DB22T 3635-2024番茄晚疫病诊断与防治技术规程

22TechnicalcodeofpracticefordiagnosisandintegratedmanagenmentoftomatolateblightI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。喆、屈亚飞、张丹、孙西琳、马馨悦、龚镕烈、王1番茄晚疫病诊断与防治技术规程GB/T8321（所有部分）农药合理使用DB22/T3495—2023露地辣椒疫病诊断与防治技术由致病疫霉菌[Phytophthorainfestans（Mont.）deBar聚合酶链式反应polymerasechainreacti4诊断与防治流程21.1症状识别(见5.1)1.2病原鉴定(见5.2)2.1防治原则(见6.1)2.2防治方法(见6.2)1病害诊断(见第5章)图1番茄晚疫病诊断与防治流程5病害诊断5.1症状识别5.1.1样本采集采集具有典型症状的发病植株，用于症状识别与病原菌鉴定。5.1.2病害症状整个生育期均可发病，主要危害成株期的叶、茎和果实。具体如下：a)叶部症状：叶片感病多从叶缘开始发生，发病初期呈暗绿色不规则的水渍状病斑，后逐渐变成褐色，边缘不明显。湿度大时迅速扩大，叶片背面病、健交界处产生白色霉状物，严重时整个叶片腐烂，并蔓延至叶柄和主茎。典型症状见图A.1;b)茎部症状：茎部感病病斑呈暗褐色，形状不规则，稍凹陷，后期变成黑色。湿度大时，边缘有明显的白色霉状物，茎秆腐烂易折断。典型症状见图A.2;3DB22/T3635—2b)用洁净解剖针直接挑取病部或培养基上的霉状物，置水滴中，并使病原物分散开；c)加盖盖玻片，使盖玻片的一侧边缘与水滴边缘接触，并慢慢放下盖玻片，待显微观察。囊梗3根~5根成束由叶背气孔伸出，单轴分枝，具2个以上分枝，且分枝略呈节状。形态见图B.1。形态见图B.2。5.2.2.1.1在超净工作台上，将采集的病叶浸于75%酒精中，表面消毒30s,再用3%次氯酸钠灭菌2min~3min,用无菌水漂洗3次，吸水纸吸干水后将病、健交界处剪成5mm²~10mm²小块。5.2.2.1.2取4小块病叶置于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上，在25℃培养箱中培养3d~行。经检测得到ITS序列长度为750bp~760bp。检测结果见图C.1。定为番茄致病疫霉菌，其ITS序列长度为754bp。详细序列见附录C.3。46.2.1选择抗病品种6.2.2加强栽培管理6.2.2.1合理轮作6.2.2.2清洁田园6.2.2.3土壤消毒6.2.2.4田间管理6.2.3设施生态防控6.2.3.1降低湿度6.2.3.2调控温度6.2.4化学防治6.2.4.1农药选用与管理6.2.4.2施药方法6.2.4.2.1烟雾法56(资料性)7DB22/T3635—(资料性)显微形态见图B.1和图B.2。图A.4病原菌游动孢子囊梗(显微镜倍数40×10)图A.5病原菌游动孢子囊(显微镜倍数40×10)图A.6PDA培养基上的菌落形态(左：正面右：反面)8(规范性)C.1.2.194℃预变性3min;94℃变性30s,55℃退火50s,72℃延伸1min,共35个循环；72℃延伸10min;4℃保存。C.1.2.2PCR产物检测使用1%的琼脂糖凝胶，用0.5×TBE电泳缓冲液，100V电泳30min~40C.1.2.3在凝胶成像系统进行电泳结果观察，判断是否为预扩增长度的条带，无非特异性条带，且浓度大于50ng/μL。凝胶成像检测PCR扩增产物，经检测得到病原菌ITS序列长度为750bp~760bp。样本9将PCR产物纯化后测序，测试结果显示番茄晚疫病疫霉菌ITS序列片段长度为1AACCGTTTCAACCCAATAGTACTTGGCGGCATTTTAAACCACTGTGGGGAACGCTGCGAAAGTGAGTCATAACGCATATTAAACTTGGCTACTAAACTGTACTTCTCTTTATGGAGAAATATGGACTGGTATCCATTTGG1234567