生物制药工艺流程及质量控制练习题集

综合试卷第=PAGE1*2-11页（共=NUMPAGES1*22页） 综合试卷第=PAGE1*22页（共=NUMPAGES1*22页）PAGE①姓名所在地区姓名所在地区身份证号密封线1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和所在地区名称。2.请仔细阅读各种题目的回答要求，在规定的位置填写您的答案。3.不要在试卷上乱涂乱画，不要在标封区内填写无关内容。一、填空题1.生物制药工艺流程主要包括_______、_______、_______、_______、_______、_______等步骤。

①原料处理

②细胞培养

③蛋白质表达

④蛋白质纯化

⑤产品精制

⑥产品包装

2.生物制药的质量控制包括_______、_______、_______、_______等环节。

①原料质量控制

②生产过程控制

③产品质量控制

④市场抽检

3.下列哪项不是细胞培养的常见设备？_______

A.生物反应器

B.通风柜

C.离心机

D.流式细胞仪

答案：D

4.以下哪项是蛋白质纯化的常用方法？_______

A.凝胶过滤

B.离子交换

C.膜过滤

D.基质层析

答案：A

5.下列哪种因素对生物制品的质量影响最大？_______

A.原料质量

B.生产过程控制

C.产品稳定性

D.包装质量

答案：A

答案及解题思路：

1.解题思路：生物制药的工艺流程是一个复杂的过程，从原料处理到产品包装，每个步骤都。原料处理是为了获得高质量的生物活性物质，细胞培养是生物制药的基础，蛋白质表达和纯化是获取高纯度蛋白质的关键步骤，产品精制保证了产品符合质量标准，最后产品包装保证了产品的稳定性和安全性。

2.解题思路：质量控制是保证生物制药质量的关键，原料质量控制保证了生产过程的起点，生产过程控制监控了整个生产流程，产品质量控制是对最终产品的检验，市场抽检则是对已上市产品的监督。

3.解题思路：流式细胞仪主要用于细胞计数和细胞表面标记物的检测，不是细胞培养的常规设备，而生物反应器、通风柜和离心机都是细胞培养中常用的设备。

4.解题思路：凝胶过滤是一种基于分子大小进行分离的方法，是蛋白质纯化的常用方法之一。

5.解题思路：原料质量直接影响到生物制品的纯度和活性，因此原料质量是影响生物制品质量的最大因素。虽然生产过程控制、产品稳定性和包装质量也很重要，但它们都是在原料质量的基础上进行的。二、选择题1.生物制药中，常用的细胞株是_______。

A.E.coli

B.酵母菌

C.菌株

D.细胞系

2.在生物制药工艺中，哪项操作步骤用于去除细胞中的DNA？_______

A.皂化处理

B.沉淀分离

C.过滤

D.离心

3.蛋白质纯化过程中，最常用的缓冲体系是_______。

A.磷酸盐缓冲液

B.硫酸盐缓冲液

C.醋酸盐缓冲液

D.氨水

4.生物制药的质量标准主要依据_______来制定。

A.GMP标准

B.FDA标准

C.EU标准

D.ICH标准

5.在生物制药工艺中，用于测定蛋白含量的方法主要有_______。

A.酶联免疫吸附试验

B.比色法

C.重量法

D.核磁共振

答案及解题思路：

1.答案：D

解题思路：E.coli是细菌，而生物制药中常用的细胞株通常是哺乳动物细胞，如ChineseHamsterOvary(CHO)细胞，或酵母菌，它们是用于生产蛋白质药物的常用细胞系。

2.答案：B

解题思路：去除细胞中的DNA通常采用沉淀分离的方法，通过加入特定的化学试剂使DNA与细胞分离。

3.答案：A

解题思路：磷酸盐缓冲液是最常用的缓冲体系，因为它能提供较宽的pH范围和较好的生物相容性。

4.答案：D

解题思路：国际协调会议（ICH）的标准被全球广泛接受，因此生物制药的质量标准通常会参考ICH标准。

5.答案：A

解题思路：酶联免疫吸附试验（ELISA）是最常用的测定蛋白含量的方法之一，因其操作简单、灵敏度高等特点在生物制药中被广泛应用。三、判断题1.生物制药的工艺流程与化学药品生产工艺相同。（×）

解题思路：生物制药的工艺流程与化学药品生产工艺有所不同。生物制药涉及的是生物大分子（如蛋白质、多肽、核酸等）的生产，而化学药品通常是由小分子有机化合物合成。生物制药的工艺流程通常包括细胞培养、发酵、提取、纯化等步骤，这些步骤与化学药品的生产流程有显著差异。

2.生物制药的质量控制主要针对产品的安全性和有效性。（√）

解题思路：生物制药的质量控制确实是主要针对产品的安全性和有效性。由于生物制药可能引起严重的免疫反应或其他副作用，保证其安全性。同时生物制药的有效性也是评价其质量的关键标准。

3.细胞培养过程中，应保证温度和pH值的稳定性。（√）

解题思路：细胞培养过程中，温度和pH值的稳定性对细胞的生长和代谢。任何的波动都可能导致细胞生长不良或死亡，因此需要严格控制培养环境的温度和pH值。

4.蛋白质纯化过程中，离心操作是最后一步。（×）

解题思路：蛋白质纯化过程中，离心操作不是最后一步。通常，蛋白质纯化的步骤包括沉淀、过滤、离心、层析等。离心操作可能是其中一个步骤，用于去除不溶物质或沉淀，但它并不是纯化过程的最终步骤。

5.生物制药的质量标准包括原料、生产过程和产品的检验。（√）

解题思路：生物制药的质量标准确实包括原料、生产过程和产品的检验。这保证了从原料到最终产品的每个环节都符合规定的要求，以保证产品的安全性和有效性。

：四、简答题1.简述生物制药工艺流程中的细胞培养步骤。

解答：

1.1选择合适的细胞系或细胞株。

1.2制备细胞培养用的培养基，包括基础培养基和添加剂。

1.3对细胞培养器皿进行消毒和灭菌处理。

1.4将细胞接种到培养皿中，并置于适宜的细胞培养箱中。

1.5定期更换培养基，添加生长因子和抗生素。

1.6监测细胞生长状况，包括细胞密度、形态等。

1.7收获培养的细胞，进行后续处理。

2.介绍蛋白质纯化过程中的几种常用方法。

解答：

2.1离心分离：利用离心力将混合物中的不同组分分离。

2.2凝胶过滤：通过凝胶床截留大分子物质，使小分子物质通过。

2.3沉淀：通过改变pH值、盐浓度或温度等条件使蛋白质沉淀。

2.4离子交换层析：利用蛋白质与离子交换树脂之间的电荷相互作用进行分离。

2.5膜分离技术：包括超滤、纳滤和反渗透等，用于去除溶液中的小分子物质。

3.简述生物制药的质量控制环节。

解答：

3.1原料质量检验：对起始原料、培养基、添加剂等进行检测。

3.2生产过程控制：监控生产过程中的关键参数，保证工艺稳定。

3.3中间产品质量检验：对培养液、细胞培养物、半成品等进行检测。

3.4成品质量检验：对成品进行生物学活性、纯度、无菌性等检测。

3.5不良反应监测：收集和评价药物使用过程中的不良反应。

4.说明生物制药在储存和运输过程中的注意事项。

解答：

4.1低温储存：多数生物制药需要低温储存，以保持其稳定性和活性。

4.2防止冻结：避免药品在储存和运输过程中冻结，以免影响活性。

4.3避光：包装应具有避光性，防止光降解。

4.4防潮：保持包装的密封性，防止潮气侵入。

4.5温度控制：在运输过程中使用冷藏或冷冻设备，保持恒定的温度。

4.6防震：在包装和运输过程中防止药品受到震动和冲击。

答案及解题思路：

答案：

1.答案见上述解答部分。

2.答案见上述解答部分。

3.答案见上述解答部分。

4.答案见上述解答部分。

解题思路：

1.对细胞培养步骤的解答需明确每个步骤的目的和操作要点。

2.蛋白质纯化方法的介绍应结合具体技术原理和操作步骤。

3.质量控制环节的阐述需考虑每个环节的关键点和检测指标。

4.储存和运输注意事项的说明需结合药品特性和环境要求。五、论述题1.结合实例，说明生物制药工艺中可能出现的问题及其解决方案。

（1）实例：细胞培养污染问题

在生物制药中，细胞培养是获取药物成分的关键步骤。但是由于无菌操作不当，可能会导致细胞培养污染，从而影响药物质量和安全性。

（2）解决方案：

建立严格的无菌操作规程，对操作人员进行定期培训。

使用高效过滤系统和层流罩等设备，保证无菌操作环境。

采用生物安全柜进行细胞培养操作，减少污染风险。

（3）实例：蛋白表达不稳定问题

生物制药中，蛋白表达是获取药物活性成分的关键步骤。但是蛋白表达不稳定会导致药物质量波动，影响疗效。

（4）解决方案：

优化表达系统，提高蛋白表达水平。

调整培养条件，如温度、pH值、培养基成分等，保证蛋白表达稳定。

建立稳定的生产工艺，减少蛋白表达波动。

2.阐述生物制药质量控制的重要性。

（1）质量控制的重要性

生物制药质量控制是保证药物安全、有效和合规的关键环节。以下从几个方面阐述生物制药质量控制的重要性：

保障患者用药安全：质量控制有助于保证药物中不存在有害物质，降低患者用药风险。

保证药物疗效：质量控制可以保证药物中活性成分的含量和纯度，从而保证药物疗效。

促进合规生产：生物制药生产需符合相关法规和标准，质量控制有助于企业合规生产。

提升企业形象：高质量的产品有助于树立企业形象，增强市场竞争力。

（2）生物制药质量控制措施

建立严格的生产和质量控制流程，保证每个环节符合规定要求。

采用先进的检测设备和技术，提高检测精度和效率。

定期对生产设备和工艺进行评估，保证其符合质量要求。

加强员工培训，提高质量控制意识和技能。

答案及解题思路：

1.答案：

实例：细胞培养污染问题（1分）、蛋白表达不稳定问题（1分）

解决方案：无菌操作规程（1分）、使用高效过滤系统和层流罩（1分）、采用生物安全柜（1分）、优化表达系统（1分）、调整培养条件（1分）、建立稳定的生产工艺（1分）

解题思路：

结合实际案例，分析生物制药工艺中可能出现的问题，并提出相应的解决方案。从无菌操作、蛋白表达等方面进行阐述，保证答案的全面性和针对性。

2.答案：

保障患者用药安全（1分）、保证药物疗效（1分）、促进合规生产（1分）、提升企业形象（1分）

解题思路：

从四个方面阐述生物制药质量控制的重要性，保证答案的完整性和逻辑性。结合实际案例和法规要求，阐述质量控制的具体措施。六、案例分析题1.分析以下生物制药生产工艺过程中出现的问题，并给出相应的解决方案。

A.细胞培养过程中，细胞生长缓慢。

问题分析：细胞生长缓慢可能是由于培养基成分不适宜、培养环境不良、细胞污染或其他遗传或生理因素造成的。

解决方案：

1.检查培养基的成分，保证营养均衡，如补充氨基酸、维生素、生长因子等。

2.优化培养条件，如温度、pH、气体浓度（O2和CO2）等。

3.检查细胞污染，如细菌、真菌或病毒，必要时进行无菌操作。

4.考虑细胞本身的遗传稳定性，必要时进行细胞株的筛选或基因改造。

B.蛋白质纯化过程中，蛋白质浓度低于预期。

问题分析：蛋白质浓度低于预期可能是由于操作不当、设备问题、纯化步骤中的损失或其他工艺参数设置不当造成的。

解决方案：

1.重新审查操作流程，保证每一步骤正确执行。

2.检查设备是否正常工作，如离心机、层析柱等。

3.调整纯化步骤，如改变洗脱缓冲液、优化洗脱条件等。

4.评估蛋白在各个步骤中的损失，如吸附、洗脱和收集过程中。

2.分析以下生物制药质量控制案例，总结经验教训。

A.产品批次之间存在较大差异。

经验教训：批次间差异可能源于原材料的批次差异、操作人员的不一致性、设备维护不当或环境变化等。

总结：

1.加强原材料的批次控制，保证原料的一致性。

2.严格执行操作规程，减少人为误差。

3.定期维护和校准设备，保证设备状态稳定。

4.监控环境因素，如温度、湿度等，保持环境稳定性。

B.生产线发生污染，导致产品召回。

经验教训：污染可能源于操作不当、设备缺陷、环境控制不严或人员培训不足等。

总结：

1.加强员工培训，提高无菌操作和生物安全意识。

2.定期进行设备维护和清洁，保证无污染源。

3.实施严格的环境监测和消毒程序。

4.建立应急预案，一旦发生污染，能够迅速响应并采取措施。

答案及解题思路：

A