医学微生物学 第四章 细菌感染的检查方法与防治原则 学习资料

第四章细菌感染的实验室诊断与防治原则病原菌检测血清学诊断

第一节细菌感染的实验室诊断采取标本应无菌操作；不同情况（如病期、分布、排出部位等）采不同标本。并尽可能采集病变明显部位的材料；采集标本应在使用抗生素之前；标本必须新鲜，尽快送检，注意冷藏（少数应保暖）；测抗体时尽量采集双份血清：急性期、恢复期。

一、标本采集与送检的原则病原菌检测病原菌的检测程序病原菌检测标本直接涂片镜检（检测细菌形态特征）分离培养生化试验血清学试验动物试验明确诊断药物敏感试验检测抗原检测核酸形态结构检查显微镜放大法染色法普通光学显微镜电子显微镜复染色法：用2种以上染料革兰染色抗酸染色负染色法：墨汁负染荧光显微镜（掌握－实验课）

细菌的人工培养

培养基细菌在培养基中的生长情况培养基cultruemedium用人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。常用培养基种类

1、按物理性状分：液体培养基+1.5-2.5%琼脂固体培养基+0.3-0.5%琼脂半固体培养基2、按营养组成和用途分厌氧培养基基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基+血液、血清、生长因子等+化学物质，抑制某些细菌、利于另外一些细菌生长，如：SS培养基利用生化反应鉴别细菌，如：葡萄糖、乳糖等固体培养基中细菌的生长情况菌落（S型）菌苔

菌落（R型）菌落（colony）：

单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团。液体培养基中细菌的生长情况混浊、沉淀、菌膜沉淀生长混浊生长表面生长半固体体培养基中云雾状生长沿穿刺线生长有鞭毛细菌无鞭毛细菌（二）细菌的鉴定

1.

形态学鉴定：

2.生化试验鉴定：对糖和蛋白质的分解，检测肠道菌

3.

血清学鉴定：已知抗体检测未知的纯培养菌

4.

动物试验：测定细菌毒力

病原菌检测（掌握－实验课）

（三）细菌抗原的检测

EIA,IF,

ELISA,

Westernblot,对流免疫电泳（四）检测细菌核酸

核酸杂交

PCR

基因芯片（genechips）病原菌检测

用已知细菌或特异性抗原检测血清中的有无

相应特异性抗体及其动态学变化。适用于抗原性较强的细菌或病程较长的感染

性疾病的诊断，或流调、疫苗接种后效果评价。

若恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高

4倍或4倍以上，有诊断意义。

血清学诊断第二节细菌感染的防治原则一、人工主动免疫：主要用于预防（一）疫苗

第一代：死疫苗，减毒活疫苗

第二代：亚单位疫苗、基因工程疫苗

第三代：重组载体疫苗、核酸疫苗等（二）类毒素

死疫苗与活疫苗的比较种类活疫苗死疫苗制备特点减毒或无毒死菌，保持免疫原性制备方法非正常培养理化方法接种次数1次，量小，可在体内增殖，类似轻型感染或隐性感染2-3次，量大，在体内不增殖，发热或局部肿痛反应等免疫类型体液免疫，细胞免疫体液免疫免疫效果好，维持时间长（1-5年）较差，维持时间短（0.5-1年）安全性保存可能毒力回复不易保存好易保存人工主动免疫（二）类毒素

(toxoid)

外毒素经0.3%-0.4%甲醛处理失去毒性，保留抗原性精制抗毒素：加入佐剂，延缓吸收，刺激机体产生抗体联合疫苗：如百白破三联疫苗

二、人工被动免疫：主要用于紧急预防和治疗抗毒素（含抗体的免疫血清）血清丙种球蛋白其他免疫制剂：IFN-γ，CSF等。第二节细菌感染的防治原则种类：

抗毒素（含抗体的免疫血清）类毒素/外毒素免疫产生用于外毒素的治疗和紧急预防注意I型超敏反应

血清丙种球蛋白其他免疫制剂：IFN-γ，CSF等。人工被动免疫四细菌感染的治疗一、抗菌药物的种类抗菌药物包括抗生素和化学合成抗菌药物二、抗菌药物的主要作用机制影响细胞壁的合成:青霉素影响细胞膜的功能:多粘菌素影响蛋白质的合成:链霉素(30S),红霉素(50S)影响核酸代谢:氧氟沙星四细菌感染的治疗三、用药原则选择合适的药物剂量要适当交替用药联合用药小结细菌分离鉴定的程序