《医学微生物学》课件-球菌

球菌(Coccus)1.细菌的形态有哪些？2.列出与细菌致病性有关的物质。3.比较人工主动免疫与被动免疫。复习回顾1.列出化脓性球菌。2.阐述葡萄球菌、链球菌的致病物质和所致疾病。3.说出肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌所致疾病。教学内容和目标球菌(coccus):直径约1μm。个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌。肺炎链球菌双球菌(diplococcus)四联球菌（Tetrad）葡萄球菌（Staphylococcus）化脓性球菌(pyogenic

coccus)又称化脓性球菌（pyogeniccoccus）

少数对人类有致病性的球菌，能引起机体化脓性炎症。根据革兰染色不同分两类：

G＋球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等

G－球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等第一节葡萄球菌属(staphylococcus)最常见的化脓性球菌，分布广，医护人员带菌率可高达70%，是医院内感染的重要传染源。一、生物学性状1.形态与染色：球形，葡萄串状排列，G+菌，无鞭毛，无芽胞，体外不形成荚膜。2.培养特性

易培养:普通平板中生长良好、血平板生长更佳；培养条件：营养一般，兼性厌氧或者需氧，37℃，PH-7.4；菌落：直径约2nm，圆形，光滑型，有脂溶性色素，在血平板上可形成透明溶血环。产色素:金黄色、白色、柠檬色（脂溶性）腐生葡萄球菌（柠檬色）表皮葡萄球菌（白色）金黄色葡萄球菌（金黄色）金黄色葡萄球菌有透明溶血环。表皮葡萄球菌无溶血环。3.分类金黄色葡萄球菌：多为致病菌表皮葡萄球菌

腐生性葡萄球菌4.抗原构造葡萄球菌A蛋白（staphylococcalproteinA,SPA）SPA是存在于90%以上的金黄色葡萄球菌细胞壁表面的一种蛋白质，为完全抗原，能与人及多种哺乳动物的IgG1、IgG2和IgG4分子的Fc段非特异性结合。（1）具有抗吞噬作用（2）协同凝集试验SPAcapsulepeptidoglycanSPA的应用：协同凝集试验SPA与IgG分子的Fc段结合抗原葡萄球菌聚集在一起出现凝集现象5.抵抗力♥

无芽胞菌中抵抗力最强，耐干燥，对石炭酸、龙胆紫等敏感。♥

易产生耐药性，特别对青霉素G的耐药菌株高达90%以上。♥

由于抗生素的广泛应用，耐药菌株逐渐增多，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院感染最常见的致病菌。

长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触都是造成院内MRSA流行的危险因素。MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）MRSA＝超级细菌？2007年11月：JAMA刊登美国政府调查报告，被称为“超级病菌”MRSA正在美国国内蔓延，每年预计有超过9万人感染这一病菌，被列为世界三大最难解决感染性疾患第1位，年致死的人数可能超过艾滋病。1978年，医务人员在上海抽检了200株金黄色葡萄球菌，分离出的MRSA还不到5%。2007年11月：北京市卫生局关于印发《对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌病例监测与控制方案》的通知2010年，MRSA在医院内感染的分离率已高达60%以上。二、致病性与免疫性

1.致病物质

金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。

①

侵袭性酶：凝固酶-鉴定葡萄球菌有无致病性的重要标准；②外毒素：葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1(TSST-1);③表面结构或蛋白：如粘附素、荚膜、肽聚糖和SPA等。

使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热，100℃，30min或高压灭菌后仍保持部分活性；但易被蛋白酶破坏。凝固酶（coagulase）致病机理：葡萄球菌溶素（staphylolysin）损伤细胞膜的毒素，主要是

溶素；对多种哺乳动物RBC有溶血作用，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用；

溶素是一种外毒素，具有良好的抗原性；经甲醛液脱毒后可制成类毒素；作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区，破坏膜的完整性导致细胞溶解。杀白细胞素（leukocidin）只攻击中性粒细胞和巨噬细胞；与细胞膜受体结合，使细胞膜发生构型变化，膜通透性增高，细胞浆内的颗粒排除，细胞死亡；在抵抗宿主吞噬细胞，增强病菌侵袭力方面有意义。

肠毒素（enterotoxin）

约50%临床分离金黄色葡萄球菌可产生；耐热，抗胃肠液中蛋白酶的水解作用；产毒菌株污染牛奶、肉类等食物，经10h便产生大量肠毒素；作用机制：毒素与肠道神经细胞受体作用，刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食物中毒。表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin）

由质粒编码产生的一种蛋白质，可水解宿主表皮粒层的细胞内桥—桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中可引起烫伤样皮肤综合征(SSSS)，表现为弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微。毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）

由噬菌体I群29/52型金葡菌感染和产生。引起机体发热，增加对内毒素的敏感性;多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征(toxicshoksyndrome,TSS)。病人的临床表现主要包括急性高热、低血压、猩红热样皮疹伴脱屑，严重者发生休克。三、所致疾病感染类型所致疾病侵袭性局部感染全身感染毒素性食物中毒

烫伤样皮肤综合征SSSS毒性休克综合征TSS三、所致疾病疖痈2013年，7月18日，有网友爆料在福建泉州一家医院内的女婴在恒温箱内烤死的事件，引来了很多网友的关注。据悉，一名刚刚出生12天的女婴在恒温箱内死亡，其家属称孩子是被活活烤死，孩子的背部和腿部均有严重的溃烂，并且全身焦黑惨不忍睹。死婴的家属找医院要说法，院方出面解释称，恒温箱的最高温度在37度，根本不可能将初生的婴儿烤死，因此也不能百分百的确定女婴的死与恒温箱有直接关系。医院方面也站出来称，孩子是因为感染了葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征。因此身体的外表看上去就像烫伤一样。福建泉州“医院保温箱烤死婴儿”事件人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌的感染最为常见。

CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染，细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。凝固酶阴性葡萄球菌的致病性3.免疫性

人体有一定的天然免疫力,只有当皮肤黏膜受伤后,宿主免疫力降低时,才易引起葡萄球菌感染。感染后能获得一定的免疫力，但不强，难以防止再次感染。四、微生物学检查标本采集检查程序检查方法1.标本采集根据病情采集标本种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意：无菌操作，避免污染。2.检查程序脑脊液血液粪便、呕吐物直接涂片染色增菌培养分离培养（血平板）分离培养（高盐甘露醇平板）取可疑菌落鉴定试验药敏试验涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶其他鉴定试验报告初报脓液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液3.检查方法直接涂片镜检适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液）伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等初步报告：“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”

五、防治原则防注意消毒隔离注意个人卫生防止院内交叉感染防止耐药菌株产生治抗菌素药敏试验自身菌苗疗法第二节链球菌属(Streptococcus)大多数不致病，构成正常菌群，有些可引起各种化脓性炎症、毒素性疾病和超敏反应性疾病。一、生物学性状1.形态与染色：球形或卵圆形，链状排列，G+菌，无鞭毛、无芽孢。2.培养特性：营养要求较高，在含有血液、血清、葡萄糖的培养基中生长良好。最适温度为37℃，最适pH为7.4~7.6，需氧或兼性厌氧。3、抗原结构分类:

根据细胞壁中抗原结构（C多糖抗原）不同，分成A～V20个血清群，对人致病的链球菌菌株90%属A群！！多糖抗原核蛋白抗原荚膜类别溶血现象名称致病性甲型溶血性链球菌草绿色溶血环

溶血多为条件致病菌乙型溶血性链球菌完全溶血环

溶血致病力强丙型链球菌不溶血无致病性4、根据溶血现象分类:

按在血平板上培养后是否产生溶血分类根据溶血现象分类甲型溶链乙型溶链丙型链球菌5、抵抗力:加热60℃30min即被杀死；对一般消毒剂敏感，对青霉素、红霉素、氯霉素、磺胺等抗生素均敏感。二、致病性与免疫性1.致病物质

A群链球菌致病力最强，可产生多种外毒素和胞外酶。

胞壁成分等外毒素胞外侵袭酶类1)胞壁成分

(1)粘附素，包括：①脂磷壁酸（lipoteichoicacid,LTA）与生物膜有高度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要侵袭因素。②F蛋白（proteinF）位于化脓性链球菌细胞壁内，其结合区暴露在菌体表面，是纤维粘连蛋白（fibronectin,FBP）的受体。有利于细菌定植和繁殖。

(2)M蛋白（Mprotein）是A群链球菌的主要致病因子，M蛋白与心肌、肾小球基底膜有共同抗原,可刺激机体产生特异性抗体,损害人类心血管等组织。但在某些条件下，M蛋白与相应抗体形成的免疫复合物可引起急性肾小球肾炎等超敏反应。(3)肽聚糖A群链球菌的肽聚糖具有致热、溶解血小板、提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。

2）外毒素(1)致热外毒素（pyrogenicexotoxin）

是引起猩红热的主要毒性物质。对机体具有致热和细胞毒作用。(2)链球菌溶素（streptolysin）

溶解RBC、破坏WBC和血小板。链球菌溶素O（SLO）：对哺乳动物多种细胞有毒性作用链球菌溶素S（SLS）：对白细胞和多种组织细胞有破坏作用

透明溶血环抗体含量-诊断指标3）侵袭性酶(1)透明质酸酶（hyaluronidase）：

分解间质内透明质酸，使病菌易扩散。(2)链激酶（streptokinase,

SK）：

使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，利于病菌扩散。(3)链道酶（streptodomase,SD）：

亦称链球菌DNA酶，降解DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散。

透明质酸酶、链激酶、链道酶的扩散作用2.所致疾病A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%

淋巴管炎、蜂窝组织炎、扁桃体炎等。猩红热(3)超敏反应性疾病(1)化脓性感染(2)中毒性疾病风湿热急性肾小球肾炎

3.免疫性

感染后可获得一定的免疫力，主要是抗M蛋白抗体。

型别间无交叉免疫，故常发生反复感染。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。痰、脓、穿刺液咽拭子等脑脊液血液测抗原分离培养增菌培养(5%CO2葡萄糖肉汤)血平板（5%CO2）可疑菌落鉴定试验初步报告血清学鉴定（分群）杆菌肽试验

optochin胆汁溶菌试验其他鉴定敏感试验试验三、微生物学检查直接涂片染色血清学试验：抗O试验（ASOtest）

原理：毒素与抗毒素的中和试验，用SLO检测血清中的ASO。

方法：间接凝集。

结果：效价＞1:400单位有诊断意义。

意义：辅助诊断急性风湿热、风湿活动期、急性肾小球肾炎。

积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果。五、防治原则肺炎链球菌

S.pneumoniae

广泛分布于自然界，常寄居正常人的鼻咽腔中，多数不致病，仅少数有致病力，是细菌性肺炎、脑膜炎、支气管炎的主要病原菌。

形态与染色：G＋、矛头状、多成双排列；平面相对、尖面相背；无鞭毛、无芽胞，有厚荚膜。一、生物学性状2.培养特性条件：营养要求较高，兼性厌氧菌，5-10%CO2生长最好。产生自溶酶。液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清。普通琼脂平板：不生长。血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（α溶血）1.致病物质

荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素O等溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。二、致病性与免疫性2.所致疾病存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌，仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。可引起：大叶性肺炎，支气管炎，胸膜炎，脓胸，中耳炎，脑膜炎，败血症等。病后可获得型特异性免疫。检验程序痰、脓脑脊液血液直接涂片分离培养革兰染色、美兰染色荚膜肿胀试验增菌培养（葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤）（血平板）挑选可疑菌落纯培养初报兔血清肉汤小白鼠毒力试验涂片荚膜肿胀试验胆汁溶菌试验菊糖发酵Optochin试验药敏试验报告胆汁溶菌试验阳性：

加入胆汁或10%去氧胆酸钠，37℃，5-10min，激活本菌的自溶酶，出现溶菌现象。取肉汤培养液均匀涂于血平板上用optochin纸片贴于接种区中央（或分区划线法，纸片贴于1-2区），35℃需氧培养过夜，抑菌圈>18mm。Optochin敏感试验阳性：肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的鉴别

形态菌落血清胆汁菊糖Opto-小鼠毒肉汤溶菌chin力试验肺链甲链矛头状，稍大，湿润浑浊++++成双，扁平，有荚膜脐窝状圆形，较小，稍干沉淀