新教材高中生物选择性必修3课件2：3 2 2 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定(人教版)

第2节第2课时将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定基因工程的基本操作程序目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞第一步第二步第三步第四步目的基因的检测与鉴定关于公司Clickheretoaddtotitle将目的基因导入受体细胞第三步转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。将目的基因导入受体细胞的方法将目的基因导入植物细胞将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞农杆菌转化法花粉管通道法——显微注射法——Ca2+处理法我国科学家独创一、将目的基因导入植物细胞②在植物授粉后一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。花粉卵细胞精子花粉管子房壁①用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中（一）花粉管通道法方法：1、农杆菌特点：②农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。①在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有侵染能力。Ti质粒T-DNA（二）农杆菌转化法2、过程目的基因插入Ti质粒的T-DNA上导入植物细胞整合到受体细胞的DNA上表达转入农杆菌1、方法：2、操作:显微注射技术目的基因的表达载体提纯取卵（受精卵）显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物显微注射法二、将目的基因导入动物细胞1、常用方法：Ca2+处理原核细胞（常选择大肠杆菌）可使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。3、过程：三、将目的基因导入微生物细胞（目的？）2、受体细胞：（原因？）繁殖快，多为单细胞，遗传物质相对较少。Ca2+处理细胞感受态细胞表达载体与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子生物种类

植物细胞

动物细胞

微生物细胞受体细胞导入方法受精卵体细胞受精卵原核细胞花粉管通道法农杆菌转化法显微注射法Ca2+处理法目的基因导入受体细胞方法小结按前面三个步骤进行了操作，是否可以确定目的基因进入了受体细胞并能维持稳定？是否可以确定目的基因一定能够进行表达？是否可以确定得到了新的性状？不一定！如何判断？关于公司Clickheretoaddtotitle目的基因的检测与鉴定第四步一、目的1、分子检测2、个体水平鉴定：③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等——检查是否成功②检测目的基因是否转录出了mRNA①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因二、类型1、检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因①首先取出转基因生物的基因组DNA；（1）方法:DNA分子杂交（2）过程:②将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记，以此做探针；③使探针和转基因生物的基因组杂交，若显示出杂交带，表明目的基因已插入染色体DNA中。（一）检测15N15N变性变性三、方法2、检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带，表明目的基因转录出了mRNA。3、检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交蛋白质脱分化提取苏云金杆菌Bt毒素蛋白抗体出现杂交带（1）方法:（2）过程:（二）鉴定——抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。类型步骤检测内容方法分子检测第一步转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因DNA分子杂交技术（DNA和DNA之间）第二步目的基因是否转录出mRNA分子杂交技术（DNA和mRNA之间）第三步目的基因是否翻译形成蛋白质抗原-抗体杂交技术（抗原和抗体之间）个体水平鉴定抗虫或抗病的接种实验，以确定是否具有抗性以及抗性程度；基因工程产品与天然产品的功能活性比较，以确定功能活性是否相同。目的基因的检测与鉴定方法小结四步缺一不可！核心知识小结巩固提升1.下列关于基因表达载体构建的相关叙述中，不正确的是(

)A.需要限制酶和DNA连接酶B.抗生素抗性基因可作为标记基因C.在细胞外进行D.启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段DNA序列D2.利用现代生物科技，人们成功培育出了世界上第一例体型比普通小鼠大1.8倍的转基因“超级小鼠”。下列相关叙述正确的是(

)A.将含有目的基因的DNA直接注入到小鼠体内B.该“超级小鼠”的培育利用到了显微注射技术C.采用的受体细胞是雌性动物的卵细胞D.目的基因导入受体细胞前不用提纯B巩固提升3.下列有关基因工程中目的基因的检测与鉴定的说法错误的是()A.检测转基因生物的DNA上是否插