不确定的异型细胞；阳性：明确见恶性肿瘤细胞，可进一步分型如鳞癌、腺癌、小细胞癌等。痰液细胞学检查标本采集采集晨起第一口深部痰液，患者应先漱口清洁口腔，然后深呼吸数次后有力咳出。连续采集3天可提高检出率。痰液应收集在清洁干燥的容器中，立即送检或加入等量的95%酒精或痰液固定液保存。标本处理实验室处理包括肉眼观察痰液性状；选取血液或黏液条纹（可能含有肿瘤细胞）进行涂片；也可采用痰液消化浓缩法或黏液溶解法增加细胞回收率；涂片后进行Papanicolaou染色。正常细胞所见正常痰液涂片可见终末气道柱状上皮细胞（有纤毛）、杯状细胞、少量鳞状上皮细胞（可能来自口腔污染）、吞噬细胞（含碳颗粒）和少量中性粒细胞、淋巴细胞等。异常细胞所见肺癌典型所见包括：鳞状细胞癌（橙红色角化细胞质，核大深染）；腺癌（细胞排列成腺泡状，核大，常见核仁）；小细胞癌（细胞小，核大胞质少，染色质粗糙，常见"核碾压"现象）；大细胞癌（细胞大，多形性明显）。支气管刷洗液细胞学检查1支气管刷检通过纤维支气管镜将专用细胞刷伸入可疑病变部位轻刷取材。适用于可见的内支气管病变，特别是中央型肺癌。刷取后的细胞可直接在载玻片上轻轻滚动涂抹，制成直接涂片；也可将刷头放入保存液中制作液基细胞学标本。2支气管灌洗通过支气管镜向目标部位注入少量（10-20ml）生理盐水后回收，一般重复2-3次。适用于周围型病变和弥漫性肺部疾病。回收的灌洗液需要离心富集细胞后制片染色。灌洗液也可用于细菌培养和特殊病原体检测。3细胞学特点与痰液相比，支气管刷洗液标本的细胞保存更完好，背景更清晰，污染更少。可见呼吸道柱状上皮细胞、肺泡巨噬细胞以及可能的肿瘤细胞。肿瘤细胞可表现为单个散在或细胞团块，具有核大、核仁明显、核染色质异常等恶性特征。4诊断价值支气管刷检对可见的内支气管病变阳性率可达80-90%，特别适合中央型肺癌。支气管灌洗对周围型肺癌的敏感性较低（30-50%），但结合其他方法如CT引导下穿刺可提高诊断率。二者联合应用可互为补充，提高总体阳性率。消化道脱落细胞学检查95%诊断准确率消化道脱落细胞学与活检联合应用时可达到很高的诊断准确率，尤其对于表浅扩散型病变3采样方法主要采样方法包括刷检法、灌洗法和印片法15分钟报告时间快速细胞学评估可在内镜检查期间完成，为临床提供即时诊断信息92%敏感性对于可见的消化道病变，刷检与活检联合应用的敏感性极高消化道脱落细胞学检查是消化系统肿瘤诊断的重要辅助手段。随着内镜技术的发展，消化道细胞学检查已广泛应用于食管、胃、十二指肠、胆道和结肠等部位的病变诊断。与组织活检相比，细胞学检查可获取更广范围的表面细胞，对表浅扩散型病变尤为有利。近年来，液基细胞学技术的应用进一步提高了消化道细胞学检查的质量和诊断准确率。食管脱落细胞学检查适应症食管慢性炎症、糜烂；食管白斑病、炎症后改变；食管胃反流病；可疑的食管癌前病变如Barrett食管；可疑的早期食管癌；内镜下表现不典型的病变；放疗后的食管癌随访等。采样方法气囊细胞采集器：无需内镜，患者吞下带气囊的管子，充气后来回拉动，刮取食管表面细胞；内镜引导下刷检：通过内镜将细胞刷导入可疑病变处进行刷取；特定病变部位印片：活检前对可疑病变直接印片取材。细胞学改变正常食管细胞为非角化鳞状上皮细胞；食管炎症见鳞状上皮细胞伴炎症和反应性变化；Barrett食管见特征性的肠化生柱状上皮；食管鳞癌细胞表现为核大、核质比增高、染色质异常和角化珠等；食管腺癌（多见于下段）细胞呈腺样排列，核偏心，胞质含黏液。胃脱落细胞学检查检查意义胃脱落细胞学检查对胃炎、胃溃疡、胃息肉和胃癌等疾病具有诊断价值。特别是对早期胃癌和弥漫浸润型胃癌，细胞学检查可以提供活检难以获取的信息。也可用于幽门螺杆菌感染的检测和胃癌术后随访。采样技术内镜引导下刷检：通过胃镜将保护套内的细胞刷伸出，在可疑病变处轻刷；胃洗涤液：通过胃镜向胃内注入生理盐水后回收，对弥漫性病变敏感；早晨空腹胃液：在未经胃镜检查前采集，可反映整个胃黏膜的情况。正常细胞形态胃黏膜上皮细胞呈柱状或立方形，排列规则，核位于基底部，胞质淡染；黏液细胞胞质充满黏液，呈空泡状；可见少量炎症细胞如中性粒细胞和淋巴细胞；偶见脱落的十二指肠和食管上皮细胞。恶性细胞特征胃腺癌细胞常成团或腺样排列，核大而不规则，染色质粗糙增多，核仁明显，胞质减少；印戒细胞癌特征性表现为胞质内含大量黏液将核挤向一侧，形成"印戒"样外观；弥漫浸润型胃癌可见散在分布的异型细胞。泌尿系统脱落细胞学检查临床意义泌尿系统脱落细胞学检查主要用于膀胱癌、肾盂癌和输尿管癌等尿路上皮肿瘤的诊断和监测。对于原位癌和高级别尿路上皮癌具有较高的敏感性，是血尿患者评估的重要组成部分。也可用于膀胱癌治疗后的定期随访监测。标本类型自然排尿：最常用的方法，通常采集晨起第二次尿或随机尿的中段；膀胱冲洗液：通过导尿管向膀胱注入生理盐水后回收，细胞保存较好；导管尿：对特定部位如输尿管或肾盂的评估；擦拭或刷检：内镜下直接从可疑病变处取材。标本处理尿液应在2小时内处理，可通过离心富集细胞或使用膜过滤技术制备涂片。目前液基细胞学技术已广泛应用于尿液细胞学检查，可显著提高细胞保存质量和诊断准确性。常规采用Papanicolaou染色。诊断标准采用Paris系统进行尿路细胞学报告，分为：①非诊断性；②阴性；③意义不明的非典型细胞；④可疑高级别尿路上皮癌；⑤高级别尿路上皮癌；⑥低级别尿路上皮肿瘤；⑦其他恶性肿瘤。高级别病变诊断特异性高（>90%），低级别病变敏感性较低。尿液细胞学检查正常尿液细胞学正常尿液细胞学可见少量尿路上皮细胞，呈圆形或椭圆形，细胞边界清晰，核圆形居中，染色质细腻均匀。可见鳞状上皮细胞（来自尿道外口），少量红细胞和白细胞。某些生理状态如妊娠可见细胞数量增多。低级别尿路上皮肿瘤细胞形态变化轻微，常呈乳头状排列，核略增大，但核质比基本正常，染色质细腻，细胞边界清晰。由于形态变化不明显，低级别肿瘤的细胞学诊断敏感性较低，常需结合膀胱镜和组织活检确诊。高级别尿路上皮癌细胞可单个散在或成小团块，胞体大小不一，形态异常，核质比明显增高，核大而不规则，染色质粗糙，常见核仁。浸润性尿路上皮癌细胞多形性更明显，背景可见坏死物质。此类病变细胞学诊断价值高，敏感性和特异性均在85%以上。女性生殖系统脱落细胞学检查宫颈细胞学最广泛应用的脱落细胞学检查，主要用于宫颈癌筛查。标准方法是采集宫颈鳞柱交界区和宫颈管的细胞。TBS系统是报告的国际标准，可指导临床处理和随访。目前液基细胞学已成为主流技术。1阴道细胞学可评估阴道炎症、感染和上皮变化，也可用于评估激素水平。特别适用于既往子宫切除患者的阴道残端癌前病变和癌症筛查。阴道腺癌和透明细胞癌在DES暴露女性中需重点关注。2子宫内膜细胞学通过特殊采样器收集子宫内膜细胞，用于异常子宫出血的评估。可发现子宫内膜增生、子宫内膜癌和其他病变。由于取材不均匀，目前多结合超声和活检使用。3输卵管和卵巢细胞学通常通过腹腔镜或剖腹手术中采集。对腹水细胞学检查阳性的病例有助于诊断卵巢癌。某些研究使用特殊刷子通过宫腔镜采集输卵管细胞，作为卵巢癌早期筛查的探索。4宫颈细胞学检查1检查准备检查前2天避免性生活、阴道用药和冲洗；非月经期进行检查；告知医师是否妊娠、激素治疗或做过宫颈手术；准备检查所需工具如阴道扩张器、采样器具、载玻片或液基细胞学容器。2标本采集传统方法使用木质或塑料刮板采集宫颈鳞柱交界区细胞，使用刷子采集宫颈管细胞；现代方法通常使用一种特制的刷子同时采集两个部位的细胞；采集时轻轻旋转刷子确保充分取材。3标本处理传统涂片法：立即将采集的细胞均匀涂抹在载玻片上，迅速喷固或置入95%酒精中固定；液基细胞学：将采集工具放入含保存液的专用容器中，送检后通过特殊设备处理制片。4结果报告采用TBS（TheBethesdaSystem）系统报告：①标本满意度；②总体分类（阴性或异常）；③描述性诊断（如NILM、ASC-US、LSIL、HSIL、AGC等）；④必要时建议进一步检查和随访间隔。阴道细胞学检查检查指征阴道不规则出血或分泌物增多；阴道炎症、瘙痒或不适；既往有子宫切除的患者进行阴道残端筛查；DES（己烯雌酚）暴露女性的随访；激素水平评估；性传播疾病筛查等。阴道细胞学检查在某些特定人群中具有重要的筛查价值。标本采集使用无菌棉拭子或专用刷子从阴道壁不同部位采集细胞。阴道穹窿是重点采集部位，尤其是对于子宫切除后的患者。对于激素评估，通常从阴道侧壁中上1/3处采集。采集前应清除过多分泌物，但不应冲洗阴道。细胞学特点正常阴道涂片主要见鳞状上皮细胞，细胞形态反映激素水平：雌激素作用下细胞较大，胞质透明；孕激素作用下细胞折叠、卷曲；阴道炎症可见大量白细胞和细菌；阴道上皮内瘤变（VAIN）细胞形态类似宫颈上皮内瘤变；阴道原发癌较为罕见，细胞学表现与宫颈癌相似。体腔积液细胞学检查临床意义体腔积液细胞学检查对鉴别良恶性积液具有重要价值。可确定积液是由炎症、感染、结核、肿瘤转移等原因引起。对于恶性积液，可进一步判断肿瘤类型和可能的原发灶。在无明确原发灶的情况下，积液细胞学阳性是确诊恶性肿瘤的直接证据。标本处理新鲜积液应尽快处理，可加入抗凝剂防止凝固。处理方法包括直接涂片、离心沉淀涂片、薄层液基制片和细胞块制作。细胞块技术特别有价值，可进行多种特殊染色和免疫组化检查，帮助确定肿瘤来源。良性积液特点良性积液中的主要细胞类型有中皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等。反应性中皮细胞可表现为轻度异型性，但核均一，细胞边界清晰，常形成小片状排列。炎症性积液富含中性粒细胞；结核性积液富含淋巴细胞。恶性积液特点恶性细胞可单个散在或形成团块，表现为核大、核质比增高、核形不规则、染色质异常和核仁明显等特征。腺癌细胞常呈腺样排列；鳞癌细胞胞质丰富角化；淋巴瘤细胞排列分散，核染色深；间皮瘤细胞呈上皮样排列。免疫标记对鉴别诊断极为重要。胸腔积液细胞学检查1临床意义胸腔积液是临床常见的病理状态，可由多种原因引起，包括炎症、感染、心力衰竭、肾病、肝硬化、肿瘤和结核等。细胞学检查是鉴别良恶性胸腔积液的重要手段，对恶性胸腔积液的诊断特异性可达95%以上，但敏感性较低（约50-70%）。2常见肿瘤类型最常见的恶性胸腔积液来源是肺癌和乳腺癌。其他常见的有卵巢癌、胃癌、淋巴瘤等。不同原发肿瘤的细胞学特征有所不同：肺腺癌细胞常呈腺样排列，可见黏液；乳腺癌细胞常形成单层片状排列，偶见双核或多核细胞；卵巢癌细胞常呈砂粒体样结构。3中皮细胞与肿瘤细胞鉴别反应性中皮细胞与恶性细胞的鉴别是胸腔积液细胞学的难点。中皮细胞特点：细胞边界清晰，可见双核，核圆而规则，染色质细腻，常形成平面蜂窝状排列。免疫组化标记如Calretinin、WT-1阳性，而CEA、TTF-1、EMA等上皮标记阴性或不典型表达。4间皮瘤诊断恶性间皮瘤是胸腔积液细胞学的特殊挑战。其细胞形态学特征包括细胞排列成球状或乳头状，核大而圆，有明显核仁，胞质丰富呈"两相性"。确诊需要免疫组化支持：Calretinin、CK5/6、WT-1、D2-40阳性，而CEA、BerEP4、B72.3等腺癌标记物阴性。腹腔积液细胞学检查标本处理腹腔积液应在采集后2小时内处理。可加入肝素或EDTA防止凝固。处理方法包括常规离心沉淀涂片、液基细胞学制片和细胞块制作。细胞块特别适合后续的免疫组化和分子检测，提高诊断准确性。染色方法通常采用Papanicolaou染色，必要时辅以Giemsa染色或PAS染色等。良性细胞学改变良性腹水中常见细胞包括中皮细胞、巨噬细胞和炎症细胞。反应性中皮细胞可增大，胞质丰富，偶见双核，但核形规则，染色质细腻。肝硬化腹水特点是中皮细胞增生活跃；结核性腹膜炎见大量淋巴细胞；细菌性腹膜炎富含中性粒细胞；胰腺炎可见脂肪颗粒和坏死物质。恶性细胞学改变腹腔恶性肿瘤多来源于卵巢、胃、胰腺、结肠和乳腺等。恶性细胞常单个散在或形成团块，核大而不规则，染色质粗糙，核仁明显，核质比增高。卵巢癌细胞常呈腺样排列，可见砂粒体；胃印戒细胞癌细胞内有大量黏液将核挤向一侧；结肠癌细胞常含有黏液空泡；间皮瘤细胞呈上皮样排列。脑脊液细胞学检查标本采集与处理脑脊液通常通过腰椎穿刺获取，理想采集量为3-5ml。标本极易变质，应在30分钟内处理。处理前应进行细胞计数和生化检查。由于细胞极少，需要特殊的富集方法如细胞离心涂片器（Cytospin）制片。制片后立即进行固定和染色，通常采用Papanicolaou染色或Wright染色。正常脑脊液细胞学正常脑脊液中细胞极少，通常每微升不超过5个细胞，主要为小淋巴细胞。可见少量单核细胞和脉络丛上皮细胞。脉络丛上皮细胞呈立方形或柱状，排列规则，细胞边界清晰，核圆形居中，染色质细腻。非肿瘤性疾病改变病毒性脑膜炎主要见淋巴细胞增多；细菌性脑膜炎见大量中性粒细胞，背景可见细菌；真菌性和结核性脑膜炎可见淋巴细胞、组织细胞和少量中性粒细胞；自身免疫性疾病如多发性硬化症可见浆细胞和活化的淋巴细胞；脑出血时可见红细胞和含铁血黄素巨噬细胞。肿瘤性病变脑原发性肿瘤如胶质瘤、室管膜瘤等很少脱落到脑脊液中；转移性肿瘤如乳腺癌、肺癌、黑色素瘤和淋巴瘤等可通过血行或直接蔓延累及脑膜，导致脑脊液中出现恶性细胞；白血病可浸润中枢神经系统，脑脊液中可见白血病细胞。肿瘤细胞通常呈单个散在或小团块，核大，核质比增高，染色质异常。乳腺脱落细胞学检查细针穿刺细胞学细针穿刺是乳腺细胞学检查最常用的方法。使用23-25G针头在局部麻醉或直接穿刺，多方向采集细胞。适用于触及的乳腺肿块，也可在超声或立体定位引导下进行。穿刺细胞直接涂片并立即固定或制作液基细胞学标本。优点是简单、快速、创伤小，阳性率可达90%以上。乳头溢液细胞学适用于有乳头溢液的患者。采集方法是轻轻挤压乳房，收集从乳头流出的液体，直接涂片或加入固定液。溢液应观察颜色、性状，血性溢液恶性可能性较高。细胞学可鉴别导管内乳头状瘤、乳管扩张症和导管癌等。敏感性较低（约50-60%），常需结合其他检查。导管灌洗液细胞学通过特殊导管插入乳头开口，注入少量生理盐水后回收。适用于高危人群筛查和原位癌早期发现。导管灌洗液经离心富集后制片染色。与乳管镜检查结合使用可提高早期病变的检出率。这是一种新兴技术，目前主要用于部分高危人群的筛查和研究。甲状腺细胞学检查检查适应症甲状腺结节是最常见的甲状腺疾病，细针穿刺细胞学检查是评估甲状腺结节最有价值的方法。适应症包括：超声提示可疑的甲状腺结节（>1cm或有可疑特征的小结节）；快速生长的甲状腺结节；伴有颈部淋巴结肿大的甲状腺结节；硬质或固定的结节；既往有头颈部放疗史的患者的甲状腺结节。穿刺技术通常使用23-25G细针在超声引导下进行穿刺。基本步骤包括：结节定位、皮肤消毒、局部麻醉（可选）、插入针头、多方向采集细胞（通常不使用负压）、制作涂片、固定和染色。每个结节通常需要2-4次穿刺以获取足够的诊断材料。涂片可采用干燥后Giemsa染色或湿固定后Papanicolaou染色。报告系统甲状腺细胞学采用Bethesda甲状腺细胞学报告系统，分为六类：I类：非诊断性/不满意；II类：良性；III类：未明确的非典型性（AUS）或滤泡性病变（FLUS）；IV类：滤泡性肿瘤或可疑滤泡性肿瘤；V类：可疑恶性；VI类：恶性。不同类别有不同的恶性风险和处理建议，I、III、IV类通常需要重复穿刺或密切随访。淋巴结细胞学检查检查适应症淋巴结肿大是临床常见表现，可由炎症、感染、自身免疫病和肿瘤等多种原因引起。细针穿刺细胞学是评估淋巴结病变的快速、简便方法。适应症包括：不明原因的淋巴结持续肿大；质地异常（硬或固定）的淋巴结；已知肿瘤患者的淋巴结评估；发热伴淋巴结肿大需要快速鉴别诊断。反应性增生特点反应性淋巴结增生是淋巴结肿大最常见的原因。细胞学特征包括：多形性淋巴细胞群体，包括小、中、大淋巴细胞；可见活化淋巴细胞和免疫母细胞；浆细胞可增多；组织细胞增多，可呈星空状；坏死少见。不同类型的反应性增生如病毒感染、毛细胞白血病、结核等有各自的细胞学特点。恶性淋巴瘤特点淋巴瘤细胞学诊断具有挑战性，通常需要结合免疫表型分析。弥漫大B细胞淋巴瘤特征为大型异型淋巴细胞单一群体，核大而不规则，核仁明显；滤泡性淋巴瘤见小裂淋巴细胞混合大型中心细胞；霍奇金淋巴瘤特征性Reed-Sternberg细胞具有双核或多核，核仁大而明显。确诊通常需要流式细胞术或活检。良性细胞病变特征病变类型细胞形态特征背景特点鉴别要点炎症上皮细胞轻度增大，细胞核增大但形态规则，染色质细腻均匀大量炎性细胞（中性粒细胞、淋巴细胞）浸润，可见细菌细胞排列有序，无异型性，核质比基本正常修复细胞和核增大，核仁明显，呈片状排列，细胞极性保持常见于慢性炎症后，背景较清洁，可有少量炎性细胞核染色质细腻均匀，无明显核型异常，细胞边界清晰化生一种细胞类型转变为另一种成熟细胞类型，如鳞状化生、肠化生取决于化生类型，如鳞状化生见成熟鳞状细胞细胞成熟，核形规则，排列整齐，无异型性增生细胞数量增多但形态正常或接近正常相应类型细胞数量增加，通常背景清洁细胞增多但无明显异型性，核质比正常萎缩细胞体积缩小，核染色深，细胞密度增加背景常较干净，细胞量可减少虽然核染色质增浓但分布均匀，无核型异常良性细胞病变是脱落细胞学检查中常见的发现，正确识别这些变化对避免假阳性诊断至关重要。良性病变的关键特征是细胞保持正常的成熟过程和分化模式，尽管在数量、大小和形态上可能有变化。良性反应性变化常与炎症、修复、激素刺激等因素相关，理解这些变化的背景和机制有助于准确诊断。炎症性病变细胞学特征1急性炎症上皮细胞表现为轻度核增大，细胞质丰富，可见核周晕。背景有大量中性粒细胞浸润，可见细菌或其他病原体。上皮细胞可出现空泡变性、水肿和坏死。根据病原体不同可有特征性表现，如单纯疱疹病毒感染见多核巨细胞，真菌感染可见菌丝或孢子。2慢性炎症上皮细胞多见反应性改变，如核增大，染色质细腻，可见核仁。背景以淋巴细胞和浆细胞为主，可伴有组织细胞和巨噬细胞。长期慢性炎症可导致上皮化生，如呼吸道柱状上皮的鳞状化生，或胃黏膜的肠化生。这些化生区域的细胞在形态上与其起源部位的正常细胞不同。3特殊类型炎症结核性炎症特征为类上皮细胞团和朗格汉斯巨细胞，背景有干酪样坏死和淋巴细胞；病毒性炎症可见特征性细胞病变如核内包涵体、多核巨细胞；真菌性炎症可直接观察到真菌结构，如白色念珠菌的芽生孢子和假菌丝；寄生虫感染可见寄生虫体或卵，伴嗜酸性粒细胞增多。4肉芽肿性炎症特征是类上皮细胞和多核巨细胞的存在。类上皮细胞胞质丰富，呈上皮样排列；多核巨细胞有多种类型，如朗格汉斯巨细胞（核排列如马蹄形）和异物巨细胞（核排列无序）。常见于结核、肉瘤病、异物肉芽肿等疾病。在细胞学标本中，这些肉芽肿性病变常需与恶性肿瘤鉴别。反应性细胞变化放射治疗改变放疗后细胞表现为体积增大，常为巨细胞，胞质空泡化或嗜酸性增强。核增大，形态不规则，染色质粗糙但分布均匀，可见多核。晚期改变包括细胞坏死和数量减少。这些变化可持续数月甚至数年，与恶性细胞的鉴别要点是核染色质分布相对均匀，细胞排列尚规则。化疗改变化疗后细胞变化包括体积增大，胞质常呈空泡状或嗜酸性增强。核肿大，形态不规则，可见核碎裂和核内空泡。不同化疗药物导致的细胞改变有所不同。与恶性细胞鉴别要点是这些变化往往比较一致，细胞群体均匀受累，而非局部异型性。病毒感染改变病毒感染可导致特征性细胞改变。人乳头瘤病毒（HPV）感染可见细胞核周空晕和核染色质增浓；单纯疱疹病毒可导致多核巨细胞，核内见磨玻璃样包涵体；巨细胞病毒感染细胞核增大，含有大的嗜酸性核内包涵体，周围有晕圈。激素相关改变激素水平变化可显著影响上皮细胞形态。雌激素可导致细胞成熟，胞质增大变薄；孕激素可使细胞折叠并形成"舟状细胞"；绝经后雌激素缺乏导致萎缩性改变；内源性或外源性激素治疗可导致细胞形态特征性改变，如细胞质空泡化、颗粒增多等。上皮内病变细胞学特征1高度上皮内病变细胞高度异型性，核质比显著增高2中度上皮内病变核增大并有不规则性，染色质颗粒状3轻度上皮内病变轻度核异型，体积增大，染色质稍增多4非典型细胞细胞形态介于正常与异型之间5正常/反应性改变细胞整齐，核染色质细腻均匀上皮内病变是指上皮细胞出现异常增生但尚未侵入基底膜的状态，是许多上皮性恶性肿瘤的前驱病变。在脱落细胞学中，上皮内病变的诊断主要基于细胞核的异常特征，包括核增大、核质比增高、核形不规则、染色质分布异常和核仁增大等。细胞学检查对上皮内病变的早期发现具有重要价值，特别是在宫颈癌筛查中，可以发现并治疗癌前病变，从而有效预防浸润癌的发生。恶性肿瘤细胞学特征细胞核特征恶性肿瘤细胞核的变化是诊断的关键。特征性改变包括：核增大，核质比显著增高；核形不规则，可见核膜凹陷、切迹；染色质增多且分布不均，常呈粗颗粒状或块状；核仁增大、数量增多、形态不规则；可见核内包涵体或异常核分裂像。不同类型肿瘤的核特征有所不同，如小细胞癌核染色质呈"盐和胡椒"样。细胞质特征恶性肿瘤细胞的胞质变化也具有诊断价值。常见表现有：胞质相对减少，使核质比增高；胞质染色异常，可见异常颗粒或空泡；角化型肿瘤可见橙色角化胞质；分泌型肿瘤可见黏液空泡；某些特殊类型肿瘤有特征性胞质改变，如印戒细胞癌的偏心性黏液空泡，肾细胞癌的透明胞质。细胞排列和结构恶性肿瘤细胞的排列方式失去正常组织学模式。表现为：细胞极性丧失，排列紊乱；细胞团块排列不规则，边缘不清；可见细胞相互重叠和拥挤；腺癌可形成腺样结构；鳞癌可见细胞巢和角化珠；小细胞癌常见核碾压现象和Azzopardi效应（核染色质粘附于血管壁）。常见误诊与漏诊分析1假阴性原因标本采集不当：未取到病变部位或细胞量不足；标本处理不当：固定延迟导致细胞自溶或染色不良；肿瘤特性：某些肿瘤不易脱落细胞或仅表浅脱落；诊断经验不足：未能识别少量或形态不典型的肿瘤细胞；技术限制：常规染色无法显示某些特异性标志。2假阳性原因良性反应性改变误判：如修复性改变、放疗或化疗后改变、病毒感染等；标本污染：如阴道细胞混入尿标本造成异型细胞假象；细胞保存不良：固定不当导致细胞变形；特殊生理状态：如妊娠、激素变化导致的细胞异型性；经验不足：对正常变异范围认识不足。3降低误诊的措施加强培训：提高细胞学医师