胚胎工程技术及其应用-辽宁省锦州市义县高年级中学人教版高中生物选择性必修3课件

义县高中刘占江2.3.2胚胎工程技术及其应用手术法移胚胚胎分割背景资料1：1、引进一头良种成年奶牛需3万---5万元2、一头牛一胎只产一头牛犊，一生只生育4、5次。实际问题:

牛的生育率虽然很低，但是一头母牛一生排出的卵细胞约200个左右，卵巢中卵母细胞数量是它的1000倍（20万）；公牛平均每次射精5ml,精子数50亿。牛的自然繁殖的速度太慢，不能满足生产需要；那如何实现良种牛快速繁殖呢?

母牛其实是有很强的生殖潜能的，只是没有激发出来。背景资料1：1982年世界首例“试管牛”犊问世1、“试管牛”是怎么回事？2、“试管牛”是应用哪些技术生产的？背景资料2：试管动物:是指通过人工操作使卵子在体外受精，经培养发育为早期胚胎后，再进行移植产生的个体。个体精子卵子受精卵体外受精早期胚胎子宫胚胎移植早期胚胎发育胚胎工程技术（二）胚胎移植（三）胚胎分割（一）体外受精2.3.2胚胎工程技术及其应用方法场所是否培养小型动物大型动物输卵管卵巢借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜否，直接与获能的精子受精是，需培养至MⅡ中期注射促性腺激素（一）体外受精1、卵母细胞的采集和培养B超活采仪活体采集的牛卵母细胞牛卵母细胞牛卵巢2、精子的采集和获能精子在进行体外受精前需要精子获能处理体外精子获能的方法：1）培养法:放入人工配制的获能液中如：啮齿动物、家兔和猪等2）化学诱导法:放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中如：牛、羊等获能的精子和培养成熟的卵子，在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱哺乳动物体外受精过程示意图注意：精子离心处理的目的是，去除精清中的抑制获能的物质。3、体外受精1.起保温作用，使温度控制在合适范围内。2.作为缓冲液，维持PH值。3.促进细胞分裂，促进呼吸作用。CO2培养箱二氧化碳培养箱（95%空气和5%CO2

）作用：胚胎移植采集卵母细胞体外培养采集精子体外获能体外受精早期胚胎培养受体牛（时期：）

1）超数排卵（试剂）

2）活体取卵（仪器）

3）从屠宰的卵巢取卵方法方法试剂（试剂）成熟的卵子获能的精子MII中期方法（1）体外受精（2）胚胎的早期培养精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。发育培养液成分：两盐：无机盐、有机盐两酸：氨基酸、核苷酸两素：维生素、激素动物血清两盐：无机盐、有机盐两酸：氨基酸、核苷酸两素：维生素、激素动物血清葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等

动物细胞培养液成分：发育培养液成分：（3）培养液成分比较获能液：受精溶液：发育培养液：①用培养法使精子获能；②在获能溶液中完成受精作用；是专门的，精子、卵子完成受精的溶液；是进行早期胚胎培养的；（4）几种溶液作用比较（二）胚胎移植胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植时间不同：牛、羊：小鼠、家兔：试管婴儿：桑椹胚或囊胚阶段可在更早的阶段移植8~16个细胞阶段注：胚胎发育的主要场所是母体。（二）胚胎移植良种公牛良种母牛良种胚胎代孕母牛良种犊牛将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。（1）概念（二）胚胎移植1、供、受体的选择和处理2、配种或人工受精3、胚胎的收集、检查、培养或保存4、胚胎的移植及移植后的检查等生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代（2）实质：（3）胚胎移植的

基本程序：冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查……同期发情处理……（雌性激素）超数排卵（促性腺激素）手术法非手术法优良供体公牛配种胚胎移植的犊牛牛胚胎移植过程示意图：（4）优良供体母牛（遗传性状优良，生产能力强）健康受体母牛（有健康体质和正常生殖能力）【归纳】①该过程中两次使用促性腺激素，

第一次对受、供体进行同期发情处理；

第二次用于供体的超数排卵。②该过程中的两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；

第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。③产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体牛，

性别取决于公牛提供何种类型的精子。④冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子。冲卵胚胎检查检查胚胎的发育状况，处于桑椹胚或囊胚时期胚胎移植或保存手术法移胚已配种母牛，在右肋部切口，找到非排卵侧子宫角，再把吸有胚胎的注射器或移卵管刺入子宫角前端，注人胚胎；未配母牛在每侧子宫角各注入一个胚胎；然后将子宫复位，缝合切口。非手术法移胚在发情后第六至第九天(即胚泡阶段)进行，过早移植会影响受胎率。采用胚胎移植枪和0．25毫升细管移植的效果较好。将细管截去适量，吸入少许保存液，吸一个气泡，然后吸人含胚胎的少许保存液，吸人一个气泡，最后再吸取少许保存液。将装有胚胎的吸管装入移植枪内，通过子宫颈插入子宫角深部，注入胚胎。胚胎移植不受时间地域限制，节省购买种畜的费用。利用胚胎冷冻技术，建立胚胎库，保存品种资源和濒危物种。胚胎移植现场世界首例冷冻胚胎克隆水牛“盼盼”与“代孕妈妈”盼盼”在植入娘胎之前，在实验罐度过了2个月的冷冻期。胚胎冷冻技术的研究成功，可以长时间保存优良品种的遗传资源和濒危物种；突破了时间和地域的限制，便于胚胎运输，大量节省购买种畜的费用。（5）胚胎移植的主要生理学基础（1）哺乳动物发情排卵后，生殖器官变化相同。（2）胚胎形成后呈游离状态，有利于胚胎收集。（3）无免疫排斥反应。（4）供体胚胎与受体子宫可建立正常生理和组织联系，

遗传特性不受影响。受体产下胚胎移植的后代（6）胚胎移植的优势：可以充分发挥雌性优良个体（胚胎供体）的繁殖潜力。供体受体职能：只产生具有优良遗传特性的胚胎职能：担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务提供胚胎的个体-----良种雌性动物接受胚胎的个体-----一般品种的雌性动物（使供体的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍）（7）胚胎移植的意义：1)加速育种工作和品种改良；2)大量节省购买种畜的费用；3)一胎多产；4)保存品种资源和濒危物种；5)可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期，

增加一生繁殖的后代数量。拓展：比较试管动物和克隆动物试管动物克隆动物发育起点生殖方式技术手段遗传物质遗传规律受精卵重组细胞有性生殖

无性生殖体外受精、胚胎移植核移植技术、胚胎移植来自2个亲代主要来自核供体

遵循

不遵循1、概念:（三）胚胎分割采用机械方法将早期胚胎切割成2等份，4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。2、特点：产生遗传性状相同的后代是进行遗传学研究的宝贵材料，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。（三）胚胎分割3、选