动物细胞培养导学案

动物细胞培养导学案学习目标阐明动物细胞培养的条件和过程简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程，认同单克隆抗体在临床上有中重要的应用价值阐明利用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和该技术的应用前景基础知识一、动物细胞培养的概念从动物体中取出相关组织，将它们，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞的技术。原理：地位：二、动物细胞培养的条件营养条件：其他条件：（1）培养基构成：合成培养基：将细胞所需的（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按严格配制的培养基。血清等一些天然成分：含有（2）培养基类型：2.①对培养液和所有培养用具进行处理。②在下进行操作③：清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。3.（1）适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；（2）适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________（3）适宜的渗透压：目的________________________。4.（1）气体组成及作用：（2）具体操作：通常采用或。置于中进行培养。三、动物细胞培养的过程1.取动物组织（1）取材:一般取材于或（2）取材原因:2.制成细胞悬液（1）将组织分散成单个细胞①方法:②原因:Ⅰ.从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此Ⅱ.能使，更易进行物质交换。用培养液将细胞制成细胞悬液。<思考讨论>进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？3.原代培养（1）操作方法：将放入培养皿或培养瓶内，置于中培养。（2）体外培养的动物细胞类型①：能够悬浮在培养液中生长增殖。会因、和等因素而分裂受阻。②：需要贴附于某些基质表面才能生长增殖（），大多数细胞属于此类。除受密度、有害代谢物、营养物质影响外，还会发生现象。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到时，细胞通常会。4.分瓶、进行传代培养（1）需分瓶进行传代培养的原因：悬浮培养的细胞会因、和等因素而，贴壁细胞在生长增殖时，除受上述因素影响外，还会发生现象（2）方法：①收集细胞a.悬浮生长类：b.贴壁生长类：重新用等处理，使之分散成单个细胞，然后再用收集②将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养<重要名词解释>①原代培养：通常将________的细胞培养，即动物组织经_____后的________称为原代培养；②传代培养：将______的细胞培养称为传代培养；③细胞贴壁：______体外培养的细胞需要___________________才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的____上，这种现象称为细胞贴壁；④接触抑制：当_____细胞生长到_____________时，细胞通常会_____________；<思考讨论>有关动物细胞培养的问题1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？2.动物细胞培养和植物组织培养有什么相同和不同之处？四、干细胞培养及其应用1.干细胞的概念：动物和人体内仍保留的的细胞。在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。2.干细胞的分布：干细胞存在于_________、_____和_______等多种组织和器官中；3.干细胞的分类：包括和等。（1）胚胎干细胞（简称）①分布：存在于________中②特点：具有分化为，并进一步形成机体的的潜能③应用实例：ES细胞在体外分化成（2）成体干细胞①分布：存在于________________中②举例：骨髓中的___________、神经系统中的__________、睾丸中的___________等；③特点：一般认为，成体干细胞具有，只能分化成，不具有发育成的能力④发现最早、研究最多的、应用最成熟的实例：_____________主要存在于成体的_____、_______和______中4.干细胞的应用（1）应用原理：有着及的干细胞，与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关。（2）应用实例：造血干细胞：治疗及一些放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病神经干细胞：治疗和（如帕金森病、阿尔茨海默病等）（3）面临的问题：（4）应用展望：干细胞将在、与等领域发挥大作用。5.诱导多能干细胞（iPS细胞）（1）胚胎干细胞的局限性：胚胎干细胞必须从_____中获取，涉及________；因而限制了在医学上的应用。（2）诱导多能干细胞概念：通过，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞，简称。诱导方法：①（成纤维细胞以及已分化的T细胞、B细胞均可）；②用形成。（3）诱导多能干细胞优点：①诱导过程②iPS细胞可以来源于，将它移植回病人体内后，理论上可以。（4）诱导多能干细胞的应用：可治疗，在治疗、等领域的研究也取得了新进展课堂检测一、选择题1．在进行动物细胞培养时，需要()A．将细胞置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养B．充入5%CO2以刺激细胞正常呼吸C．加入经高压蒸汽灭菌的血清以提供营养D．定期更换培养液以清除代谢产物2．相对细菌和植物细胞而言，动物细胞离体培养更需关注培养基的渗透压，这是因为动物细胞()A．没有中央液泡，不能发生渗透作用B．渗透压远高于细菌或植物细胞的渗透压C．没有细胞壁，易吸水涨破D．生长缓慢，各生长阶段对环境的渗透压要求不同3．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列叙述正确的是()A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块B．恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸C．为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素D．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小4.如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)，据图分析，下列说法错误的是()A．动物细胞培养一般使用液体培养基B．OA段的培养属于原代培养C．AB段可能发生了接触抑制现象，可用胰蛋白酶处理使细胞分散开来D．培养过程中，细胞可通过有丝分裂和减数分裂实现细胞增殖5．干细胞是一类未参与分化或未完全分化的细胞，分裂能力强。按照其来源分为胚胎干细胞和成体干细胞(如造血干细胞、神经干细胞)。下列关于干细胞的说法错误的是()A．胚胎干细胞不具有发育成完整个体的潜能B．胚胎干细胞的分化程度小于造血干细胞C．骨髓移植治疗白血病就是利用了造血干细胞能分化成各种血细胞的能力D．将带有遗传标记的胚胎干细胞植入早期胚胎，通过组织化学染色可追寻胚胎发育中细胞分化和器官形成的规律6．下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。相关叙述正确的是()A．用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉干细胞B．生物反应器中应充以95%空气加5%CO2的混合气体，CO2的作用是刺激细胞呼吸C．培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长D．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重二、非选择题7．为了研究海拉细胞的细胞增殖，以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)为测定指标，完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论(要求：细胞培养至培养液中营养物质不足。实验思路涉及的主要用具须写出，但具体操作过程不作要求。实验条件适宜)回答下列问题：(1)完善实验思路：①将已知细胞密度的海拉细胞悬液，用移液管加入各个含细胞培养液的培养瓶中，然后置于CO2培养箱中培养。②③所得数据进行统计与处理。(2)预测实验结果(以坐标曲线图形式表示实验结果)：(3)分析与讨论