植物生理课件 小实验3学习资料

小结

1.1单位和负号

2.1分析不同处理气孔开闭程度不同的原因.

2.2结果分析结论

叶绿体色素及其理化性质叶绿素的定量测定实验意义绿色植物的光合作用是在叶绿体中的叶绿体色素中进行的，了解叶绿体色素的组成、性质及测定对于理解光合作用的本质很有帮助。实验原理

1.1叶绿素：主要包括叶绿素a和b分子式:ChlaC55H72O5N4Mg

ChlbC55H70O6N4Mg结构式:卟啉环化合物四个吡咯环与四个=CH-组成一个大环,共轭双键形成一个大π键,环中央有一个镁原子,卟啉环决定叶绿素颜色,也是吸收可见光,并以诱导共振方式传递光能的根本所在,叶醇尾是由四个异戊二烯单位组成的双萜脂溶性:难溶于水,仅溶于酒精、丙酮、已醚、已烷等有机溶剂卟啉环头部呈极性,具亲水性;叶醇尾部具亲脂性

类胡萝卜素胡萝卜素橙黄色不溶于水

叶黄素鲜黄色溶于有机溶剂

与水混溶的有机溶剂：95％乙醇；80％丙酮CaCO3?石英砂？一、叶绿体色素的提取二、叶绿素的荧光现象叶绿素分子对光的吸收及能量的释放示意图叶绿素的荧光现象反射光（荧光）透射光记录观察到的现象并说明原因三、叶绿素的皂化作用C32H30ON4MgCOOCH3COOC20H39+2KOHC32H30ON4MgCOOKCOOK+C20H39OH+CH3OH四、叶绿素与类胡萝卜素的吸收光谱1bChla2Chla(430,670)3Chlb(450,650)4Bilin5β-Car.5

类胡萝卜素的吸收光谱叶绿素的吸收光谱说明原因五、氢和铜对叶绿素中镁的取代盐酸醋酸铜叶绿素中的镁可以被氢离子所取代而成褐色的去镁叶绿素。去镁叶绿素遇铜则成为铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常用此法制作绿色多汁植物的浸渍标本。叶绿素去镁叶绿素HClCu2+铜代叶绿素色素提取荧光皂化吸收代替方法与步骤结果说明现象；解释原因；书后思考题。注意事项：所用试剂带有强烈的氧化性和腐蚀性！！有颜色的试剂！！叶绿素的定量测定原理

根据郎伯-比尔定律,有色溶液在某一特定波长下的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比.

D=kCLk为比例系数。当溶液浓度以重量百分浓度为单位，液层厚度为１cm时，k称为比吸收系数．叶绿素的定量测定2Chla3Chlb5叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别位于663nm和645nm。在叶绿素浓度为g/L时663nm下：Chla80%丙酮k为80.02

Chlb80%丙酮k为9.27645nm下：Chla80%丙酮k为16.75

Chlb80%丙酮k为45.6光密度具有加和性质,因此可写出以下方程

D663=82.04Ca+9.27Cb

D645=16.75Ca+45.6Cb解方程得：Ca=12.7D663-2.59D645Cb=22.9D645-4.67D663注意：在此式中叶绿素浓度单位为mg/L。

CT=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663叶绿素a、b在652nm处有相同的比吸收系数(34.5),也可在此波长下测定一次光密度D652，求出叶绿素a、b的总量。CT=D652X100034.5实验步骤1.提取0.5g菠菜叶片80%丙酮碳酸钙和石英砂定容至25ml2.稀释

根据具体情况调整稀释倍数。3.测定：倒入1cm比色杯中,在分光光度计上测定645nm,663nm和652nm下的光密度值.重复测定2次,取平均值.4.计算：根据上述计算公式计算叶绿素浓度.根据下式计算叶绿素在叶片中的含量:叶绿素含量(mg/g鲜重)=CT

×提取液总量×稀释倍数样品重(g)×1