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文档简介
蛋白质技术作业总结1、名词解释肽单位:又称为肽基(peptidegroup),是肽键主链上反复结构。是由参于肽链形成氮原子,碳原子和它们4个替换成份:羰基氧原子,酰氨氢原子和两个相邻α-碳原子组成一个平面单位。疏水内核:蛋白质结构共同特征,在分子内部由一个由疏水侧链堆积形成结构。有稳定结构作用。分子伴侣:是以热休克蛋白为代表一类参与蛋白质转运、折叠、聚合、解聚、错误折叠后重新折叠、水解以及原始蛋白质活性调控等一系列功效保守蛋白质家族。2、哪些氨基酸强烈倾向于形成阿尔法螺旋?哪些非常不利于形成阿尔法螺旋氨基酸?强烈倾向于形成阿尔法螺旋氨基酸:谷氨酸Glu、蛋氨酸Met、丙氨酸Ala、亮氨酸Leu
非常不利于形成阿尔法螺旋氨基酸:丝氨酸Ser、酪氨酸Tyr、甘氨酸Gly、脯氨酸Pro3.简述β-折叠特征。β-折叠结构形成通常需要两条或两条以上肽段共同参与,即两条或多条几乎完全伸展多肽链侧向聚集在一起,相邻肽链主链上氨基和羰基之间形成有规则氢键,维持这种结构稳定。β-折叠结构特点以下:包含肽段较短,通常为5—10个氨基酸残基。(2)借相邻主键间氢键维系,在反平行层中是窄对氢键,平行层中是宽对氢键。(3)相邻肽链走向能够是平行和反平行两种。(4)主链骨架伸展展现锯齿状。4、结构域、亚基基础区分是什么?一个分子中结构域区是以共价键相连,而亚基是以非共价键。5.图解蛋白质结构层次体系6.请列出建立一个蛋白质纯化试验室所需要基础设备。样品处理:
1.低温冷冻高速离心机,常规离心机,超声破碎仪,机械破碎仪
2.不一样体积超滤装置,双蒸水装置,冷冻干燥机,冰箱(4,-20,-70摄氏度)
蛋白质分离纯化:
一套蛋白质分离纯化系统(比如法玛西亚AKTA系统),同时配置多种类型层析柱和填料;高效液相系统。
检测判定系统:
电泳仪,WESTERNBLOT转膜仪(半干或湿转),干胶仪,紫外分光光度计,酶标仪。7、经过半合成对蛋白质进行工程操作标准是利用非共价键相互作用,二硫键,常规肽键(经过化学法或酶法产生),其她非肽共价键将较小肽段连在一起。8、简明描述试验设计方案:以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个目蛋白基因,并使之在大肠杆菌中进行表示。9、测定蛋白分子量方法有哪些?(思索:设计一试验方案测定蛋白质分子量)沉降法(超速离心法)、凝胶过滤法、SDS.测定总蛋白质量方法。凯氏定氮法、双缩脲法、Fol
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